1、内容内容 利用理化因素对微生物的影响进行消利用理化因素对微生物的影响进行消毒灭菌，是防止其污染或传播的重要措施毒灭菌，是防止其污染或传播的重要措施 本节重点与难点本节重点与难点 1.1.掌握消毒、灭菌、无菌、防腐、无菌操作的概念掌握消毒、灭菌、无菌、防腐、无菌操作的概念 2.2.掌握热力灭菌的种类、原理及应用范围掌握热力灭菌的种类、原理及应用范围;湿热与湿热与干热灭菌法的比较；巴氏消毒法干热灭菌法的比较；巴氏消毒法 3.3.掌握紫外线杀菌的原理及特点；滤过除菌的应用掌握紫外线杀菌的原理及特点；滤过除菌的应用 4.4.熟悉影响消毒剂作用的因素熟悉影响消毒剂作用的因素 杀死物体上病原微生物杀死物体
2、上病原微生物,不一定能杀死含不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物芽胞的细菌或非病原微生物 消毒消毒 disinfection 灭菌灭菌 sterilization 无菌无菌 asepsis 防腐防腐 antisepsis 防止或抑制体外细菌生长繁殖防止或抑制体外细菌生长繁殖 不含活菌不含活菌 杀死物体上的所有微生物杀死物体上的所有微生物 无菌操作无菌操作 一、消毒灭菌的常用术语一、消毒灭菌的常用术语 二、物理消毒灭菌法二、物理消毒灭菌法 热力灭菌法热力灭菌法 辐射灭菌法辐射灭菌法 滤过除菌法滤过除菌法 干燥低温抑菌法干燥低温抑菌法 一）热力灭菌法一）热力灭菌法 1.杀菌机制杀菌机制 有干热和
3、湿热两大类灭菌法有干热和湿热两大类灭菌法 损伤机制复杂损伤机制复杂 菌体蛋白凝固变性菌体蛋白凝固变性 同一温度下湿热比干热灭菌效果好同一温度下湿热比干热灭菌效果好 湿热中细菌菌体蛋白较易凝固湿热中细菌菌体蛋白较易凝固 湿热的穿透力比干热大湿热的穿透力比干热大 湿热的蒸汽有潜热湿热的蒸汽有潜热 2.灭菌效果灭菌效果 3.干热灭菌法干热灭菌法 焚烧焚烧：直接点燃物品或将其置于焚烧炉内，最彻：直接点燃物品或将其置于焚烧炉内，最彻 底的灭菌法，适用于废弃物品或动物尸体灭菌底的灭菌法，适用于废弃物品或动物尸体灭菌 烧灼烧灼：直接用火焰灭菌，适用于接种环或试管口灭菌：直接用火焰灭菌，适用于接种环或试管口灭
4、菌 干烤干烤：利用干烤箱，加热：利用干烤箱，加热160160-180 2180 2小时，适用小时，适用 于高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品于高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品 红外线红外线：利用电磁波的热效应灭菌，其热效应只：利用电磁波的热效应灭菌，其热效应只 在照射表面产生。多用于医疗器械灭菌在照射表面产生。多用于医疗器械灭菌 微波微波：利用高频电磁波的热效应灭菌，其热效应：利用高频电磁波的热效应灭菌，其热效应 有一定穿透性。用于食品、药品、非金属有一定穿透性。用于食品、药品、非金属 器械及其他物品灭菌器械及其他物品灭菌 巴氏消毒法巴氏消毒法：用：用较低温度杀灭液体中的特定微生较低温度杀灭
5、液体中的特定微生 物物,用于牛奶、啤酒等消毒用于牛奶、啤酒等消毒 4.湿热灭菌法湿热灭菌法 煮沸消毒法煮沸消毒法：100100水煮水煮5min5min-2hr,2hr,用于餐具和小手用于餐具和小手 术刀剪的消毒术刀剪的消毒 61.161.1-62.8 3062.8 30分分 71.7 3071.7 30秒秒 高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法 医学上最常用、最有效的灭菌方医学上最常用、最有效的灭菌方法，灭菌温度取决于蒸汽压力。法，灭菌温度取决于蒸汽压力。利用高压蒸锅，在利用高压蒸锅，在103.4kPa103.4kPa蒸汽蒸汽 下，温度达下，温度达121.3121.3维持维持1515-20min20m
6、in，杀死包括芽胞在内的所有微生物。杀死包括芽胞在内的所有微生物。用于耐高温、耐潮湿物品的灭菌用于耐高温、耐潮湿物品的灭菌 流通蒸汽消毒法流通蒸汽消毒法：利用利用100 100 水蒸汽，经水蒸汽，经1515-30min30min 杀死繁殖体，不能将芽胞全杀死杀死繁殖体，不能将芽胞全杀死 间歇蒸汽灭菌法间歇蒸汽灭菌法：反复多次流通蒸汽间歇加热以达反复多次流通蒸汽间歇加热以达 到灭菌目的。适用于不耐高温的到灭菌目的。适用于不耐高温的 含糖、牛奶等培养基的灭菌含糖、牛奶等培养基的灭菌 波长波长200200-300nm300nm的紫外线能干扰细菌的紫外线能干扰细菌DNADNA的复制与的复制与 转录而杀
7、菌转录而杀菌 二）辐射杀菌法二）辐射杀菌法 1.紫外线紫外线 穿透力较弱，常用于穿透力较弱，常用于空气及物品表面消毒空气及物品表面消毒 损伤人体皮肤黏膜，注意自我防护损伤人体皮肤黏膜，注意自我防护 DNA损伤的修复损伤的修复 2.电离辐射电离辐射 包括高速电子、包括高速电子、X X射线和射线和 射线射线 有较高的能量和穿透力有较高的能量和穿透力 干扰干扰DNADNA合成，破坏细胞膜合成，破坏细胞膜 大量一次性医用塑料制品大量一次性医用塑料制品 食品、药品、生物制品食品、药品、生物制品 利用滤菌器的机械性阻挡，除去液体或利用滤菌器的机械性阻挡，除去液体或 空气中的细菌空气中的细菌 主要用于血清、
8、毒素、抗生素、酶制剂主要用于血清、毒素、抗生素、酶制剂 等不耐热的液体及空气等的灭菌等不耐热的液体及空气等的灭菌 三）滤过除菌法三）滤过除菌法 1.滤菌器滤菌器 硝基纤维素膜制成，孔径硝基纤维素膜制成，孔径0.10.1-0.450.45m 滤膜滤器滤膜滤器 玻璃滤器玻璃滤器 SeitzSeitz滤器滤器 玻璃细砂压成滤板，镶嵌在玻璃漏斗中玻璃细砂压成滤板，镶嵌在玻璃漏斗中 金属制成，中间嵌石棉滤板金属制成，中间嵌石棉滤板 2.影响过滤的因素影响过滤的因素 介质类型介质类型 细菌种类细菌种类 细菌数量细菌数量 使用压力、过滤时间、室温等使用压力、过滤时间、室温等 3.生物洁净技术（生物洁净技术（
9、HEPA）初、中、高三级高效分子空气过滤器，除去初、中、高三级高效分子空气过滤器，除去0.50.5-5m5m的尘埃，并采用合理气流方式以洁净空气的尘埃，并采用合理气流方式以洁净空气 生物洁净室装有高效或亚高效过滤系统，如无生物洁净室装有高效或亚高效过滤系统，如无菌护理室，无菌手术间等菌护理室，无菌手术间等 低温状态下真空抽去水分低温状态下真空抽去水分 主要用于菌种保藏主要用于菌种保藏 可存数年到数十年可存数年到数十年 四）干燥与低温抑菌法四）干燥与低温抑菌法 冷冻真空干燥法冷冻真空干燥法 一）杀菌机制一）杀菌机制 使菌体蛋白凝固变性使菌体蛋白凝固变性 改变细胞膜通透性，使胞内含物逸出改变细胞膜
10、通透性，使胞内含物逸出 干扰细菌的酶系统及代谢干扰细菌的酶系统及代谢 如酚类、醇类、酸碱类等如酚类、醇类、酸碱类等 如表面活性剂、脂溶剂等如表面活性剂、脂溶剂等 如重金属类、某些氧化剂等如重金属类、某些氧化剂等 三、化学消毒灭菌法三、化学消毒灭菌法 二）常用消毒剂种类二）常用消毒剂种类 1.1.醇类醇类 除去细胞膜中脂质，使菌体蛋白变性除去细胞膜中脂质，使菌体蛋白变性 乙醇乙醇、异丙醇、异丙醇 2.2.酚类酚类 低浓度破坏细胞膜，高浓度凝固菌体蛋白低浓度破坏细胞膜，高浓度凝固菌体蛋白 石碳酸、来苏、氯已定等石碳酸、来苏、氯已定等 3.3.重金属类重金属类 使菌体蛋白变性或沉淀；灭活细菌酶蛋白使
11、菌体蛋白变性或沉淀；灭活细菌酶蛋白 红汞、硫柳汞、硝酸银等红汞、硫柳汞、硝酸银等 4.4.氧化剂氧化剂 依靠氧化作用灭活细菌酶蛋白依靠氧化作用灭活细菌酶蛋白 过氧化氢、过氧乙酸、高锰酸钾、卤素等过氧化氢、过氧乙酸、高锰酸钾、卤素等 5.5.表面活性剂表面活性剂 降低液体表面张力，乳化油脂，发挥清洁作用降低液体表面张力，乳化油脂，发挥清洁作用 改变胞壁通透性，使胞内容物溢出，呈现灭菌作用改变胞壁通透性，使胞内容物溢出，呈现灭菌作用 苯扎溴安、度米芬等苯扎溴安、度米芬等 6.6.烷化剂烷化剂 灭活细菌酶蛋白灭活细菌酶蛋白 甲烷、戊二醛、甲烷、戊二醛、环氧乙烷环氧乙烷等等 三）按杀菌能力分类三）按杀
12、菌能力分类 高效消毒剂高效消毒剂 中效消毒剂中效消毒剂 低效消毒剂低效消毒剂 用于进体内的物品，包括氧化剂、醛类、环氧乙烷等用于进体内的物品，包括氧化剂、醛类、环氧乙烷等 用于进入腔道的器材，包括含碘消毒剂、醇类等用于进入腔道的器材，包括含碘消毒剂、醇类等 用于体表及外环境，包括表面活性剂、高锰酸钾等用于体表及外环境，包括表面活性剂、高锰酸钾等 四）消毒剂的应用四）消毒剂的应用 消毒剂消毒剂 常用浓度常用浓度 适用范围适用范围 含氯消毒剂含氯消毒剂 有效氯量有效氯量2 2-5mg/L5mg/L 饮水饮水 过氧乙酸过氧乙酸 0.2%0.2%-0.5%0.5%皮肤、物体表面、空气皮肤、物体表面、空
13、气 戊二醛戊二醛 2%2%医疗器械医疗器械 碘酒碘酒 2.5%2.5%皮肤、黏膜、物体表面皮肤、黏膜、物体表面 碘伏碘伏 2%2%皮肤、黏膜、物体表面皮肤、黏膜、物体表面 乙醇乙醇 75%75%医疗器械、皮肤医疗器械、皮肤 新洁尔灭新洁尔灭 0.4%0.4%-1.6%1.6%皮肤、黏膜、物体表面皮肤、黏膜、物体表面 高锰酸钾高锰酸钾 0.1%0.1%皮肤、黏膜、食具、蔬菜等皮肤、黏膜、食具、蔬菜等 1.医疗器械物品的消毒灭菌医疗器械物品的消毒灭菌 物品类型物品类型 消毒灭菌方法消毒灭菌方法 高危器械物品高危器械物品 针头、注射器、手术器械、注射液针头、注射器、手术器械、注射液体、静脉导管等体、
14、静脉导管等 高压蒸汽灭菌；环氧乙烷、高压蒸汽灭菌；环氧乙烷、戊二醛等高效消毒剂戊二醛等高效消毒剂 中危器械物品中危器械物品 呼吸机、麻醉机、胃镜、支气管镜、呼吸机、麻醉机、胃镜、支气管镜、体温计、口腔器械等体温计、口腔器械等 流通蒸汽、煮沸消毒；过氧流通蒸汽、煮沸消毒；过氧乙酸、醇类、戊二醛浸泡乙酸、醇类、戊二醛浸泡 低危器械物品低危器械物品 治疗盘、治疗车、食品器皿等治疗盘、治疗车、食品器皿等 清洗后一般消毒即可清洗后一般消毒即可 快速周转物品快速周转物品 纤维内镜、牙钻、牙科手术器械等纤维内镜、牙钻、牙科手术器械等 瞬时灭菌、微波灭菌、高效瞬时灭菌、微波灭菌、高效消毒剂快速处理等消毒剂快速
15、处理等 2.室内空气消毒灭菌室内空气消毒灭菌 紫外线照射，滤过除菌紫外线照射，滤过除菌 过氧乙酸、过氧化氢、二氧化氯喷雾或熏蒸过氧乙酸、过氧化氢、二氧化氯喷雾或熏蒸 中草药（艾叶）烟熏中草药（艾叶）烟熏 3.手和皮肤消毒手和皮肤消毒 肥皂和流动水正确洗手肥皂和流动水正确洗手 75%75%乙醇，乙醇，0.05%0.05%氯已定、过氧乙酸水溶液等氯已定、过氧乙酸水溶液等 4.粘膜消毒粘膜消毒 口腔黏膜可用口腔黏膜可用3%3%过氧化氢过氧化氢 尿道、阴道冲洗可用尿道、阴道冲洗可用0.05%0.05%氯已定，氯已定，1g/L1g/L高锰酸钾高锰酸钾 5.排泄物及分泌物消毒排泄物及分泌物消毒 50g/L
16、50g/L有效氯的次氯酸钠、漂白粉等作用有效氯的次氯酸钠、漂白粉等作用1h1h 等量等量200g/L200g/L漂白粉搅拌混匀作用漂白粉搅拌混匀作用2h2h 五）影响消毒剂作用的因素五）影响消毒剂作用的因素 消毒剂消毒剂 细菌细菌 环境环境 种类种类 浓度浓度 作用时间作用时间 数量数量 种类种类 有机物有机物 温度温度 酸硷度酸硷度 感染细菌等微生物的病毒，感染细菌等微生物的病毒，具有严格具有严格 的宿主特异性，的宿主特异性，也是赋予宿主菌生物学性也是赋予宿主菌生物学性 状的遗传物质。状的遗传物质。据其感染微生物的后果分为：毒性据其感染微生物的后果分为：毒性噬菌体和温和噬菌体噬菌体和温和噬菌体 本章重点与难点本章重点与难点 1.1.掌握噬菌体、毒性掌握噬菌体、毒性/温和噬菌体的概念温和噬菌体的概念 2.2.掌握温和噬菌体与宿主菌的关系及其在细菌遗传掌握温和噬菌体与宿主菌的关系及其在细菌遗传物质转移中的意义物质转移中的意义 3.3.掌握毒性噬菌体的生活周期掌握毒性噬菌体的生活周期 4.4.熟悉噬菌体的生物学特性及噬菌体的应用熟悉噬菌体的生物学特性及噬菌体的应用 第一节第一节 噬菌体的生