1、苍白（梅毒）密螺旋体危害评估报告1危害程度分类1.1分类等级根据中华人民共和国传染病防治法，苍白（梅毒）密螺旋体属于乙类传染病。在卫生部2006年公布的人间传染的病原微生物名录中将丙型肝炎病毒列为危害程度第三类病原微生物。运输包装仅病毒培养物为B类，UN编号为UN3373。1.2不同实验室操作生物安全实验室级别要求根据人间传染的病原微生物名录要求：苍白（梅毒）密螺旋体血清学检测属于未经培养的感染材料的操作，应在符合级生物安全实验室（BSL-2）要求的实验室中进行。2背景资料2.1一般生物学特性 梅毒螺旋体细长，5150.10.2um，形似细密的弹簧，螺旋弯曲规则，平均814个，两端尖直。电镜下
2、显示梅毒螺旋体结构复杂，从外向内分为：外膜（主要由蛋白质、糖及类脂组成）、轴丝（主要由蛋白质组成）、圆柱形菌体（包括细胞壁、细胞膜及胞浆内容物）；一般染料不易着色。梅毒螺旋体有生活发育周期，分为颗粒期、球形体期及螺旋体期，平均约30小时增殖一代，发育周期与所致疾病周期、隐伏发作及慢性病程有关。2.2对外界环境的稳定性梅素螺旋体对温度、干燥均特别敏感，离体干燥12小时死亡，41中1小时死亡，对化学消毒剂敏感，12%石炭酸中数分钟死亡，对青霉素、四环素、砷剂等敏感2.3致病性人是梅毒的唯一传染源，由于感染方式不同可分先天性梅毒和后天性梅毒。前者是患梅毒的孕妇经胎盘传染给胎儿的；后者是出生后感染的，
3、其中95%是由性交直接感染，少数通过输血等间接途径感染。2.3.1 先天性梅毒又称胎传梅毒。梅毒螺旋体经胎盘进入胎儿血循环，引起胎儿全身感染，螺旋体在胎内儿脏（肝、脾、肺及肾上腺）及组织中大量繁殖，造成流产或死胎，如胎儿不死则称为梅毒儿，会出皮肤梅毒瘤、骨膜炎、锯齿形牙、神经性耳聋等症状。2.3.2 后天获得性梅毒依其传染过程可分为三期： 初期梅毒：梅毒螺旋体侵入皮肤粘膜约三周后，在侵入局部出现无痛性硬结及溃疡，称硬性下疳。局部组织镜检可见淋巴细胞及巨噬细胞浸润。下疳多发生于外生殖器，其溃疡渗出物含有大量梅毒螺旋体，传染性极强。下疳常可自然愈合，约23个月无症状的隐伏期后进入第二期。二期梅毒：
4、此期的主要表现为全身皮肤粘膜出现梅毒疹，全身淋巴结肿大，有时亦累及骨、关节、眼及其他器官。在梅毒疹及淋巴结中有大量螺旋体。不经治疗症状一般可在3周3个月后自然消退而全愈；部分病例经隐伏312个月后可再发作。二期梅毒因治疗不当，经过5年或更久的反复发作，而进入三期。三期梅毒：主要表现为皮肤粘膜的溃疡性损害或内脏器官的肉芽肿样病变（梅毒瘤），严重者在经过1015年后引起心血管及中枢神经系统损害，导致动脉瘤、脊髓痨及全身麻痹等，此期的病灶中螺旋体很少，不易检出。一、二期梅毒又统称为早期梅毒，此期传染性强而破坏性小。三期梅毒又称为晚期梅毒，该期传染性小，病程长、而破坏性大。当螺旋体从体内清除后仍可再感
5、染梅毒，而且仍可出现一期梅毒症状。此病周期性潜伏与再发的原因可能与体内产生的免疫力有关，如机体免疫力强，螺旋体能变成颗粒形或球形，在体内一些部位潜伏起来，一旦机体免疫力下降，螺旋体又可侵犯体内某些部位而复发。2.4传播途径：2.4.1 性接触：这是梅毒病因来源的主要传染途径。未经治疗的梅毒病人在感染梅毒后的1年内传染性为最强，随着病期的延长，传染性越来越小，到感染后4年，通过性接触一般无传染性。2.4.2 胎盘感染：患梅毒的孕妇可以通过胎盘使胎儿受染，一般认为梅毒的病因主要感染发生在妊娠4个月以后。病期超过4年未经治疗的梅毒妇女，虽然有性接触，一般也不会传染，但妊娠时仍可传染给胎儿，病期越长，
6、传染性越小。2.4.3 不良卫生习惯：梅毒的病因可以通过少数性接触以外的途径受传染，如接吻、哺乳;接触有传染性损害病人的日常用品，如衣服、毛巾、剃刀、餐具、烟嘴等，也可传染。2.4.4 血液感染：梅毒患者、潜伏梅毒及隐性梅毒血清具传染性，通过输血及共用针头可传染他人。2.5梅毒的预防、诊断和治疗2.5.1预防1.加强卫生宣传教育，反对不正当的性行为；2. 疑病人均应进行预防检查，做梅毒血清试验，以便早期发现新病人并及时治疗；3现梅毒病人必须强迫进行隔离治疗，病人的衣物及用品，如：毛巾，衣服，剃刀，餐具，被褥等，要在医务人员指导下进行严格消毒，以杜绝传染源；4踪病人的性伴侣，包括病人自报及医务人
7、员访问的，查找病人所有性接触者，进行预防检查，追踪观察并进行必要的治疗，未治愈前配偶绝对禁止有性生活；5可疑患梅毒的孕妇，应及时给予预防性治疗，以防止将梅毒感染给胎儿；未婚男女病人，未经治愈前不能结婚。2.5.2实验室检查及其诊断临床表现诊断症状，体征及应用梅毒螺旋体明胶凝集试验、梅毒血清试验、基因诊断技术检测梅毒螺旋体。2.5.3梅毒螺旋体的治疗1早期梅毒：包括一期、二期和病期不足两年的潜伏梅毒患者，可给予青霉素肌肉注射，每侧臀部120万单位，共240万单位，只注射一次。2晚期梅毒：包括有三期皮肤、粘膜、骨损害等患者，病期在两年以上的潜伏梅毒，心血管梅毒和神经梅毒等。对于良性晚期梅毒(血管、
8、粘膜及骨等)可予以普鲁卡因青霉素G肌肉注射，每日一次，每次60万单位，共15次，总剂量900万单位。或用苄星青霉素每周肌肉注射一次，每次240万单位，共三次，总量720万单位。3. 抗生素：青霉素、红霉素类、四环素类。3从事实验室活动的危险性分析及相应的预防措施3.1实验室实验活动背景资料本实验室主要从事HBV/HCV/HIV 病毒及梅毒螺旋体的血清学检测。梅毒螺旋体筛查实验: 酶免法(ELISA)3.2可能危害在实验操作过程中，包括接收样本时样本包装密封性不好造成样本泄露；操作过程中如打开容器盖时样本外溅，加样、孵育、震荡、分离保存血清等时由于操作不慎导致样本溅出、离心管破裂崩溅、气溶胶等。
9、实验室工作环境的污染，实验人员如果接触污染的实验仪器表面、冰箱、加样器、实验台、门把手及实验废弃物等均可能被感染。3.3预防及处置措施3.3.1预防1) 检测过程均应在生物安全防护级实验室内进行。2) 操作者在实验全过程包括样品接收，都应穿戴好一切生物安全防护装备，一次性的口罩、帽子、双层乳胶手套，防护衣、必要时配戴防护镜等，操作全过程应严格执行实验室的标准操作规程（SOP）。3) 尽量避免在实验室使用针头、刀片、玻璃器皿等利器，以防刺伤。如果必须使用，在处理或清洗时应采取措施防止刺伤或划伤，并应对用过的物品进行消毒处理。4) 如接触物传染性危险大，可戴双层（两付）手套以增加保护。操作时手套破
10、损，应立即丢弃、洗手并戴上新手套。5) 禁止采用口腔吸液管，必须使用移液器来操作实验室的所有液体。6) 工作完毕，要对工作台面消毒。工作台面应当用0.1%0.2%次氯酸溶液消毒；用消毒液清洗后要干燥20min以上；7) 工作完毕，脱去手套后洗手，再脱去工作衣，用肥皂和流动水洗手。8) 血清（血浆）样本均应严格按要求保存，HIV抗体初筛阳性样品应做好标记单独保存，采用WHO三级包装系统，样本置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样本的编号；将试管放入专业带盖的坚固容器内，在处理和运输过程中防止受到外力挤压，以防标本试管破碎污染环境；在试管周围垫有缓冲吸水；应在2-8条件下运送，运输箱外有明
11、显的黄色“当心感染”标识。3.3.2处置措施1) 所有的血液、血清（血浆）均应视为有潜在传染性，都应以安全的方式进行操作。应按操作未知的有传染风险样品一样，小心存放、拿取和使用所有可能有传染性的质量控制和参考物质。2) 接收样本时，核对样品与送检单，检查样品管有无破损和溢漏，如发现溢漏应立即将尚存留的样品移出，若样本外漏到标本容器外面，应立即用浸有0.5%含氯消毒液的多重软布及75%酒精擦拭标本容器，必要时通知重新留取标本。打开标本容器时要小心，以防内容物泼溅。废弃的标本视为高危物质放置到高压灭菌锅内消毒，同时立即更换污染的手套，污染的手套也应放到高压灭菌锅内灭菌。3) 在进行操作时，若发生液
12、体外溅，应将被溅的地方用0.5%含氯消毒液浸泡的物质覆盖，待消毒液起作用10-15分钟后清理该地方，移走吸水性物质，并用75%酒精及清水多次擦拭该地方。所有实验用品应按污染物质处理，放入高压灭菌锅内灭菌。4) 在离心过程中，若发生离心管破裂及样本外溅，应立即停止离心，待离心机自动停止并发出提示信号30分钟后，确保穿戴好一切防护用品后，方可打开离心机盖，用止血钳子夹出离心的碎片，被样本污染的地方，防置浸泡有0.5%含氯消毒剂的吸水性物质，待消毒剂起作用后10-15分钟再清理污染处，移走吸水性物质，并用75%酒精多次消毒污染处所有消毒处理用过的物品应按高危物质处理，放入高压灭菌锅内灭菌。5) 如果
13、在操作过程中将待检测的血液、体液等样本溅洒于皮肤粘膜表面时，应立即用自来水、清水或生理盐水反复冲洗；如溅入眼睛、口腔等部位，应用自来水、清水或生理盐水长时间彻底冲洗（30分钟）；如发生皮肤粘膜针刺、切割伤、刮伤等出血性损伤，应立即挤出损伤局部的血液，然后用自来水、清水或生理盐水等彻底冲洗，再用碘伏消毒创面；如衣物被污染，应尽快脱掉被污染的衣物，进行消毒处理；如有高危的意外事故发生，除进行局部处理外，同时应立即采取预防措施，包括对其随访、HIV检测、休息并暂时离开原岗位3个月，按医嘱服用抗HIV药物进行预防。4实验室职业暴露后的处理发生意外事故时，应立即进行紧急处理，并报告实验室负责人。 1)
14、皮肤针刺伤或切割伤：立即用肥皂和大量流水冲洗，尽可能挤出损伤处的血液，用70%乙醇或其它消毒剂消毒伤口。2) 皮肤污染：用水和肥皂冲洗污染部位，并用适当的消毒剂浸泡，如70%乙醇或其它皮肤消毒剂。3) 粘膜污染：用大量流水或生理盐水彻底冲洗污染部位。4) 衣物污染：尽快脱掉污染的衣物，进行消毒处理。5) 污染物泼溅：发生小范围污染物泼溅事故时，应立即进行消毒处理。发生大范围污染物泼溅事故时，应立即通知实验室主管领导和安全负责人到达事故现场查清情况，确定消毒的程序。5工作人员的预防接种和工作人员素质5.1工作人员的预防疫苗5.1.1目前尚无有效疫苗预防其感染。5.1.2实行健康监测报告，实验室人员必须在身体状况良好的情况下，才能进入实验室工作。如遇实验室人员暴露情况出现，当时除按实验室突发事件处理程序进行处理以外，同时进行抗生素预防治疗，推荐长效青霉素240万单位，每周一次，每侧臀部注射120万单位/次，连续注射两周。对青霉素过敏者可选用红霉素等。分别在暴露后即刻、1个月、3个月进行梅毒抗体检测5.2工作人员素质实验室共有技术人员9名，其中申请进入BSL-2实验室9名。所有技术人员均参加过生物安全培训，熟知梅毒实验SOP文件及流程。6评估结论7. 评估结论结合我站实验室的状况（BSL-2），依据卫生部病原微生物实验室生物安全管理条例中的相关要求，符合开展微生物病原体检测的条件。11