1、27药品评价 Drug Evaluation 2024,21（1）市售头孢克肟颗粒质量分析与风险评价卢蓉娜1，罗枭灼1，吕冠欣1,21.佛山市顺德区药品检验所，广东佛山528300；2.国家药品监督管理局药物代谢研究与评价重点实验室，广东广州510515摘要：目的 对市售头孢克肟颗粒进行质量分析，为提高产品质量的均一性和标准检验方法的改进提供参考。方法 采用法定检验方法对 7 家生产企业共 28 批头孢克肟颗粒进行全项检验，并对检验结果进行统计分析；测定溶出度曲线，找出仿制样品体外溶出行为与原研药物的差异；测定产品聚合物和有关物质，考察不同温湿度存储条件下聚合物和特定杂质的变化。结果 28 批
2、样品按法定检验标准检查均合格，但部分产品检验标准、储存条件、是否含糖和产品标签之间存在不一致；水分、体外溶出曲线和聚合物三个项目上存在较大差异。7 家生产企业中仅 1 家生产企业对聚合物进行了控制，在未进行聚合物控制的 6 家生产企业中有 3 家生产企业的产品聚合物检测结果偏高，接近或等于标准限值，A 生产企业的溶出曲线与其他企业存在较大差异，D 生产企业的水分平均值远高于其他生产企业。高湿条件下导致聚合物和特定杂质含量上升。结论 头孢克肟颗粒总体质量合格，但仍需要进一步完善统一标准，加强质量控制。关键词：头孢克肟颗粒；聚合物；溶出曲线；有关物质；风险评价DOI:10.19939/ki.167
3、2-2809.2024.01.06Quality Analysis and Risk Assessment of Commercially Available Cefixime GranulesLU Rongna1,LUO Xiaozhuo1,LYU Guanxin1,21.Foshan Shunde Institute for Drug Control,Foshan Guangdong 528300,China;2.Key Laboratory of Drug Metabolism Research and Evaluation,SDA,Guangzhou Guangdong 510515,
4、China.Abstract:Objective To analyze the quality of cefixime granules in the market,and to provide reference for improving the uniformity of product quality and standard testing methods.Methods A total of 28 batches of cefixime granules from 7 manufacturers were tested by legal test method,and the te
5、st results were analyzed statistically.The dissolution curve was determined to find out the difference of dissolution behavior between the imitation sample and the original drug.The product polymers and related substances were measured,and the changes of polymers and specific impurities under differ
6、ent temperature and humidity storage conditions were investigated.Results All 28 batches of samples passed the inspection according to the statutory standards.However,there were inconsistencies between the inspection standards,storage conditions,whether sugar was present,and the product labeling.Sig
7、nificant differences were observed in three areas:moisture content,in vitro dissolution,and polymer.Only 1 of the 7 production enterprises controlled the polymer,3 of the 6 production enterprises did not control the polymer,the product polymer test results were high,close to or equal to the standard
8、 limit,the dissolution curve of the A production enterprise was significantly different from that of other enterprises,and the average water content of the D production enterprise was much higher than that of other enterprises.High humidity conditions lead to increased levels of polymers and specifi
9、c impurities.Conclusion The overall quality of cefixime granules is qualified,but it is still necessary to further improve the unified standard and strengthen the quality control.Key words:Cefixime granules;Polymer;Dissolution curve;Related substances;Risk assessment作者简介：卢蓉娜，本科，主管药师。研究方向：抗生素的质量分析与研究
10、。E-mail:头孢克肟是第三代口服头孢菌素，由日本藤泽药品工业株式会社于 1987 年研发成功并申报上市销售，1994 年由广州白云山制药总厂与日本藤泽药品工业株式会社合作开发，在中国独家生产并在中国成功上市了头孢克肟胶囊和颗粒剂（商品名为世福素），规格主要为 50mg（以头孢克肟计）。临床上用于敏感菌引起的呼吸道感染、胆道感染及尿路感染等。由于该药物的临床疗效显著，其在临床上得到广泛应用，临床小儿用药多以颗粒剂型为主1-2。为了更好地控制本产品质量，保证产品的疗效，本研究通过对市售的 7 家生产企业共 28 批头孢克肟颗粒进行全面的质量分析，发现检验标准28药品评价 Drug Evalua
11、tion 2024,21（1）与项目不统一，进而开展体外溶出度曲线、聚合物、有关物质项目的探索性研究，为完善统一标准提供参考。1 仪器与试药1.1 仪器BT125D 电子天平（赛多利斯公司）、BSA224S-CW 电子天平（赛多利斯公司）、1260 高效液相色谱仪（安捷伦科技有限公司）、LHS-100CL 恒温恒湿箱（上海一恒科技有限公司）、RC-806 自动溶出仪（天大天发科技有限公司）、去离子水发生器(Milli-Q 公司)、SartouriusPB-10pH 计（赛多利斯公司）。1.2 试药市售 7 家生产企业共 28 批次头孢克肟颗粒（规格为50mg/袋，以头孢克肟计），头孢克肟对照品
12、（中国食品药品检定研究院，批号：130503-202007，纯度 88.9%），头孢克肟聚合物系统适用性对照品（广州牌牌生物科技有限公司，纯度 100%）试剂：磷酸氢二钾、氢氧化钠、磷酸为分析纯；甲醇、乙腈、四正丁基氢氧化铵为色谱纯。2 方法与结果2.1 样品概况截至 2023 年 6 月，国家药品监督管理局网站（）药品数据库显示，头孢克肟颗粒共有 9 个生产企业 13 个药品批准文号，有 50mg和 100g 两个制剂规格，市售多为 50mg 规格。本研究收集的 28 批样品均为 50mg 规格，涵盖了 7个生产企业。其中，A 企业 2 批，B 企业 1 批，C企业 4 批，D 企业 10
13、批，E 企业 5 批，F 企业 2 批，G 企业 4 批），分别来自药品零售药店、连锁药店、批发企业和医疗机构。2.2 方法28 批样品的法定检验标准包括中国药典2015 年版二部3和中国药典2020 年版二部4、国家药品监督管理局标准 YBH058220205共 3 个检验标准。其中，依据中国药典检验的批数占86%；依据国家药品监督管理局标准 YBH05822020检验的仅 C 生产企业一家，批数占 14%。中国药典2015 年版和 2020 年版二部标准基本一致，国家药品监督管理局标准YBH05822020与 中国药典标准相比较存在较大差异。2.3 依法定标准检验结果与分析28 批头孢克肟
14、颗粒依法定检验标准检验，结果均符合规定，合格率 100%。针对检查过程中存在显著差异的结果分列如下。2.3.1 酸度 标准规定 pH 值应为 2.54.5。检测结果显示，A 生产企业的 2 批样品 pH 值均为 4.5，且较难溶解；其余生产企业的样品 pH 值为 3.03.9。中国药典2015 年版及 2020 年版二部中规定头孢克肟原料药 pH 值为 2.64.1，提示 A 生产企业的生产工艺与其他企业存在较大差异，在辅料的选择上应加强质量控制。2.3.2 水分 依费休氏法（容量滴定法）检查水分，标准规定含水分不得过 2.0%。28 批样品的水分测定结果如图 1 所示，B、C、D 生产企业的
15、产品水分控制较好，均控制在 1.0%以下，而 A 和 D 两家生产企业的产品水分含量较高，A 生产企业的水分含量为 1.3%1.4%，D 生产企业的产品水分含量主要集中在 1.6%1.8%，远高于其他生产企业，采用烘干法检查干燥失重，数据与上述数据基本一致，表明不同生产企业在产品水分控制方面存在较大差异，根据颗粒剂容易吸潮的特性，在湿度高的环境下，极有可能出现水分超标的情况。0.40.6)0.60.8)0.81.0)1.01.2)1.21.3)1.41.6)1.61.8水分含量/%批数/批图1 水分测量结果2.3.3 有关物质 中国药典和国家药品监督管理局标准 YBH05822020 均采用
16、HPLC 法测定杂质含量。中国药典通过主成分自身对照法计算单个杂质和总杂质含量。国家药品监督管理局标准YBH05822020 除了控制单个杂质和总杂质外，还需控制具体的 11 种特定杂质，按外标法计算杂质含量，在杂质控制方面更加严苛。依中国药典检验有关物质结果如图 2，生产企业 D 和 F 不同批次之间的杂质控制存在较大差异，D 生产企业的最大单个杂质的含量为 0.20%0.87%，杂质总量为 1.0%2.6%；F 生产企业的最大单个杂质含量为0.28%0.82%，杂质总量为 1.37%1.77%。标准规定最大单个杂质不得过 1.0%，同一生产企业不同批次产品的杂质含量存在较大差异。29药品评
17、价 Drug Evaluation 2024,21（1）图2 单个杂质含量测定结果2.3.4 溶出度 中国药典和国家药品监督管理局标准 YBH05822020 的溶出度方法一致，标准规定限度为标示量的 80%。28 批样品的溶出度均符合规定，除 A 生产企业外，其余生产企业的平均溶出度约为 99%；A 生产企业 2 批次样品的平均溶出度分别为 88%和 97%，不同批次间溶出度存在较大差异，提示 A 生产企业存在质量不稳定的现象。2.3.5 含量均匀度依据国家药品监督管理局标准YBH05822020 检查含量均匀度，7 家生产企业中只有 C 生产企业依据该标准检查含量均匀度，每批次分别取 10
18、 袋样品检验，计算每袋的相对含量，检验结果均符合标准规定。但 4 批次样品中，有 2批次样品的每袋相对含量存在较大差异，分别为90.8%98.8%和 93.1%100.7%，同批次每袋相对含量差值约 8%，提示可能存在生产工艺不稳定，原辅料混合不均匀的情况。3 现行标准评价本次抽验的 7 家生产企业，仅有一家生产企业在产品说明书中明确标明是无糖颗粒，而其他 6 家生产企业实际配方中均有含糖成分，但并未在包装或说明书上标明，不利于特殊人群（例如糖尿病患者）用药，增加不良反应风险。另外，包装说明书上标明的储存条件不统一，室温和遮光、密闭、在阴凉处（不超过 20）两种保存条件差距较大，容易给患者造成
19、不必要的困扰。国家药品监督管理局标准 YBH05822020 与中国药典相比较，检验项目增加了聚合物、含量均匀度两项，对有关物质的控制，除了单个杂质和总杂质外，还规定了另外 11 种特定杂质的检查。外标法计算杂质含量，对杂质的控制更加精准化，对于产品质量的控制更为全面。由于法定检验标准不统一，无法对市售的头孢克肟颗粒质量进行全面客观的评价。4 探索性研究为了更为全面客观地评价市售头孢克肟颗粒的质量和现行法定检验标准设计的合理性，结合颗粒剂容易吸潮，抗感染药物不良反应发生率高等特性，本研究进一步开展溶出曲线、聚合物、特定杂质测定，以及温湿度影响因素探索性试验。4.1 溶出曲线分析4.1.1 方法
20、的选择根据普通口服固体制剂溶出度试验技术指导原则 普通口服固体制剂溶出曲线测定与比较指导原则的规定，应至少选择 3种 pH 值的溶出介质进行溶出曲线考察6-7。头孢克肟为低溶出度低渗性药物，考虑到头孢克肟的溶解度呈现 pH 依赖性，且法定检验标准中均采用pH7.2 磷酸盐溶液作为溶出介质，最终选择 pH6.8和 pH7.2 两种磷酸盐 900mL 作为溶出介质8-9。转速为 50r/min，经 10、15、20、30、45、60min时，取溶液10mL并即时补充相同体积的溶出介质，照紫外-可见分光光度法测定吸光度，波长选择288nm，按外标法计算每片的溶出量，以原研制剂专利转让企业广州白云山（
21、C 生产企业）生产的头孢克肟颗粒作为参比制剂。4.1.2 结果分析 5 家生产企业的样品照上述方法试验，绘制溶出曲线，各生产企业溶出曲线与参比制剂比较见图 3、图 4。由试验结果可知，以 pH7.2的磷酸盐为溶出介质时，试验开始 10min 以后，大部分企业的样品溶出度已达到 80%，而 A 生产企业其中一个批次样品的溶出度仅 54%，溶出时间接近30min 时，溶出度才满足 80%的要求，溶出速率明显低于其他生产企业。这提示 A 生产企业的生产工艺与其他企业存在显著性差异，且存在生产工艺不稳定的现象。以 pH6.8 的磷酸盐为溶出介质时，各生产企业的溶出速率普遍慢于以 pH7.2 的磷酸盐为
22、溶出介质时的溶出速率，溶出介质的 pH 值从 7.2下降到6.8，仅下降0.4pH值，溶出度即下降2%10%不等，A 生产企业在 pH6.8 的磷酸盐溶出介质中经过 30min 后的溶出度仍低于限值 80%，提示头孢克肟的溶出度对 pH 值有较强的依赖性，在溶出度检查过程中要特别关注溶出介质的 pH 值。根据溶出曲线相似性判定标准，当受试样品和参比样品在 15分钟的平均溶出量均不低于 85%或两条溶出曲线相似因子（f2）数值不小于 50 时，可认为溶出曲线相似。在参与比较的 6 家仿制药企业中，大部分企业的溶出度与参比制剂相似，个别企业与参比制剂存在较大差异，质量有待进一步提升。30药品评价
23、Drug Evaluation 2024,21（1）图3 磷酸盐溶液（pH7.2）为溶出介质的溶出曲线图4 磷酸盐溶液（pH 6.8）为溶出介质的溶出曲线4.2 聚合物分析研究10表明，头孢类抗菌药物所产生的速发型过敏反应与药物的聚合物含量有关，而非药物本身。头孢克肟颗粒临床使用方式为冲服，且用药人群中多为儿童，所以关注其过敏反应相关的安全性风险非常重要11-12。但目前市售的头孢克肟颗粒仅C 企业按照国家药品监督管理局标准 YBH05822020检查聚合物，大部分生产企业按照中国药典标准检验均未对聚合物进行控制，为了考察其他企业的聚合物控制情况，统一参考国家药品监督管理局YBH0582202
24、0 标准检查聚合物。4.2.1 方法 采用高效液相色谱法、梯度洗脱的方法，色谱柱为 HypersilGOLD 色谱柱（250mm4.6mm，3m），以头孢克肟聚合物系统适用性对照品色谱图作为对照图谱，定位聚合物杂质峰。标准规定，头孢克肟聚合物杂质 B 及头孢克肟二聚体 D 峰面积均不得大于对照溶液主峰面积的 2 倍（0.20%）。4.2.2 结果对上述 7 家生产企业共 28 批样品进行聚合物检查，检验结果均符合规定。但 D 生产企业 10 批样品中有 1 批样品的聚合物杂质 B 含量为 0.19%，二聚体 D 含量为 0.13%，其余批次聚合物杂质 B 含量为 0.04%0.07%，二聚体
25、D 含量为0.02%0.04%，批次之间存在较大差异；E 生产企业 5 批样品中，有 1 批样品的聚合物杂质 B 含量为 0.12%，二聚体 D 含量为 0.13%，其余批次聚合物杂质 B 含量为 0.01%0.05%，二聚体 D 含量为0.04%0.05%，批次之间存在较大差异；F 生产企业2 批样品中聚合物杂质 B 含量为 0.16%、0.20%，二聚体 D 含量为 0.12%、0.14%，聚合物杂质 B 的含量已达标准限值；有进行聚合物控制的 C 生产企业聚合物杂质 B 含量为 0.05%0.08%，二聚体 D 含量为 0.02%0.06%。上述结果提示，未进行聚合物监控的生产企业，不同
26、批次间聚合物含量存在显著差异，个别批号已临近或等于限值。5 影响因素试验因存在储存条件的差异，为了进一步考察储存条件对制剂产生的影响，取样品适量置于平皿内，摊成 5mm 厚的薄层，分别置于高温（50）和高湿（相对湿度 75%）的恒温恒湿箱中存放，在第45 天取样，检测聚合物、有关物质及有效成分含量，结果如表 1、表 2 所示。在高温条件下，除有关物质总杂质略有增加外，聚合物和含量无明显变化。但在高湿条件下，出现了聚合物、特定杂质 A1 显著增加、含量明显下降的情况。A 生产企业两种聚合物杂质含量均由 0.05%上升到 0.50%；D 生产企业两种聚合物杂质含量分别为 0.22%和 0.21%，
27、超过规定限值 0.20%；C 生产企业的杂质 A 由 0.007%上升至 0.16%，总杂由 0.054%上升至 0.383%；A生产企业的杂质 A 含量由 0.017%上升到 0.30%。有两家生产企业（C 和 D）有效成分含量下降高达8%，已至标准规定限值以下。表1 聚合物考察结果%企业名称首次检查相对湿度 75%，45d温度 50，45d聚合物杂质 B二聚体D聚合物杂质 B二聚体D聚合物杂质 B二聚体DA0.050.050.500.500.060.08B0.00030.110.050.200.0080.12C0.050.020.060.070.060.03D0.190.130.220.2
28、10.190.14E0.010.040.040.100.030.03G0.050.060.080.090.050.06表2 含量考察结果%企业名称首次检查相对湿度 75%，45d温度 50，45dA98.790.499.7B93.990.093.0C95.886.396.0D95.086.793.6E98.294.997.9F98.595.199.331药品评价 Drug Evaluation 2024,21（1）6 探索性研究结果分析探索性试验中发现，头孢克肟颗粒对湿度较为敏感，在高湿条件下，出现聚合物和有关物质增加、含量下降的情况，影响药品质量的稳定性和疗效。此外，该药物对光线不稳定，强光
29、照射会导致含量明显下降、杂质显著增加13。建议统一储存条件，控制温湿度，避免强光照射，保证药品质量的稳定性，提高患者用药安全性。7 家生产企业中有 2 家的产品聚合物检查结果邻近限值，在生产、储存条件不当的情况下，极有可能出现聚合物超限的情况，且同一生产企业不同批次之间聚合物含量存在较大差距，提示可能存在生产工艺不稳定的情况。含量均匀度检查中，同一批次产品每袋的相对含量最大差值达 8%，提示在生产过程中存在原辅料混合不均匀的情况，进行含量均匀度检查，能更有效地监测生产工艺的稳定性。有关物质检查中，仅一家生产企业规定了详细的杂质谱，通过外标法计算 11种特定杂质含量，相比采用主成分自身对照法定量
30、单个杂质和总杂质，增加了测定结果的准确度14-15。A 生产企业的溶出曲线与其他生产企业存在显著差异，且不同批次间的溶出度曲线亦存在较大差异，平均溶出度差值达 10%，提示生产工艺在不同企业之间存在较大差异，同企业的生产工艺存在不稳定现象，企业有待进一步优化生产工艺。7 结论2022 年国家药品不良反应监测年度报告显示，头孢菌素类药物在抗感染药不良反应/事件报告数量上位列第一，且口服制剂仅低于注射剂位列第二。头孢克肟颗粒作为广谱有效的抗感染类头孢菌素药物，临床多用于儿童抗感染治疗，儿童正处于迅速生长发育的阶段，生理特点独特，对药物具有特殊的反应性和敏感性，药效学、药动学与成人相比有很大的差异，
31、儿童用药的安全性与成人相比具有更多的复杂性。本研究通过对不同生产企业头孢克肟颗粒质量研究分析，发现存在一定的质量风险，建议对现行检验标准进行完善统一，在法定检验标准中加强聚合物、含量均匀度的监测，优化有关物质的检验方法，以提高质量标准对药品质量的区分力，促进企业优化制剂工艺，确保药品的安全性。参考文献1 张迪平.头孢克肟口服固体制剂质量探讨 J.医学食疗与健康,2020,18(21):229-230.2 王干迷,王健松,赵桂荣,等.头孢克肟颗粒在中国健康人体内的生物等效性研究 J.中国临床药理学杂志,2021,37(21):2941-2945.3 国家药典委员会.中华人民共和国药典:2015
32、年版二部 S.北京:中国医药科技出版社,2015:258.4 国家药典委员会.中华人民共和国药典:2020 年版二部 S.北京:中国医药科技出版社,2020:313.5 国家药品监督管理局.国家药品监督管理局标准 YBH05822020：头孢克肟颗粒 S.北京:国家药品监督管理局,2020.6 国家食品药品监督管理总局.关于发布普通口服固体制剂溶出度试验技术指导原则和化学药物(原料药和制剂)稳定性研究技术指导原则的通告 EB/OL.(2015-02-05)2022-12-02.https:/ 国家食品药品监督管理总局.总局关于发布普通口服固体制剂参比制剂选择和确定等 3 个技术指导原则的通告(
33、2016 年第 61号)EB/OL.(2016-03-18)2022-12-02.https:/ 陈伟鸿,宿央央,程怡,等.f2 因子法评价头孢克肟颗粒溶出曲线相似性 J.中国抗生素杂志,2020,45(8):775-779.9 胡丽敏,杨丽.头孢克肟颗粒溶出度曲线方法学验证 J.中国抗生素杂志,2017,42(5):373-376.10 胡昌勤.-内酰胺类抗生素聚合物杂质控制策略的形成与发展 J.中国新药杂志,2020,19(11):1231-1244.11 李进,姚尚辰,尹利辉,等.头孢克肟原料及制剂的聚合物杂质分析 J.药学学报,2020,55(10):2442-2448.12 黄艳,黄燕婷,周向荣,等.高效分子排阻色谱法测定头孢克肟颗粒中聚合物的含量J.中国现代应用药学,2020,37(3):326-329.13 陈伟鸿.头孢克肟混悬颗粒的药学研究 D.广州:广州中医药大学,2011.14 吴建伟,余俊先.头孢克肟颗粒杂质检测的均匀设计及优化 J.中国医院用药评价与分析,2020,20(10):1216-1220.15 苏燕琼,蔡国伟,高琳.加校正因子的主成分自身对照测定头孢克肟颗粒的有关物质 J.中国抗生素杂志,2020,45(8):775-780.收稿日期：2023-07-05 定稿日期：2024-01-06
