1、I C S6 7.0 5 0C C SX0 4中华人民共和国出入境检验检疫行业标准S N/T5 4 4 52 0 2 2 出口植物源食品中特丁硫磷及其氧类似物(亚砜、砜)的测定液相色谱-质谱/质谱法D e t e r m i n a t i o n o f T e r b u f o s,T e r b u f o s-s u l f o n e a n d T e r b u f o s-s u l f o x i d e r e s i d u e s i n f o o d s t u f f s o f p l a n t o r i g i n f o r e x p o r tL
2、C-M S/M S m e t h o d2 0 2 2-0 3-1 4发布2 0 2 2-1 0-0 1实施中华人民共和国海关总署发 布以正式出版文本为准以正式出版文本为准前 言本文件按照G B/T 1.12 0 2 0 标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则 的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。本文件起草单位:中华人民共和国厦门海关技术中心、中华人民共和国漳州海关综合技术服务中心、厦门标普标准化服务有限公司。本文件主要起草人:陈泳、王瑞龙、吴俊杰、丁琳、徐敦明、何王福、胡秋婷、陈智
3、勇。S N/T5 4 4 52 0 2 2以正式出版文本为准以正式出版文本为准出口植物源食品中特丁硫磷及其氧类似物(亚砜、砜)的测定液相色谱-质谱/质谱法1 范围本文件规定了特丁硫磷及其氧类似物(亚砜、砜)残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法。本文件适用于谷物、油料、蔬菜、水果、糖料、茶叶、香辛料等植物源食品中特丁硫磷及其氧类似物(亚砜、砜)残留量的测定和确证。2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。G B/T 6 6 8 2 分析实
4、验室用水规格和试验方法3 术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4 方法提要采用乙腈提取试样中残留的特丁硫磷及其氧类似物(亚砜、砜),提取液经分散固相萃取净化,以C1 8柱分离待测物,采用电喷雾离子化,正离子扫描和多反应监测模式(MRM)检测,外标法定量。5 试剂和材料除特殊说明外,所用试剂均为分析纯,水为符合G B/T 6 6 8 2规定的一级水。5.1 乙腈(CH3C N):色谱级。5.2 甲醇(CH3OH):色谱级。5.3 甲酸(HC OOH):色谱级。5.4 乙酸(CH3C OOH):色谱级。5.5 乙酸钠(CH3C OON a):色谱级。5.6 乙酸铵(CH3C OONH4):色
5、谱级。5.7 无水硫酸镁(M g S O4)。5.8 氯化钠(N a C l)。5.9 柠檬酸钠(N a3C6H5O7)。5.1 0 柠檬酸氢二钠(N a2C6H6O7)。1S N/T5 4 4 52 0 2 2以正式出版文本为准5.1 1 乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶(P S A):4 0 m6 0 m。5.1 2 十八烷基硅烷键合硅胶(C1 8):4 0 m6 0 m。5.1 3 石墨化碳黑(G C B):4 0 m1 2 0 m。5.1 4 乙酸铵水溶液(1 m o l/L):称取7.7 g乙酸铵(5.6)于烧杯中,加水溶解,再转移至1 0 0 m L容量瓶,加水定容,混匀备用。5.1 5
6、 0.1%甲酸-0.1%乙酸铵水溶液:准确吸取1 m L甲酸(5.3)和1 m L乙酸铵水溶液(5.1 4)于1 0 0 0 m L容量瓶中,加水定容,混匀备用。5.1 6 0.1%甲酸-甲醇溶液:准确吸取1 m L甲酸(5.3)于1 0 0 0 m L容量瓶中,加甲醇(5.2)定容,混匀备用。5.1 7 甲醇-水溶液(1+1,体积比):量取5 0 0 m L甲醇(5.2)加入5 0 0 m L水中,混匀。5.1 8 乙腈-乙酸溶液(9 9+1,体积比):量取1 0 m L乙酸(5.4)加入9 9 0 m L乙腈中(5.1),混匀。5.1 9 特丁硫磷标准品(C A S号1 3 0 7 1-7
7、 9-9):纯度大于等于9 8%,参见附录A。5.2 0 特丁硫磷砜标准品(C A S号5 6 0 7 0-1 6-7):纯度大于等于9 8%,参见附录A。5.2 1 特丁硫磷亚砜标准品(C A S号1 0 5 4 8-1 0-4):纯度大于等于9 8%,参见附录A。5.2 2 标准储备溶液:准确称取适量上述标准品,分别用乙腈(5.1)配制成浓度为1 0 0 g/m L的标准储备液,-1 8 避光保存,有效期为1年。5.2 3 混合标准储备液:分别吸取适量的上述标准储备液(5.2 2),用乙腈(5.1)配制成1 g/m L的混和标准储备液,4 以下避光保存,有效期为3个月。5.2 4 微孔滤膜
8、:0.2 2 m,有机相型。6 仪器与设备6.1 液相色谱串联四极杆质谱仪:配电喷雾正离子源(E S I+)。6.2 分析天平:感量0.1 m g和0.0 1 g。6.3 粉碎机。6.4 涡旋混合器。6.5 均质器。6.6 离心机:可达到4 2 0 0 r/m i n。6.7 氮吹浓缩仪。6.8 离心管:5 0 m L和1 5 m L塑料离心管。7 样品制备与保存在制样过程中,应防止样品污染或发生残留物含量的变化:7.1 水果和蔬菜等含水量高的样品取代表性样品部分约 5 0 0 g,将其可食部分先切碎,经粉碎机充分粉碎均匀,试样均分为两份,装入洁净容器,密封,并标明标记,于-1 8 以下冷冻存
9、放。7.2 谷物、茶叶和香辛料等含水量低的样品取代表性样品部分约 5 0 0 g,用粉碎机充分粉碎,混匀。试样均分为两份,装入洁净容器,密封,并标明标记,常温下保存。2S N/T5 4 4 52 0 2 2以正式出版文本为准8 分析步骤8.1 前处理8.1.1 水果、蔬菜、谷物和糖料称取5 g(精确至0.0 1 g)均匀试样于5 0 m L离心管中,加入1 0 m L乙腈,然后加入4 g无水硫酸镁、1 g氯化钠、1 g柠檬酸钠以及0.5 g柠檬酸氢二钠,盖上离心管盖,剧烈振荡1 m i n后于4 2 0 0 r/m i n离心5 m i n。吸取6 m L上清液加到内含9 0 0 m g 无水
10、硫酸镁、1 5 0 m g P S A及1 5 0 m g C 1 8的1 5 m L离心管中,涡旋混匀1 m i n,4 2 0 0 r/m i n离心5 m i n,准确吸取2 m L 上清液于1 0 m L试管中,室温下(3 0)氮吹至近干,加入1 m L甲醇-水溶液(5.1 7)复溶,过微孔滤膜,用于测定。8.1.2 油料称取5 g(精确至0.0 1 g)均匀试样于5 0 m L离心管中,加1 0 m L 水涡旋混匀,静置3 0 m i n。加入1 0 m L乙腈、4 g无水硫酸镁、1 g氯化钠,盖上离心管盖,剧烈振荡1 m i n后于4 2 0 0 r/m i n离心5 m i n。
11、吸取6 m L上清液加到内含9 0 0 m g 无水硫酸镁、1 5 0 m g P S A及1 5 0 m g C 1 8的1 5 m L离心管中,涡旋混匀1 m i n,4 2 0 0 r/m i n离心5 m i n,准确吸取2 m L 上清液于1 0 m L试管中,室温下(3 0)氮吹至近干,加入1 m L 甲醇-水溶液(5.1 7)复溶,过微孔滤膜,用于测定。8.1.3 茶叶和香辛料称取2 g(精确至0.0 1 g)均匀试样于5 0 m L离心管中,加入1 0 m L乙腈-乙酸溶液(5.1 8)、6 g无水硫酸镁、1.5 g醋酸钠,盖上离心管盖,剧烈振荡1 m i n后于4 2 0 0
12、 r/m i n离心5 m i n。吸取8 m L上清液加到内含1 2 0 0 m g 无水硫酸镁、4 0 0 m g P S A、4 0 0 m g C1 8及2 0 0 m g G C B的1 5 m L离心管中,涡旋混匀1 m i n,4 2 0 0 r/m i n离心5 m i n,准确吸取2 m L 上清液于1 0 m L试管中,室温下(3 0)氮吹至近干,加入1 m L甲醇-水溶液(5.1 7)复溶,过微孔滤膜,用于测定。8.2 测定8.2.1 液相色谱条件8.2.1.1 色谱柱:C O R T E C S C1 8 柱(1 0 0 mm2.1 mm,2.7 m,9 0 A),或相
13、当者。8.2.1.2 柱温:3 5 。8.2.1.3 流速:3 0 0 L/m i n。8.2.1.4 进样量:1 0.0 L。8.2.1.5 流动相及梯度洗脱条件见表1。表1 流动相、流速及梯度洗脱条件时间/m i n流速/(L/m i n)0.1%甲酸-0.1%乙酸铵水溶液0.1%甲酸-甲醇溶液0.0 03 0 05 0.05 0.02.0 03 0 05 0.05 0.05.0 03 0 02 0.08 0.07.0 03 0 01 0.09 0.09.0 03 0 05.09 5.03S N/T5 4 4 52 0 2 2以正式出版文本为准表1 流动相、流速及梯度洗脱条件(续)时间/m
14、 i n流速/(L/m i n)0.1%甲酸-0.1%乙酸铵水溶液0.1%甲酸-甲醇溶液1 1.0 03 0 05.09 5.01 2.0 03 0 05 0.05 0.01 5.0 03 0 05 0.05 0.08.2.2 质谱条件8.2.2.1 离子化模式:电喷雾离子源。8.2.2.2 扫描方式:正离子扫描。8.2.2.3 检测方式:多反应监测(MRM)。8.2.2.4 其他参考质谱条件参见附录B。8.2.3 液相色谱-质谱/质谱仪测定8.2.3.1 定性测定在8.2.1色谱条件下,特丁硫磷、特丁硫磷砜和特丁硫磷亚砜在液相色谱串联质谱仪上的保留时间和色谱图参见附录C。按照上述测定样品和标
15、准溶液,样品中待测物质的保留时间与基质标准溶液的保留时间偏差在2.5%之内。所监测的定性离子均出现(信噪比S/N3),定性离子对的相对丰度与浓度相当的基质标准溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较,相对丰度偏差不超过表2规定的范围,则可判定为样品中存在相应的待测物。表2 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度/%5 02 05 01 02 01 0允许的相对偏差/%2 02 53 05 08.2.3.2 定量测定准确吸取一定量的混合标准溶液,逐级用甲醇-水溶液(5.1 7)稀释成质量浓度为0.0 0 1 m g/L、0.0 0 5 m g/L、0.0 1 0 m g/L、0.0 2
16、0 m g/L和0.0 5 0 m g/L的标准工作溶液,准确吸取按8.1方法处理的空白基质溶液2 m L,用氮气吹至近干,分别加入1 m L上述标准工作溶液复溶,过微孔滤膜配制成系列基质混合标准工作溶液,供液相色谱仪串联质谱仪测定。标准工作溶液和样液中被测物的响应值应在仪器的线性范围内,如果含量超过标准曲线范围,应重新稀释到合适浓度后分析。利用系列基质混合标准工作溶液对按8.1方法处理的样品溶液进行测定。8.2.4 空白试验除不加试样处,均按上述测定条件和步骤进行。9 结果计算与表述9.1 按式(1)计算试样中特丁硫磷及其氧类似物(亚砜、砜)的残留量:4S N/T5 4 4 52 0 2 2以正式出版文本为准X=(c-c0)V1 0 0 0m1 0 0 0(1)式中:X 试样中分析目标物残留量,单位为毫克每千克(m g/k g);c 从标准工作曲线所得的分析目标物浓度,单位为微克每毫升(g/m L);c0 空白试验所得分析目标物浓度,单位为微克每毫升(g/m L);V 样液最终定容体积,单位为毫升(m L);m 最终样液所代表的试样量,单位为克(g)。注1:保留两位有效数字。9.2
