1、昆仑泌尿外科医院检验科临检室作业指导书文件编号;SZKL-LJ-01版本/修订号;1/0主题内容血液常规检验标准操作规程生效日期:20150101页码;第 1 页 共5 页血液常规检验标准操作规程1.目的:检测分析血液中红细胞、白细胞、血小板、血红蛋白等的数量和质量,对感染、炎症、血液系统疾病等进行辅助诊断、监测治疗效果等。2.检测项目:迈瑞BC-2600全自动血球仪上测定血常规19项。包括:白细胞计数(WBC)、中性粒细胞数(Neut#)、淋巴细胞数(Lymph#)、中间细胞计数(MID#)、中性粒细胞比率(Neut%)、淋巴细胞比率(Lymph%)、中间细胞比率(MID %)、红细胞计数(
2、RBC)、血红蛋白浓度(Hb)、红细胞压积(Hct)、红细胞平均体积(MCV)、平均血红蛋白量(MCH)、平均血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞体积分布宽度变异系数(RDW-CV)、红细胞体积分布宽度标准差(RDW-SD)、血小板计数(PLT)、平均血小板体积(MPV)、血小板体积分布宽度(PDW)、血小板压积(PCT)。3.原理:3.1 血细胞(WBC.RBC.PLT)数量和体积检测原理:电阻抗法。3.2白细胞分类原理:电阻抗法。白细胞脉冲的大小是由被计数细胞在溶血素中大小决定的。3.3 血红蛋白测定:采用氰化高铁血红蛋白(HICV)比色法。3.4 RDW、MCH、MCV、MCHC、MPV、P
3、CT、PDW为换算项目。3.5 HCT测定原理:血细胞产生的脉冲信号的峰值与RBC容积成正比。4.仪器:厂商名:深圳迈瑞公司。型号:BC-2600。5.试剂:厂商名:深圳迈瑞公司。5.1清洗液:注册号:粤深药临械(准)字2013第1400051。规格:5.5L5.2溶血素:注册号:粤深药临械(准)字2013第1400021。规格:500ML。5.3稀释液:注册号:粤深药临械(准)字2013第1400071。规格:20L。5.4其它:迈瑞配套试剂:E-Z酶清洁剂,控头清洁剂等6.标本的采集与运送6.1 标本类型:静脉血或手指末梢血。6.2 标本要求:标本用EDTA-K2 抗凝;静脉血标本量应达到
4、2ml;末梢血20l。6.3 标本运送:室温运送,4小时内完成检测。6.4 标本拒收标准:严重溶血、凝固、血量少、无条码、无标识的血液标本不能进行检测。7.操作步骤:7.1 采集病人静脉血lml,加入含有EDTA-K2的真空管中,立即颠倒混匀8次。7.2 将质控品从冰箱取出,在室温条件下放置15分钟,充分混匀后,与样本一同测定。7.3 开机:将仪器POWER开关置于ON。仪器自动进行清洗并进行空白计数,当空白计数值在允许范围内时可检测标本。7.4 检查各种试剂量是否正常。7.5 充分混匀的血液置于吸样针下,按下进样开关,仪器自动进行检测。昆仑泌尿外科医院检验科临检室作业指导书文件编号;SZKL
5、-LJ-01版本/修订号;1/0主题内容血液常规检验标准操作规程生效日期:20150101页码;第 2 页 共5 页7.6 观察仪器测定结果及直方图,必要时应手工计数及白细胞分类。7.7 审核结果,打印报告。8血细胞的显微镜检查(用于对仪器法结果可疑时的复核)8.1 镜检标准8.1.1 医生明确要求涂片镜检;8.1.2 仪器提示有原始或幼稚细胞、变异淋巴细胞、有核红细胞等异常需镜检;8.1.3 新生儿标本需涂片镜检;8.1.4 WBC20109/L或2.0109/L;8.1.5淋巴细胞45%,需做涂片镜检,1-4岁儿童且血细胞计数及他结果正常者除外;8.1.6 单核细胞15%;8.1.7 嗜酸
6、性粒细胞10%;8.1.8 嗜碱性粒细胞3%8.1.9 PLT500109/L或60109/L;8.2.0 提示有PLT聚集,需涂片镜检;8.2 镜检步骤8.2.1 血涂片的制备8.2.1.1 在距载玻片一端1cm的位置滴加约5l的抗凝血;末梢血直接用干净玻片蘸取。8.2.1.2 用推片使血液沿其边缘展开,与载玻片3040度角进行推片。8.2.1.3 涂片完成后在空气中自燃晾干。8.2.2 血涂片的染色8.2.2.1 染色试剂:瑞氏染色液。8.2.2.2 染色步骤a. 用蜡笔在血膜两头画线,然后将血涂片平放在染色架上。b.加瑞氏染液数滴,以覆盖整个血膜为宜,染色约1分钟。c.滴加约等量的缓冲液
7、与染液混合,室温下染色5-10分钟。d. 用流水冲去染液,待干燥后镜检。8.2.2.3 镜检观察要求a. 将湿片在高倍镜下观察涂片、染色是否良好,否则重新涂片染色。b. 选择涂片体尾交界、细胞分布均匀不重叠部分进行镜检。c. 在高倍镜下辨认细胞不清楚时,必须待玻片干后用油镜观察。8.2.2.4 镜检观察的处理a. 根据仪器报警提示的内容,确认镜下观察结果是否与仪器提示一致。b. 发现原始及幼稚白细胞,则必须进行手工分类;如不能确定细胞种类,则报告异常细胞的比例。c. 如果镜下发现有核红细胞,则必须对白细胞进行校正。d. 如果镜下观察有血小板聚集,则必须手工冲池计数血小板;如果是EDTAK2引起
8、的血小板聚集,可用109mmol/L枸橼酸钠抗凝剂采集标本,结果需要进行换算。e. 多发性骨髓瘤、冷球蛋白血症引起的红细胞聚集,可将血液用仪器稀释液稀释3倍,然后37水浴箱中10分钟后,立即上机检测,结果需要进行换算。昆仑泌尿外科医院检验科临检室作业指导书文件编号;SZKL-LJ-01版本/修订号;1/0主题内容血液常规检验标准操作规程生效日期:20150101页码;第 3 页 共5 页9参考区间中国成年人群血细胞分析参考区间(静脉血标本仪器法)测定项目 男 女 WBC(109/L) 3.59.5 3.59.5Neut(109/L) 1.86.3 1.86.3Lymph(109/L) 1.13
9、.2 1.13.2Neut% 4075 4075Lymph% 2050 2050RBC(1012/L) 4.35.8 3.85.1 Hb(g/L) 130175 115150HCT(%) 0.400.50 0.350.45MCV(fl) 82100 82100MCH(pg) 2734 2734MCHC(g/L) 316354 316-354PLT(109/L) 125350 12535010危急值测定项目 WBC(109/L) 1.0 40Hb(g/L) 50 180PLT(109/L) 20 60011临床意义11.1 白细胞计数:11.1.1 生理性变化:白细胞计数结果有明显的生理性波动,
10、如早晨较低,傍晚较高;餐后较餐前高;剧烈运动、情绪激动时较安静时偏高;月经期、妊娠、分娩、哺乳期亦可增高;新生儿及婴儿期明显高于成人。11.1.2 病理性增多,常见于:11.1.2.1 急生化脓性感染,尤其是革兰阳性球菌感染(脓肿、脑膜炎、肺炎、扁桃体炎、阑尾炎)11.1.2.2 某些病毒性感染:传染性单核细胞增多症、流行性乙型脑炎等。11.1.2.3 组织损伤:严重外伤、大手术、大面积烧伤、急性心肌梗死等。11.1.2.4 急性大出血11.1.2.5 白血病11.1.2.6 恶性肿瘤:肝癌、胃癌、肺癌等。11.1.3 病理性减少,见于:11.1.3.1 某些感染性疾病,尤其是革兰氏阴性杆菌感
11、染(伤寒、副伤寒等)。11.1.3.2 某些病毒感染:流感、病毒性肝炎等。11.1.3.3 某些原虫感染,如疟疾、黑热病等11.1.3.4 某些血液病:再生障碍性贫血、急性粒细胞缺乏症、巨幼细胞贫血等。11.1.3.5 自身免疫性疾病:SLE、AIDS等。11.1.3.6 脾功能亢进:门脉肝硬化昆仑泌尿外科医院检验科临检室作业指导书文件编号;SZKL-LJ-01版本/修订号;1/0主题内容血液常规检验标准操作规程生效日期:20150101页码;第 4 页 共5 页11.1.3.7 肿瘤化疗、放疗及某些药物(氯霉素、磺胺类药等)反应等。11.2 中性粒细胞:中性粒细胞增多分生理性和病理性增多。病
12、理性增多可见于急性感染或炎症、急性失血、急性中毒及恶性肿瘤等;中性粒细胞减少可见于病毒感染、慢性理化损伤、自身免疫性疾病等。11.3 淋巴细胞:淋巴细胞病理性增多见于某些慢性感染、肾移植手术后、白血病、再生障碍性贫血、粒细胞缺乏症等;淋巴细胞减少可见于接触放射线,应用肾上腺皮质激素或促肾上腺皮质激素,严重化脓性感染等情况。11.4 红细胞和血红蛋白:11.4.1减少见于:急、慢性红细胞丢失过多、红细胞寿命缩短、造血原料不足、骨髓造血功能减退等;11.4.2增多见于:真性红细胞增多症,肺心病等。11.5 红细胞比积:增高可见于大面积烧伤、脱水等血液浓缩情况;减低可见于贫血。11.6 红细胞体积分
13、布宽度(RDW)11.6.1用于缺铁性贫血的诊断和疗效观察,缺铁性贫血时RDW值增大,当给以铁剂治疗有效时RDW值一过性进一步增大,随后逐渐降到正常。11.6.2对小细胞低色索性贫血的鉴别诊断.缺铁性贫血时RDW值增大而轻型海洋性贫血时RDW值正常。11.6.3用于对贫血的分类(Bassman MCV/RDW分类法),根据MCV、RDW值变化共分为6种类型贫血。A.小细胞均一性贫血:MCV减小,RDW正常,如轻型海洋性贫血。B.小细胞不均一性贫血:MCV减小,RDW增大,如缺铁性贫血。C.正细胞均一性贫血:MCV、RDW均正常,如慢性病所致贫血。D.正细胞不均一性贫血:MCV正常,RDW增大,如早期缺铁性、营养性贫血。E.大细胞均一性贫血:MCV增大,RDW正常,如再生障碍性贫血。F.大细胞不均一性贫血MCV、RDW均增大,如巨幼细胞性贫血。11.7 MCV、MCH、MCHC:这三个参数通常都用于各型贫血的诊断,具体应用如下表:贫血类型 MCV(82100) MCH(2734) MCHC(316354) 常见原因及疾病正常细胞性贫血 正常 正常