1、I C S6 7.0 5 0C C SC5 3中华人民共和国出入境检验检疫行业标准S N/T2 0 7 32 0 2 2代替 S N/T 2 0 7 32 0 0 8 出口植物源食品中7种烟碱类农药残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法D e t e r m i n a t i o n o f s e v e n n e o n i c o t i n o i d p e s t i c i d e s r e s i d u e s i n f o o d o f p l a n t o r i g i n f o r e x p o r tL C-M S/M S m e t h o d2 0
2、 2 2-0 3-1 4发布2 0 2 2-1 0-0 1实施中华人民共和国海关总署发 布以正式出版文本为准前言本文件按照本文件代替G B/T 1.12 0 2 0 给出的规则起草。S N/T2 0 7 32 0 0 8 进出口植物性产品中吡虫啉残留量的检测方法 液相色谱串联质谱法,与S N/T 2 0 7 32 0 0 8相比,主要技术变化如下:a)将文件名称改为“出口植物源食品中7种烟碱类农药残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法”,相应英文名称进行修改(见文件名称);b)将“本标准适用于毛豆、西兰花、萝卜、板栗、大米、辣椒和茶叶中吡虫啉残留量的检测”修改为“本文件适用于苹果、洋葱、萝卜、板
3、栗、橙子、结球甘蓝、大米、辣椒、毛豆和茶叶中呋虫胺、烯啶虫胺、噻虫嗪、噻虫胺、吡虫啉、啶虫脒和噻虫啉残留量的检测”(见第1章);c)增加“规范性引用文件”(见第2章)。请注意本文件的某些内容可能涉及专利,本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。本文件起草单位:浙江省检验检疫科学技术研究院。本文件主要起草人:谢文、侯建波、黄超群、钱艳、洪灯、李杰、祝泽龙。本文件所代替文件的历次版本发布情况为:S N/T 2 0 7 32 0 0 8。S N/T2 0 7 32 0 2 2以正式出版文本为准以正式出版文本为准出口植物源食品中7种烟碱类农药残留量的测定 液相色
4、谱-质谱/质谱法1 范围本文件规定了植物源性食品中多种烟碱类农药残留测定的制样和液相色谱-质谱/质谱测定方法。本文件适用于苹果、洋葱、萝卜、板栗、橙子、结球甘蓝、大米、辣椒、毛豆和茶叶中呋虫胺、烯啶虫胺、噻虫嗪、噻虫胺、吡虫啉、啶虫脒和噻虫啉残留量的检测。2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。G B/T 6 6 8 2 分析实验室用水规格和试验方法。3 术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4 方法提要样品经乙腈提取,通过N-乙
5、烯吡咯烷酮和亲脂性的二乙烯基苯聚合型或T P T固相萃取柱对提取液进行净化,采用液相色谱-质谱/质谱仪检测,内标法定量。5 试剂和材料除非另有说明,所用试剂均为分析级,水为符合G B/T 6 6 8 2规定的一级水。5.1 乙腈:色谱纯。5.2 甲酸:色谱纯。5.3 甲苯:色谱纯。5.4 甲醇:色谱纯。5.5 无水硫酸钠:6 5 0 灼烧4 h,在干燥器内冷却至室温,贮于密封瓶中备用。5.6 0.1 5%甲酸溶液:量取1.5 m L甲酸(5.2)和9 0 0 m L水,混匀,定容至1 0 0 0 m L。5.7 呋虫胺、烯啶虫胺、噻虫嗪、噻虫胺、吡虫啉、啶虫脒、噻虫啉标准品:纯度大于等于9 9
6、.0%,见附录A表A.1。5.8 呋虫胺-D3、噻虫嗪-D3、噻虫胺-D3、吡虫啉-D4、啶虫脒-D3、噻虫啉-D4标准品:纯度大于等于9 7.0%。1S N/T2 0 7 32 0 2 2以正式出版文本为准5.9 标准储备溶液:分别准确称取适量标准品(5.7)于容量瓶,用乙腈(5.1)配制成1.0 m g/m L的标准储备液,于0 4 冰箱内储存,有效期6个月。5.1 0 同位素内标标准储备溶液:准确称取适量标准品(5.8)于容量瓶,用乙腈(5.1)配制成1.0 m g/m L的标准储备液,于0 4 冰箱内避光储存,有效期6个月。5.1 1 混合标准中间液:取上述标准储备液适量(5.9),用
7、乙腈(5.1)配制成1 0 g/m L的混合标准溶液,于0 4 冰箱内避光储存,有效期3个月。5.1 2 同位素内标混合标准中间液:取上述标准储备液适量(5.1 0),用乙腈(5.1)配制成1 0 g/m L的混合标准溶液,于0 4 冰箱内避光储存,有效期3个月。5.1 3 标准工作溶液:临用前用乙腈-0.1 5%甲酸(3+7,体积比)将混合标准中间液(5.1 1)和同位素内标混合标准中间液(5.1 2)稀释至适当浓度作为混合标准工作液,于0 4 冰箱内避光储存。临用前采用空白基质溶液加标或溶剂配制线性工作曲线。5.1 4 无水硫酸钠柱:8 0 mm4 0 mm(i.d)筒形漏斗,底部垫5 m
8、m脱脂棉,再装4 0 mm无水硫酸钠(5.5)。5.1 5 N-乙烯吡咯烷酮和亲脂性的二乙烯基苯聚合型固相萃取柱:5 0 0 m g,6 m L或相当者,使用前依次用5 m L甲醇和5 m L水预洗。5.1 6 T P T固相萃取柱1):1 g,6 m L或相当者,使用5 m L乙腈-甲苯(3+1,体积比)预洗。5.1 7 微孔滤膜:0.2 2 m,有机相。6 仪器和设备6.1 液相色谱-质谱/质谱仪:配有电喷雾离子源(E S I)。6.2 天平:感量为0.0 0 0 1 g和0.0 1 g。6.3 固相萃取装置。6.4 离心机:大于等于3 0 0 0 r/m i n。6.5 旋涡混合器。6.
9、6 减压浓缩仪。6.7 具塞离心管:聚丙烯,1 5 m L和5 0 m L。7 试样制备与保存7.1 总体要求在制样的操作过程中,应防止样品受到污染或发生药物残留含量的变化。7.2 水果、蔬菜、坚果取2 0 0 g代表性样品,取可食部分经捣碎机充分捣碎均匀,均分成两份,分别装入洁净容器内,密封,并标明标记。7.3 大米、茶叶将所取全部样品缩分成1 0 0 g,经粉碎机粉碎,通过孔径为0.8 5 mm的筛(2 0目),混匀,装入洁净容器内,密封,并标明标记。一份作为试验样,另一份常温下保存。1)非商业性声明:5.1 6所列T P T固相萃取柱为C l e a n e r t T P T(茶叶专用
10、固相萃取柱),并不涉及商业目的,鼓励标准使用者尝试不同厂家或型号的固相萃取柱。2S N/T2 0 7 32 0 2 2以正式出版文本为准8 分析步骤8.1 提取8.1.1 苹果、洋葱、萝卜、板栗、橙子、结球甘蓝、大米、辣椒、毛豆称取5 g试样(精确到0.0 1 g)置于5 0 m L具塞离心管中(大米加3 m L水浸泡0.5 h),加入2 0 m L乙腈(5.1),2 0 0 0 r/m i n,涡旋混合1 m i n,以3 0 0 0 r/m i n离心5 m i n,将上层乙腈提取液过无水硫酸钠柱(5.1 4),收集于容量瓶中,样品残渣再加入2 0 m L乙腈(5.1),重复上述操作,合并
11、乙腈提取溶液,加乙腈定容至5 0 m L容量瓶中,待净化。8.1.2 茶叶称取2 g试样(精确到0.0 1 g)置于5 0 m L具塞离心管中,加3 m L水浸泡0.5 h,加入2 0 m L乙腈(5.1),2 0 0 0 r/m i n,涡旋混合1 m i n,以3 0 0 0 r/m i n离心5 m i n,将上层乙腈提取液过无水硫酸钠柱(5.1 4),收集于容量瓶中,样品残渣再加入2 0 m L乙腈(5.1),重复上述操作,合并乙腈提取溶液,加乙腈定容至5 0 m L容量瓶中,待净化。8.2 净化8.2.1 苹果、洋葱、萝卜、板栗、橙子、结球甘蓝、大米、辣椒、毛豆将2.5 m L提取液
12、(8.1.1)浓缩至近干,加入5 m L水溶解并转移至N-乙烯吡咯烷酮和亲脂性的二乙烯基苯聚合型固相萃取柱中(5.1 5),控制流速1 m L/m i n2 m L/m i n,再用5 m L甲醇-水溶液(5+9 5,体积比)洗涤浓缩瓶,洗涤液过固相萃取柱(5.1 5),弃去流出液,抽干,用7 m L甲醇洗脱,收集洗脱液,洗脱液在4 0 以下水浴减压浓缩至近干,用1.0 m L乙腈-0.1 5%甲酸(3+7,体积比)定容,混匀,溶液过0.2 2 m滤膜(5.1 7),供液相色谱-质谱/质谱仪测定。8.2.2 茶叶将5.0 m L提取液(8.1.2)转移至T P T固相萃取柱中(5.1 6),控
13、制流速1 m L/m i n 2 m L/m i n,收集洗出液,加1 0 m L乙腈-甲苯溶液(3+1,体积比)洗脱,接收全部流出液,4 0 以下水浴减压浓缩至近干,用1.0 m L乙腈-0.1 5%甲酸(3+7,体积比)定容,混匀,溶液过0.2 2 m滤膜(5.1 7),供液相色谱-质谱/质谱仪测定。8.3 测定8.3.1 液相色谱参考条件8.3.1.1 液相色谱柱:C8色谱柱,1 5 0 mm 4.6 mm(i.d),5 m,或相当者。8.3.1.2 流动相:梯度洗脱程序见表1。8.3.1.3 流速:0.4 m L/m i n。8.3.1.4 进样量:2 0 L。3S N/T2 0 7
14、32 0 2 2以正式出版文本为准表1 流动相梯度洗脱程序时间/m i n0.1 5%甲酸溶液/%乙腈/%07 52 532 08 052 08 087 52 51 57 52 58.3.2 质谱/质谱参考条件8.3.2.1 离子源:电喷雾离子源。8.3.2.2 扫描方式:正离子扫描。8.3.2.3 检测方式:多反应监测(MRM)。8.3.2.4 雾化气、气帘气、辅助气、碰撞气均为高纯氮气;使用前应调节各参数使质谱灵敏度达到检测要求,参考条件及监测离子对(m/z)参见附录B表B.1。8.4 定性按照上述条件测定试样和标准工作溶液,如果试样中的质量色谱峰保留时间与标准工作溶液一致(变化范围在2.
15、5%之内);样品中目标化合物的定性子离子的相对丰度与浓度相当的标准溶液一致,相对丰度偏差不超过表2的规定,则可判断样品中存在待测化合物。表2 定性确证时相对离子丰度的最大容许偏差相对离子丰度(基峰)5 0%2 0%5 0%1 0%2 0%1 0%允许的相对偏差2 0%2 5%3 0%5 0%8.5 定量根据试样中被测物的含量情况,选取响应值适宜的标准工作液进行色谱分析,标准曲线工作液有5个浓度水平,应包括零点。混合标准工作液和待测液中化合物的响应值应在仪器检测的线性响应范围内。如果待测样液中化合物的响应值超过线性范围则应稀释后再进样分析。在上述色谱条件下烟碱类农药的参考保留时间和标准溶液的选择
16、性离子流图参见附录C图C.1。9 空白试验除不加试样外,均按第8章操作步骤进行。1 0 结果计算和表述用线性方程或按式(1)内标法计算试样中烟碱类农药的残留量,计算结果需扣除空白值:Xi=CiVm11 0 0 0(1)4S N/T2 0 7 32 0 2 2以正式出版文本为准式中:Xi 试样中分析物的残留量,单位为毫克每千克(m g/k g);Ci 从标准曲线上得到的药物残留量的溶液浓度,单位为纳克每毫升(n g/mL);V 样液最终定容体积,单位为毫升(mL);m 最终样液代表的试样质量,单位为克(g)。1 1 定量限、回收率1 1.1 定量限本标准茶叶方法定量限均为0.0 2 m g/k g,其他样品基质方法定量限均为0.0 1 m g/k g。1 1.2 回收率本方法添加水平及回收率数据参见附录D表D.1。5S N/T2 0 7 32 0 2 2以正式出版文本为准附 录 A(规范性)标准物质信息 标准物质的基本信息见表A.1。表A.1 标准物质的基本信息中文名称英文名称C A S编号分子式相对分子量呋虫胺D i n o t e f u r a n1 6 5 2 5 2-7 0-0
