1、新型溶栓药HTUPA的研究进展 孙英贤 中国医科大学附属第一医院 我国ST段抬高急性心肌梗死(STEMI)发病率高；经静脉溶栓治疗是治疗急性ST段抬高型心肌梗死的有效方法；理想的溶栓药物应该具备安全、有效、给药方便的特点，现有的溶栓药物不能满足；有研究显示，在2-3，4-6或7-12小时内接受溶栓治疗可分别降低病死率25%,18%和14%。溶栓治疗尤其是我国基层医院救治急性心肌梗死患者的必要手段。溶栓药的发展迅速，目前把溶栓药分为三代:第一代的溶栓剂有尿激酶(UK)和链激酶(SK)；第二代为组织型纤溶酶原激活物（t-PA）、重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)、乙酞化纤溶酞化纤溶酶原-链激酶
2、激活剂复合物(APSAC)和尿激酶原(Pro一UK)；第三代溶栓药物是应用现代分子生物学对第一代和第二代溶栓药物进行改造,在特异性、半衰期、溶栓效率等方面进行改进和提高,但目前大多处于实验阶段。主要包括瑞替普酶(r-PA)、替尼普酶(TNK-t-PA)、兰替普酶(1anoteplase,NPA)、孟替普酶(monteplase)以及重组葡激酶（r-SaK）；其中，第三代溶栓剂特点:纤维蛋白特异性高、半衰期长、弹丸式静脉注射、对PAI-1敏感性降低。溶栓药的发展溶栓药的发展 溶栓药物应用现状溶栓药物应用现状 目前用于急性心梗的溶栓药有尿激酶、链激酶、rt一PA等。尿激酶、链激酶是第一代非纤维蛋白
3、选择性溶栓药，其价格便宜，但溶栓后冠状动脉再通率低；纤维蛋白选择性溶栓剂如重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)溶栓再通率高，降低病死率优于链激酶，但价格昂贵；rt-PA只在有纤维蛋白存在的情况下,才可在纤维蛋白表面激活纤溶酶原转变为纤溶酶发挥其纤溶作用,而当无纤维蛋白存在时rt-PA的纤溶酶原激活作用很小，从而使其更有效、更安全。但是，rt一PA半衰期短,需要一个复杂的给药系统,涉及到单剂注射后还要进行分钟的输注。治疗输注的时间以及医疗过失的风险会随着首次负荷量,给药方式的复杂而增加。因此,研制一种疗效优于或相当于rt-PA,使用方法简单的溶栓药物显得十分必要。新型溶栓药新型溶栓药HTUPA
4、的研发的研发 人组织尿激酶型纤溶酶原激活剂(Human Tissue Urokinase Type Plasminogen Activator,HTUPA),是北京裕华能生物科技有限公司针对上述药物的特点,通过基因工程技术对组织型纤溶酶原激活剂进行改造,将UK的部分片断与rt-PA融合,研制出的新型的嵌合重组溶栓药物。HTUPA是通过基因工程技术将UK的部分片断与rt-PA融合而成的一种新型融合蛋白药物,分子量约为84,000Da(因其糖化程度有所差异)。其蛋白质结构设计是在rt-PA的EGF区及Kl区插入Ku,而使其拥有更强的纤维蛋白亲和力和更长的清除半衰期。该品半衰期相对较长，一次静脉推注
5、纤溶活性持续时间超过 60 分钟（rt-PA仅维持3分钟），可进行静脉推注给药，不需静脉点滴及重复给药，因而给药方便，而在疗效上却与rt-PA相当，安全性较好。HTUPA-结构结构 t-PA,Urokinase and HTUPA F E K1 K2 P F E Ku K1 K2 P E Ku P F:Domain homologous to fibronectin“finger”E:Domain homologous to epidermal growth factor K1,K2,Ku:Kringles P:Serine protease domain t-PA Urokinase HTU
6、PA 環球基因生物科技股份有限公司環球基因生物科技股份有限公司 GLOBAL BIOTECH INC.动物实验证实研究显示，单次静脉注射 HTUPA，具有溶解血栓的作用。狗冠状动脉溶栓试验显示，静脉推注HTUPA，在0.5mg/kg至4mg/kg剂量范围内有明显剂量相关性的溶栓作用。HTUPAHTUPA动物实验动物实验 将改进的Amplatz导管经左颈总动脉送入冠脉开口，用铜圈诱发血栓；观察溶栓时间及再通的持续时间（即再闭塞时间）；结果：开通快，持续时间长。0100200300400500600Time to Lysis Time to Reoclusion 时间(分钟)(155)(348)(
7、38069)(13481)HTUPA,20mg,IV bolus t-PA,20 mg,IV bolus n=8 n=10 n=7 n=3 血管再通效果血管再通效果 環球基因生物科技股份有限公司環球基因生物科技股份有限公司 GLOBAL BIOTECH INC.HTUPA动物实验 110100050100150200110100050100150200HTUPA,6 mg iv bolus(N=6)rt-PA,6 mg iv bolus(N=3)Time,Minutes%of Peak Activity%of Functional Activity 環球基因生物科技股份有限公司環球基因生物科技
8、股份有限公司 GLOBAL BIOTECH INC.药代动力学研究药代动力学研究-狗狗 HTUPA动物实验 药物活性 药物功能活性 HTUPAHTUPA在中国国内健康成人志愿者上完成的在中国国内健康成人志愿者上完成的 期临床试验期临床试验 共纳入56名志愿者，其中，男女各28人；年龄：20-40岁；经完善的病史采集、体格检查、心电图、实验室检查等确定身体健康；24名进行药代动力学研究：随机分为：10、20、30毫克组；32名进行安全性研究：随机分为：5毫克、10毫克、20毫克、25毫克、30毫克、35毫克组；（确认低剂量无不良反应后再进行高剂量）HTUPA药代动力学药代动力学 药品名 链激酶
9、尿激酶 rt-PA HTUPA 半衰期 15min 20min 20 可以包含在本次参与试验的病人中)。所有参与试验的病人应在症状出现 5 小时内，静脉注射给予试验药物。排除标准：睡觉醒来出现症状；颅内出血或治疗以前，头部 CT 检测显示颅内微血管梗死灶1/3；尽管颅内 CT 检测正常，临床病理报告认为珠网膜下出血；脑卒中患者，癫痫发作不明显；其它类型的脑卒中，脑部肿瘤，大脑出血；临床试验登记前 3 个月之内，有缺血性梗塞的经历；临床试验登记前 14 天之内，经历了重要的外科手术；临床试验登记前 21 天之内，有胃肠道和泌尿系统出血史；已知的出血体质；临床试验登记前 3 周之内，经历了新近的透
10、壁心肌梗死和心包炎；颅内肿瘤，动静脉剂型和动脉瘤；其它身体状况异常，包括中度到重症肝炎或肾脏疾病，怀孕或需要护理的病人，严重的心脏病，有红斑狼疮史，癌症患者(不包括非活动性非黑色素瘤的皮肤癌，原位宫颈管癌或者癌症治愈 5 年以上)；血糖 400 mg/dl，血小板计数 100,000/mm3，血红蛋白含量 180 mmHg 或舒张压 110 mmHg)，随访过程中也未试用抗高血压药物治疗；有严重的肝病(GOT/GPT 3 X 高于正常水平)；血清肌酐含量 2 X高于正常水平；肾脏透析，其它所有与正常生理状况不符，有可能影响受试者安全，影响对试验结果的评价的患者都排除在试验范围之外。给药方法：所
11、有受试患者在症状出现 5 小时之内接受治疗，每一位患者静脉注射HTUPA一次。药效学评价：参照National Institute of Health Stroke Scale(NIHSS)，the modified Rankin Scale,Barthel Index and Glasgow Outcome Scale进行。安全性评价：主要依据为有症状和无症状的颅内出血。研究结果研究结果 2001年6月至2004年3月，入选35例患者 给药剂量：29例的剂量为0.3mg/kg；3例为0.35mg/kg；1例为0.4mg/kg。研究结果研究结果 颅内出血颅内出血 安全性评价安全性评价 研究结果
12、研究结果 颅内出血颅内出血 安全性评价安全性评价 有效性分析 亚组接受0.3mg/kg的病例从开始接受治疗时至90天的得分变化，在NIHSS中得分2：从0%到38%；在校正Rankin量表评分中得分0或1：从0%到45%；在Barthel索引表中评分95：从3%到45%；在Glasgow结果量表中评分为1：从3%到45%。研究结论研究结论 急性脑梗塞病人在症状出现 5 小时内，一次性静脉注射 HTUPA 0.3 mg/kg 是安全的，尽管在这项研究中，病例数较少，但是用药后，神经系统功能的改善仍然是令人满意的。HTUPA治疗急性ST段抬高性心肌梗死的 多中心a期临床试验 a a期临床试验期临床
13、试验 HTUPAHTUPA临床试验研究临床试验研究 入选标准入选标准 缺血性胸痛持续30分钟；持续性缺血性胸痛发作6小时以内；心电图至少2个或2个以上肢体导联ST段抬高0.1mV，或在相邻2个或2个以上胸导联ST段抬高0.2mV；年龄18岁70岁，性别不限；签署知情同意书。排除标准排除标准 1）非ST段抬高性急性心肌梗死或不稳定型心绞痛；2）妊娠、哺乳期、月经期妇女；3）脑血管意外病史（脑出血史、蛛网膜下腔出血史、缺血性脑卒中史、TIA发作史）；4）严重进展性疾病（如恶性肿瘤）或预后不良使患者极度衰竭的疾病；5）4周内有活动性的内脏出血（如胃肠道、泌尿生殖系统出血，但月经除外），或有未治愈的消
14、化道溃疡；6）颅内肿瘤、可疑主动脉夹层、动静脉畸形、动脉瘤；7)入院时血压160/100mmHg，就诊前血压经常170/110mmHg；a a期临床试验期临床试验 排除标准排除标准 8)目前正在使用治疗剂量的抗凝药，如华法林等；9)已知的出血倾向（止血或凝血功能障碍）；10)新近（6个月内）颅脑或脊柱手术史；11)2个月内创伤史，包括创伤性心肺复苏或较长时间（10min）的心肺复苏，或接受过外科大手术；6个月内头部外伤史；12)2周以内接受过在不能压迫部位的大血管穿刺；13)高度怀疑左心腔内血栓（如二尖瓣狭窄并房颤）；14)糖尿病或其它疾病引起的眼底出血病史；15)严重肝、肾功能障碍史（ALT
15、正常上限3倍；肌酐225mol/L）；休克；16)感染性心内膜炎、急性心肌炎、急性心包炎、脓毒性血栓性静脉炎、严重感染部位存在的动-静脉瘘；17)与以前部位相同的再梗死；18)正在参加其它临床试验；19)受试者使用血栓溶解药物曾产生过敏性反应；20)既往曾用HTUPA或rt-PA溶栓治疗；已知对HTUPA和/或rt-PA及其成分过敏或禁忌者。a a期临床试验期临床试验 实验方法实验方法 试验药物：试验药物：注射用人组织尿激酶型纤溶酶原激活剂（HTUPA），规格：5mg/支，由北京裕华能生物科技有限公司生产，生产批号：20080301。用法用量：用法用量：起始剂量与用法：注射用人组织尿激酶型纤溶
16、酶原激活剂（HTUPA），前三例剂量：25mg/例，用10ml注射器抽取无菌注射用水10ml注入含HTUPA的西林瓶中，摇晃至药物完全溶解，静脉弹丸注射法给药，给药时间510秒。剂量调整：根据试验结果（开通及出血情况），由主要研究者决定增加或减少剂量，其幅度为5mg/例，具体设计如下图：a a期临床试验期临床试验 起始剂量：25 mg/例 前3例结果分析 1例发生严重出血等并发症：剂量降至20mg/例 1例发生严重出血等并发症：剂量降至15mg/例 23例血管未开通，且未出现严重出血等并发症：剂量增至30mg/例 23例血管未开通，且未出现严重出血等并发症：剂量增至35mg/例 23例血管开通，且未出现严重出血等并发症 剂量不变，累计完成10例 前10例结果分析 血管开通率70%，且未出现严重出血等并发症（或仅少量出血，但发生率30%）：增加1次剂量，完成20例 血管开通率70%，且出现严重出血等并发症（或出血发生率30%）：降低1次剂量，完成20例 血管开通率70%，并出现严重出血等并发症（或出血发生率30%）：终止试验 血管开通率70%，且未出现严重出血等并发症（或仅少量出血，且发
