1、单位及实验室名称 项 目 汉源县人民医院检验科 化脓及创伤感染标本的细菌学检验 编号:LAB/SOP/HY/微-002 日期:2010年5月3日 版本:第一版,第0次修订 第1页,共3页一、【标本采集】1.开放性脓肿和脓液分泌物:先以无菌盐水冲洗溃疡面,用无菌棉拭子采取脓液及病灶深部的分泌物,而瘘管则以无菌方法采取组织碎片,放入无菌试管中送检。2.大面积烧伤的创面分泌物:用无菌棉拭子取多部位创面的脓液或分泌物,置灭菌试管内送检。可将蘸有脓液的最内层敷料放入无菌平皿内送检。3.封闭性脓肿:先用无菌生理盐水拭净病灶表面的污染杂菌。然后以无菌注射器抽取脓汁及分泌物;也可于切开排脓时,以无菌棉拭子采取
2、。4.做厌氧菌培养时,一定以无菌注射器抽取脓汁分泌物,厌氧状态下送检。二、【检验方法】1.直接涂片检查(1)一般细菌涂片检查:取脓汁或分泌物直接涂片、染色、镜检,可初步报告:找到革兰氏菌,形似菌。如发现具有芽孢或荚膜的细菌,报告时应注明其大小与位置,以及疑是菌。如镜检时未发现细菌,可初步报告为“直接涂片,未找到细菌”。(2)对疑有结核杆菌感染的标本,还应做抗酸染色。2.细菌培养(1)一般细菌培养:取脓汁棉拭子或脓汁接种于血平板上,中国兰、巧克力平板划线分离,分别置需氧或CO2环境35孵育培养18-24h,观察结果。如有细菌生长,分别涂片行革兰氏染色镜检。并作生化反应或血清学鉴定,即可报告:“培养出菌”,如观察48h后无菌生长,则报告“培养48h后,无细菌生长。”(2)厌氧菌培养:可将标本接种于牛心、牛脑浸出液或布氏杆菌肉汤培养基中,置厌氧环境下培养。(3)结核杆菌培养:一般将脓汁约0.1ml直接接种到结核杆菌培养基3-4w培养。三、【检验程序】 脓汁、创伤分泌物 涂片、革兰染色及抗酸染色镜检 需氧培养 厌氧培养 初步报告 血平板(巧克力平板)及伊红美兰或麦康凯平板 厌氧血平板及硫乙醇酸钠培养基或疱肉增菌培养基 观察菌落 涂片、染色镜检 纯培养 生化反应及血清学鉴定 药物敏感性试验 报告结果 作者:肖德慧 时间:2010-5-33