1、1.1.红细胞形态检查：红细胞形态检查：方法方法、正常及常见异常红细胞形态正常及常见异常红细胞形态。2.2.血细胞比容测定：血细胞比容测定：概念、测定方法、概念、测定方法、参考值及临床意义。参考值及临床意义。3.3.网织红细胞计数：网织红细胞计数：概念、计数方法、参考值及临床意义。概念、计数方法、参考值及临床意义。先低倍镜：先低倍镜：再用油镜：再用油镜：制备血涂片制备血涂片 染色染色 镜检镜检 检查区域：检查区域：体尾交界处，细胞分布均匀，体尾交界处，细胞分布均匀，红细胞紧密排列但不重叠。红细胞紧密排列但不重叠。估计细胞分布和染色情况，浏估计细胞分布和染色情况，浏览全片是否存在异常细胞。览全片
2、是否存在异常细胞。观察红细胞形态。观察红细胞形态。1.1.正常形态正常形态 2.2.大小异常大小异常 3.3.染色异常染色异常 4.4.形态异常形态异常 5.5.结构异常结构异常 双凹圆盘形双凹圆盘形，细胞大小相似细胞大小相似，平均直径平均直径7.27.2m(6m(69.5m)9.5m)，厚约厚约2 2mm；瑞氏染瑞氏染色后呈淡粉红色，中央色后呈淡粉红色，中央1/31/3为生理性淡为生理性淡染区；无核，胞质内无异常结构。染区；无核，胞质内无异常结构。红细胞大小不均红细胞大小不均(anisocytosis)anisocytosis)小红细胞小红细胞(microcyte)microcyte)：大红
3、细胞大红细胞(macrocyte)macrocyte)：巨红细胞巨红细胞(megalocyte)megalocyte)：直径小于直径小于6 6mm 直径大于直径大于1010mm 直径大于直径大于1515mm 正常红细胞正常红细胞 巨红细胞巨红细胞 小红细胞小红细胞 正色素性正色素性(normochromic)normochromic)低色素性低色素性 (hypochromic)hypochromic)高色素性高色素性 (hyperchromic)hyperchromic)嗜多色性嗜多色性 (polychromatic)polychromatic)球形红细胞球形红细胞 椭圆形红细胞椭圆形红细胞
4、靶形红细胞靶形红细胞 镰状红细胞镰状红细胞 口形红细胞口形红细胞 棘状红细胞棘状红细胞 半月形红细胞半月形红细胞 泪滴形红细胞泪滴形红细胞 染色质小体染色质小体 (Howell(HowellJolly body)Jolly body)卡波环卡波环 (Cabot ring)(Cabot ring)嗜碱性点彩红细胞嗜碱性点彩红细胞 (basophilic stippling cell)basophilic stippling cell)有核红细胞有核红细胞 (nucleated erythrocyte)nucleated erythrocyte)红细胞在全血标本中所占体积的比值。红细胞在全血标本中
5、所占体积的比值。一一.概念概念 二二.常规测定方法常规测定方法 WintrobeWintrobe法法 微量离心法微量离心法 红细胞间残留血浆较多，红细胞间残留血浆较多，故结果偏高。故结果偏高。快速快速,用血少用血少,残留血浆较少残留血浆较少。(首选常规方法首选常规方法)hematocrit,Hct,Ht,HCT(血液分析仪法血液分析仪法)packed cell volume,PCV(离心法离心法)（一）原理（一）原理 （二）试剂（二）试剂 （三）器材（三）器材 干燥干燥EDTAEDTA-K K2 2 或或 肝素钠肝素钠 WintrobeWintrobe管管（温氏管温氏管）离心机离心机 (温氏法
6、温氏法)温氏管温氏管 1.1.静脉血静脉血2 2mlml加入抗凝瓶中，加入抗凝瓶中，充分混匀。充分混匀。（四）方法（四）方法 2.2.吸取抗凝血插入温氏管底部，将血注入吸取抗凝血插入温氏管底部，将血注入 至刻度至刻度“1010”处，塞紧瓶口。处，塞紧瓶口。3.3.相对离心力相对离心力22642264g g，离心离心3030 minmin，读数，读数，再以同样速度离心再以同样速度离心1010 minmin，至红细胞层至红细胞层 高度不再下降为止。高度不再下降为止。4.4.读出红细胞层柱高的毫米数，乘以读出红细胞层柱高的毫米数，乘以0.010.01，即为血细胞比容测定值。即为血细胞比容测定值。(温
7、氏法温氏法)离心后血液被分为离心后血液被分为5 5层：层：血浆层血浆层 血小板层血小板层 白细胞和有核白细胞和有核RBCRBC层层 还原红细胞层还原红细胞层 带氧红细胞层带氧红细胞层 读数层读数层(温氏法温氏法)1.1.所用器材必须清洁干燥所用器材必须清洁干燥。(防溶血防溶血)（五）注意事项（五）注意事项 2.2.不能使用改变不能使用改变RBCRBC体积的抗凝剂。体积的抗凝剂。3.3.抗凝血应塞瓶口，防血浆蒸发。抗凝血应塞瓶口，防血浆蒸发。4.4.离心的条件必须恒定。离心的条件必须恒定。(温氏法温氏法)5.5.标本溶血或红细胞形态异常需注明。标本溶血或红细胞形态异常需注明。三三.参考值参考值
8、WintrobeWintrobe法：男法：男 0.400.400.54 0.54 女女 0.370.370.470.47 微量法：男微量法：男 0.470.470.040.04 女女 0.420.420.050.05 四四.临床意义临床意义 1.1.与与RBCRBC测定的临床意义相似测定的临床意义相似。2.2.全血粘度的主要因素之一。全血粘度的主要因素之一。HctHct增高可致全血粘度增加。增高可致全血粘度增加。3.3.用于红细胞平均值的计算。用于红细胞平均值的计算。原红原红 早幼红早幼红 中幼红中幼红 晚幼红晚幼红 网织红网织红 红细胞红细胞 RetRet是晚幼红脱核后到完全成熟红细胞是晚幼
9、红脱核后到完全成熟红细胞间的间的过渡细胞过渡细胞，因其胞浆内残存，因其胞浆内残存嗜碱性嗜碱性物质物质，经煌焦油蓝或新亚甲蓝等经煌焦油蓝或新亚甲蓝等活体染活体染色色，呈蓝色的网状或颗粒状结构。，呈蓝色的网状或颗粒状结构。(reticulocyte,Ret,RET)(reticulocyte,Ret,RET)型：丝球型型：丝球型 外周血中无外周血中无 型：网型型：网型 外周血少见外周血少见 型：破网型型：破网型 外周血可见外周血可见 型：点粒型型：点粒型 外周血多见外周血多见 一一.试剂试剂 5 5g/Lg/L新亚甲蓝新亚甲蓝N N溶液溶液 1010g/Lg/L煌焦油蓝生理盐水溶液煌焦油蓝生理盐水
10、溶液(试管法试管法)1010g/Lg/L煌焦油蓝乙醇溶液（玻片法）煌焦油蓝乙醇溶液（玻片法）二二.方法方法 玻片法玻片法 试管法试管法 1.1.染液染液1 1滴置玻片一端，自然干燥备用。滴置玻片一端，自然干燥备用。2.2.取血取血1 1滴至干燥的染料上，用推片角混滴至干燥的染料上，用推片角混 匀，将两玻片粘合。匀，将两玻片粘合。3.3.5 51010 minmin后，推血片。后，推血片。方法评价：方法评价：水分易蒸发，故不易涂片；水分易蒸发，故不易涂片；染色时间短，结果偏低。染色时间短，结果偏低。4.4.油镜下计数至少油镜下计数至少10001000个个RBCRBC中的中的RetRet数。数。1
11、.1.染液染液2 2滴加入小试管，加血滴加入小试管，加血2 2滴，混匀。滴，混匀。2.2.室温下染色室温下染色15152020 minmin。3.3.混匀，取混匀，取1 1小滴制薄血片，干后计数。小滴制薄血片，干后计数。方法评价：方法评价：水分不易蒸发；染色时间长；水分不易蒸发；染色时间长；可重复推片复查。可重复推片复查。(手工法的推荐方法手工法的推荐方法)三三.注意事项注意事项 1.1.玻片法中，应待玻片上煌焦油蓝乙玻片法中，应待玻片上煌焦油蓝乙 醇液中乙醇完全挥发后才能加血。醇液中乙醇完全挥发后才能加血。2.2.染色时间必须充分。染色时间必须充分。3.3.计数区域一般选择红细胞分布均匀计数
12、区域一般选择红细胞分布均匀 的部位，兼顾边缘和尾部。的部位，兼顾边缘和尾部。4.4.试管法染液与血液以试管法染液与血液以1 1：1 1为宜。为宜。A B MillerMiller窥盘窥盘 (置于目镜中置于目镜中)计数小正方形中的红细胞数计数小正方形中的红细胞数，计计 数大正方形中的网织红细胞数。数大正方形中的网织红细胞数。Ret%Ret%100100 A A格内的格内的RBCRBC数数9 9 B B格内的格内的RetRet数数 前提：前提：红细胞散在且均匀分布红细胞散在且均匀分布 作用：作用：提高计数的速度和精度提高计数的速度和精度 相对值：成人：相对值：成人：0.0050.0050.015
13、0.015 新生儿：新生儿：0.020.020.060.06 绝对值：成人：绝对值：成人：(242484)84)10109 9/L/L 1.1.判断骨髓红细胞造血情况判断骨髓红细胞造血情况 2.2.作为贫血疗效观察的指标作为贫血疗效观察的指标 减低减低:表明骨髓造血功能减低。表明骨髓造血功能减低。常见于再生障碍性贫血。常见于再生障碍性贫血。增高增高:表明骨髓红细胞生成旺盛。表明骨髓红细胞生成旺盛。常见于溶贫和急性大失血后。常见于溶贫和急性大失血后。网织红细胞相对值能准确客观地网织红细胞相对值能准确客观地反映网织红细胞的生成速度吗？反映网织红细胞的生成速度吗？网织红细胞绝对值网织红细胞绝对值 网
14、织红细胞百分率红细胞数网织红细胞百分率红细胞数/L L 网织红细胞生成指数网织红细胞生成指数(reticulocyte production index,RPI)RPIRPI Ret%Ret%100100 被测被测HctHct 正常人正常人HctHct 1 1 RetRet成熟天数成熟天数 （代表（代表Ret生成的相对速度）生成的相对速度）1.1.红细胞的形态异常包括哪些方面？红细胞的形态异常包括哪些方面？2.2.什么是网织红细胞？它有些什么形态？什么是网织红细胞？它有些什么形态？3.3.选择题：选择题：（1 1）以下哪项不属于微量高速离心法测）以下哪项不属于微量高速离心法测 定血细胞比容的优
15、点定血细胞比容的优点 A A、用血量少用血量少 B B、测定时间短测定时间短 C C、效率高效率高 D D、无血浆残留无血浆残留 E E、准确度较高准确度较高 （2 2）下列网织红细胞的概念，哪项是错误的）下列网织红细胞的概念，哪项是错误的 A A、是介于晚幼红与成熟红细胞之间的尚未是介于晚幼红与成熟红细胞之间的尚未 完全成熟的红细胞完全成熟的红细胞 B B、其胞浆经瑞氏染色后可见蓝色网状结构其胞浆经瑞氏染色后可见蓝色网状结构 C C、通常比红细胞稍大通常比红细胞稍大 D D、在骨髓中的数量比外周血高在骨髓中的数量比外周血高 E E、通常以网织红细胞的百分率表示通常以网织红细胞的百分率表示 （3 3）不属于红细胞异常结构的是不属于红细胞异常结构的是 A A、染色质小体染色质小体 B B、杜勒体杜勒体 C C、卡波环卡波环 D D、嗜碱性点彩红细胞嗜碱性点彩红细胞 E E、有核红细胞有核红细胞