1、地中海贫血检测 血液学分析血液学分析 容敏逢容敏逢 主要内容 筛查方案 血液学分析 地贫基因型与临床表现 地中海贫血筛查及产前诊断流程地中海贫血筛查及产前诊断流程 被检对象被检对象（婚前或孕中期）（婚前或孕中期）血液学分析血液学分析（MCV，Hb A2变化）变化）排除地贫排除地贫 地贫携带者地贫携带者 遗传咨询，配偶检查遗传咨询，配偶检查 血液学分析血液学分析（MCV Hb A2变化）变化）地贫携带者地贫携带者 排除地贫排除地贫 遗传咨询遗传咨询 双亲基因分析双亲基因分析 胎儿产前诊断胎儿产前诊断 地中海贫血的临床特征地中海贫血的临床特征 小细胞低色素性溶血型贫血小细胞低色素性溶血型贫血(中中
2、、重度重度)黄疸黄疸 肝脾肿大肝脾肿大 (脾大明显脾大明显)骨髓扩增骨髓扩增 发育迟缓发育迟缓 合并感染合并感染 Barts 水肿胎水肿胎(地贫地贫,宫内或出生后数小时内死亡宫内或出生后数小时内死亡)地贫血液学分析 最常用的方法:红细胞平均容积(MCV)、红细胞脆性试验、Hb电泳联合检测进行筛查,发现异常者再进行基因诊断。地中海贫血的血液学表型特征地中海贫血的血液学表型特征 RBC脆性脆性 RBC 参数参数 MCV MCH 细胞形态变化细胞形态变化 Hb电泳分析电泳分析 Hb A2 ()或或 ()Hb Barts()Hb H()Hb E()贫血实验室诊断程序 贫血的形态学分类贫血的形态学分类
3、贫血类型 MCV（fl）MCH(pg)MCHC(g/L)特征 小细胞低色素性贫血 80 24 200300 珠蛋白合成异常，缺铁性贫血，慢性失血 小红细胞正色素性贫血 80 32 320360 骨髓呈巨幼红细胞特征 正红细胞正色素性贫血 80100 2732 320360 急性失血，急性溶血，再生障碍性贫血 人类不同时期血红蛋白的组成 人血红蛋白的组成人血红蛋白的组成 胚胎期血红蛋白：Hb Gower 1（x2 e2）Hb Gower 2(2 e2)Hb Portland(x2 g2)即Hb Portland 1 另有少量Hb Portland 2(x2 2)，Hb Portland 3(x2
4、 d2)胎儿期主要血红蛋白：HbF（2 g2）成人主要血红蛋白：HbA（2 2）约占血红蛋白总量96.597.5%HbA2（2 d2）约占血红蛋白总量2.53.5%HbF（2 g2）约占血红蛋白总量1%以下。地中海贫血表型阳性诊断参考标准 地中海贫血 MCV82fL、HbA2 2.5%、HbF 2%、红细胞形态异常，其中一项阳性者。地中海贫血 MCV82fL、HbA2 3.5%、HbF 3.5%、红细胞形态异常，其中一项阳性者。血红蛋白电泳图谱血红蛋白电泳图谱 1 2 3 4 5 1.1.正常人正常人HBHB 2.2.轻型轻型 地贫地贫 3.3.异常异常HB E HB E 杂合子杂合子 4.4
5、.新生儿新生儿HB BartHB Barts s(4 )(地贫标地贫标准型准型）5.HB H 5.HB H(4)Normal AA2 AE Barts AF HA+-500V,25min 全自动血红蛋白琼脂糖凝胶电泳图谱 1、正常成人HbA2,无HbF区带;2、成人HbA2升高,但HbF碱变性含量正常,图谱中不能扫描出HbF区带;3、成人HbA2升高,HbF碱变性含量稍高于正常,图谱中可见浅染HbF区带;4、成人HbA2升高,HbF碱变性含量高于正常,图谱中可见一浅染HbF区带;5、成人HbA2升高,HbF碱变性含量明显高于正常,图谱中可见一清晰HbF 区带。a-珠蛋白基因突变及其遗传学分型珠
6、蛋白基因突变及其遗传学分型 就遗传单体型而言就遗传单体型而言a-珠蛋白基因突变可分成三类：珠蛋白基因突变可分成三类：a-地贫2缺失突变 左缺失（-a4.2），右缺失（-a3.7）、-a2.7 a-地贫I缺失突变 基因型为（-），包括：-SEA、-THAI、-FIL及-HW a-地贫非缺失突变 基因型为（a aT），包括：a aCS，a a QS，a a ws HbH病基因型可分成缺失型和非缺失型两种：缺失突变基因型：（-a3.7/-）、（-a4.2/-）及(-a2.7/-)非缺失突变基因型：（aaT/-）和（aaT/aaT）a-地中海贫血临床类型 根据临床表现严重程度，可分成以下四种 静止型静
7、止型a-地贫地贫（aaa-）或（aaa aT）出生时脐血血红蛋白含少量Hb Barts，-般少于5 患者无临床症状 轻型（标准型）轻型（标准型）a-地贫地贫 （a a/-）或（a-a-）出生时脐血血红蛋白Hb Barts占5-10%患者多无明显临床症状,实验室检查可小细胞低色素性贫血，MCH和MCV均较低 血红蛋白血红蛋白H病病 （-a/-），或（a-/-），或（a aT/-），或（a aTa aT）出生时脐血Hb Barts约占20-30，此时HbH含量较低；但出生后Hb Barts含量迅速降低，HbH含量逐渐增高。通常成年期患者HbH含量会持续在4%-20%范围内。终生轻度至中度贫血和肝脾
8、肿大等，但差异较大.实验室检查可见小细胞低色素性贫血，红细胞内可见包涵体 HB Barts胎儿水肿综胎儿水肿综合征（合征（-/-）Barts为主,少量 Hb H 和HbPortland 患胎多于妊娠晚期（3440周）或产后数小时内死亡 -珠蛋白基因的突变珠蛋白基因的突变 -珠蛋白基因点突变：珠蛋白基因点突变：-珠蛋白基因最常见的突变类型。包括单碱基置换和数个碱基缺失或插人突变。在中国-地贫群体中 41/42（-TCTT）、IV S-654(CT),CD17(AT),-28（AG）和CD71/72（+A）等5种突变最常见，约占总突变率90%以上 大片段缺失：缺失突变涉及基因组上较大片段的缺失包括
9、-地贫和遗传性胎儿血红蛋白持存症(hereditary persistance of fetal hemoglobin,HPFH)。此外，G-和A-珠蛋白基因启动子区的突变也可导致HPFH。突变类型 编码区的无义突变、移码突变和起始密码突变：如CD41-42，CD71-72，CD17突变后形成终止子，表现为0。非编码区IVS-1和IVS-2突变 如IVS-II-654突变影响mRNA的拼接，表现为。影响转录的突变：如-28，-29的突变影响基因的转录，表现为。地贫的基因型与表现型 重型重型-地中海贫血地中海贫血/、0/0、0/（纯合子或双重杂合子）所有患者有组织缺氧症状，可出现所有患者有组织缺
10、氧症状，可出现“地中海贫血面容地中海贫血面容”，生长发育迟缓。红，生长发育迟缓。红细胞体积小且低色素。过剩的游离细胞体积小且低色素。过剩的游离 链形成链形成 链包涵体，引起溶血性贫血，靠链包涵体，引起溶血性贫血，靠输血维持生命。输血维持生命。实验室检查主要可见：血红蛋白定量约为20-30g/L或更低；红细胞体积细小，形态不一，靶形红细胞较常见，网织红细胞增高；血红蛋白电泳时HbA缺乏或严重缺乏，HbF增高达30以上（偶可达90%以上）。轻型轻型-地中海贫血地中海贫血A/、A/0（杂合子）患者症状较轻，轻度贫血，轻度肝脾肿大。红细胞脆性降低，小细胞，低色患者症状较轻，轻度贫血，轻度肝脾肿大。红细
11、胞脆性降低，小细胞，低色素，素，MCVMCV、MCHMCH较低。较低。实验室检查可见：血红蛋白定量约为实验室检查可见：血红蛋白定量约为90-120g/L或更低或更低;小细胞低色素性贫血，小细胞低色素性贫血，MCH和和MCV分别为分别为2022pg和和5070fl;红细胞脆性降低；约红细胞脆性降低；约50%患者患者HbF增高，增高，约为约为1-3%，甚少大于，甚少大于5%；HbA2量增高（达量增高（达4%-8%）。）。地贫的基因型与表现型 中间型中间型-地中海贫血地中海贫血/、/0（纯合子或双重杂合子）患者临床症状介于重型和轻型之间，如中度偏重贫血，生长发育迟缓，黄疸患者临床症状介于重型和轻型之
12、间，如中度偏重贫血，生长发育迟缓，黄疸等。血液检查呈小细胞低色素贫血症。等。血液检查呈小细胞低色素贫血症。实验室检查呈小细胞低色素性贫血症改变，血红蛋白定量部分患者可低至实验室检查呈小细胞低色素性贫血症改变，血红蛋白定量部分患者可低至60g/L，但，但也有患者高达也有患者高达100-120g/L本型患者通常属某些本型患者通常属某些-地中海贫血变异型纯合子，如日地中海贫血变异型纯合子，如日+地贫（高地贫（高F）+(高高 F)地贫或两种不同变异型地中海贫血的双重杂合子，如地贫或两种不同变异型地中海贫血的双重杂合子，如+地贫地贫+地贫。地贫。血液学分析的敏感性和特异性 RBC脆性假阴性脆性假阴性 血
13、常规检测血常规检测(MCV)对静止型地贫有小概率的漏检对静止型地贫有小概率的漏检 静止型a-地贫患者多无临床症状 E/N基因型患者的MCV十分接近筛查值这部分地贫患者极易漏诊 通过通过Hb电泳可对电泳可对-地贫进行明确诊断地贫进行明确诊断 HbA2轻度增高诊断-地贫的敏感性可达96.8%,特异性可达97.4%Hb电泳对轻型电泳对轻型-地贫无诊断意义地贫无诊断意义 轻型-地贫无HbBarts(4)和HbH -地中海贫血复合地中海贫血复合-地中海贫血时多表现为地中海贫血时多表现为-地地中海贫血的特征中海贫血的特征,造成造成-地贫漏检地贫漏检.地中海贫血合并缺铁性贫血造成地贫漏检地中海贫血合并缺铁性贫血造成地贫漏检.谢谢！亚能生物技术（深圳）有限公司 http:/www.dbs-