ImageVerifierCode 换一换
格式:DOC , 页数:5 ,大小:45KB ,
资源ID:105404      下载积分:10 积分
快捷下载
登录下载
邮箱/手机:
温馨提示:
快捷下载时,用户名和密码都是您填写的邮箱或者手机号,方便查询和重复下载(系统自动生成)。 如填写123,账号就是123,密码也是123。
特别说明:
请自助下载,系统不会自动发送文件的哦; 如果您已付费,想二次下载,请登录后访问:我的下载记录
支付方式: 支付宝扫码支付 微信扫码支付   
验证码:   换一换

加入VIP,免费下载
 

温馨提示:由于个人手机设置不同,如果发现不能下载,请复制以下地址【https://www.wnwk.com/docdown/105404.html】到电脑端继续下载(重复下载不扣费)。

已注册用户请登录:
账号:
密码:
验证码:   换一换
  忘记密码?
三方登录: QQ登录  

下载须知

1: 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。
2: 试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓。
3: 文件的所有权益归上传用户所有。
4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
5. 本站仅提供交流平台,并不能对任何下载内容负责。
6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

版权提示 | 免责声明

本文(原发性肝癌组织库及数据库的建立.doc)为本站会员(sc****y)主动上传,蜗牛文库仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容本身不做任何修改或编辑。 若此文所含内容侵犯了您的版权或隐私,请立即通知蜗牛文库(发送邮件至admin@wnwk.com或直接QQ联系客服),我们立即给予删除!

原发性肝癌组织库及数据库的建立.doc

1、原发性肝癌组织库及数据库的建立目的:建立原发性肝癌组织库及数据库,通过对肝癌患者的血液、新鲜组织、病理蜡块等标本的收集、保存和研究,对其进行科学的管理和质量控制,为肝癌的基础和临床研究提供宝贵材料,并能为肿瘤患者的个性化治疗和随访提供帮助。材料:肿瘤患者血液样本及肿瘤标本。纳入标准:诊断为原发性肝癌或原发性肝癌转移的患者。患者对血液、样本采集均知情同意,符合医学伦理学标准。排除标准:其他肿瘤转移到肝脏上的患者予以排除。所需试剂及仪器:1. 液氮罐2. -80 超低温冰箱3. 4-20 冰箱4. 离心机 我科均已配置采集前准备:术前一天安排采集标本人员,填写肝癌标本临床资料表(对具有诊断意义的影

2、像学资料进行照相留影存档),请患者或家属签署知情同意书,确认转移式液氮罐充满液氮,消毒灭菌两套手术标本采集器械(手术刀、手术剪、手术镊、不锈钢标尺、锡箔纸、冻存管)。手术当天携带冰盒、转移式液氮罐、标本采集器械、10%福尔马林溶液、照相机、标记好的冻存管(标本库专用标记码)、肝癌标本资料表等,提前入手术室准备好标本采集台,铺无菌手术巾,做好标本采集的准备。1. 血清和血浆的采集及处理:患者按术前、术中、术后当天、术后1 周等不同时间段取血,每次采6 mL1 份3 mL EDTA抗凝,采血后轻轻颠倒混匀3次静置,防止溶血1份3 mL不抗凝,室温静置 2 h,2 000 r/min离心10 min

3、抗凝2 h内分离血浆:2 000 r/min离心10 min。每管100 L分装3 mL N.S+3 mL抗凝静脉血,再加等体积Ficoll分离液至液面上,2 000 r/min离心10 min加样器吸取血清,每管100 L 分装,作蛋白组学分析在界面白膜处吸取淋巴细胞,N.S漂洗3次,沉淀于冻存管上述标本编号、作好标记,在采血后3 h内冻存在-80 冰箱中2. 组织标本的处理和保存:手术结束后在不影响病理诊断取材需要的前提下采集组织样本。整个切取标本的过程应控制在20分钟内。用于提取RNA及蛋白的组织新鲜组织的采集及保存组织标本切成厚度小于0.5 cm小块,放入灭菌的EP管中,迅速放入冰盒生

4、理盐水冲洗2次,取肿瘤组织、癌旁组织(癌组织旁1 cm)、正常组织(癌组织旁35 cm以外或最远处)。将标本切成小块(0.5 cm0.5 cm,厚度1.6,28S和18S条带清晰明亮,且28S亮度强于18S,比值在2左右,则完整性良好。若比值1,则RNA已降解。总蛋白测定浓度后加入5xloading Buffer并在100煮5min变性后放入-20冰箱中保存。总RNA样本利用Fermentas反转录试剂盒逆转录成cDNA入-20冰箱保存剩余RNA样本-80低温冰箱保存。3. 标本的标记和储存3.1 标本分装入冻存管。标记:冻存管编号、患者姓名、住院号、疾病种类、组织部位(或血清、血浆)、标本收

5、集日期、标本入库日期。3.2 冻存管编号由存放位置坐标确定。3.3 数据库的管理。采用EXCEL软件。3.3.1 患者信息录入:包括患者的姓名、性别、年龄、民族、职业、联系方式、随访时间、住院号(如多次住院则详细记录每次住院号)、临床诊断、病史摘要(主要记录有无肝炎、阳性家族史、黄疸、腹水、肝功Child分级等肝癌相关情况)、手术情况(包括手术方式、日期、术中探查所得重要信息、术中出血量等)、病理诊断(病理号)。患者辅助检查信息:检查项目、检查日期、检查结果等。3.3.2 标本信息录入:(A)病理信息:肿瘤体积、组织类型、分级、浸润深度、切缘情况、门脉及肝门淋巴结情况。(B)标本基本信息:入库

6、编号、入库时间、入库类别、病变部位、标本描述(附照片)、标本采集时组织离体时间、收集人、保存方式、初步处理方式。(C)存放位置信息:存放位置坐标。3.3.3 标本使用管理:包括使用登记、标本原始位置、使用单位、使用人、经手人等。3.3.4 标本废除管理:包括废除登记、标本原始位置、废除日期、废除原因、审批人等。标本库的系统管理:标本的采集、保存、使用实行专人管理。管理人员经过专业的培训后,应严格按照标本库制定的各项规章制度进行标准化管理。定期核对,随机取库存标本进行光镜检查、核酸抽提,了解保存质量。病历资料严格按照规范化录入,定期进行统计学的分析。注意事项:1. 组织标本的离体时间对于标本的保存质量至关重要,应在切除后1 h内取材。2. 应尽量避免基因组DNA、RNA和蛋白的降解。特别注意在取材、冻存和复苏过程中,尽量避免RNA酶的污染以及温度变化引起的细胞损伤破裂释放内源性RNA酶。3. 应不定期的抽查标本长期保存后RNA的完整情况。

copyright@ 2008-2023 wnwk.com网站版权所有

经营许可证编号:浙ICP备2024059924号-2