1、仿制药分析方法的验证和药品仿制药分析方法的验证和药品稳定性的研究稳定性的研究 谭海松谭海松 PhD Nov 27,2011 主要内容主要内容 仿制药的仿制药的GMP要求要求 仿制药分析方法的验证仿制药分析方法的验证 仿制药稳定性的研究仿制药稳定性的研究 FDAFDA官员来制药公司检查时的留言官员来制药公司检查时的留言 我们并不期望在检查过程中所有事我们并不期望在检查过程中所有事情都是完美无缺的情都是完美无缺的,但是我们的确但是我们的确希望所检查到的东西全在你们的希望所检查到的东西全在你们的有有效控制效控制之中之中.药检局对仿制药的要求药检局对仿制药的要求 仿制药品系指仿制国家已批准正式生产仿制
2、药品系指仿制国家已批准正式生产并收载于国家药品标准的品种并收载于国家药品标准的品种.仿制药与被仿制药应具有相同的剂型仿制药与被仿制药应具有相同的剂型,剂量剂量,质量质量,用途用途,用法用法,效果和安全度效果和安全度.仿制药的质量控制仿制药的质量控制 药品测试药品测试 分析方法分析方法 分析方法验证分析方法验证 科学性科学性 (理论正确理论正确)药品药品质量质量 可靠性可靠性 (避免人为和仪器误差避免人为和仪器误差)准确性准确性 (正确反映真实值正确反映真实值)分析方法分析方法验证的前提验证的前提:GMP:GMP标准标准 标准物和试剂标准物和试剂 仪器仪器 操作人员操作人员 分析方法验证分析方法
3、验证 标准作业程序标准作业程序 (SOP)(SOP)实验室实验室 标准物和试剂标准物和试剂的的SOPSOP要求要求 包装上注明生产厂家包装上注明生产厂家,批号和有效期批号和有效期 如生产厂家没有提供有效期如生产厂家没有提供有效期,SOP要规要规定有效期定有效期 实验记录要有所用到的实验记录要有所用到的标准物和试剂的标准物和试剂的生产厂家生产厂家,批号和有效期批号和有效期 分析仪器分析仪器的的SOPSOP要求要求 所有分析所有分析仪器都要仪器都要有使用记录有使用记录 分析分析仪器在使用前要用仪器在使用前要用标准物校准标准物校准 分析分析仪器仪器每半年进行一次每半年进行一次仪器仪器校准校准 HPL
4、C在使用前用标准物校准举例在使用前用标准物校准举例 溶剂空白溶剂空白 定量限或分离效率检查定量限或分离效率检查 标准物溶液标准物溶液-1(注射注射3次次)标准物溶液标准物溶液-2(注射注射3次次)样品溶液样品溶液(每隔每隔10个样品注射标准物溶液个样品注射标准物溶液-1,2).标准物溶液标准物溶液-1 标准物溶液标准物溶液-2 定量限或分离效率检查定量限或分离效率检查 溶剂空白溶剂空白 实验室的实验室的SOPSOP要求要求 所有仪器都要有所有仪器都要有校准日期或相应的注释校准日期或相应的注释 所有样品和所有样品和溶液溶液都要有批号都要有批号,有效期和有效期和来源来源 实验室中的工作人员要有必要
5、的安全防实验室中的工作人员要有必要的安全防护护 实验室要保持整洁实验室要保持整洁 工作人员工作人员的的SOPSOP要求要求 每个工作人员都要每个工作人员都要有相关有相关SOP的培训培训记录记录 工作人员工作人员每年至少参加一次每年至少参加一次GMP培训培训 主要内容主要内容 仿制药的GMP要求 仿制药分析方法的验证仿制药分析方法的验证 仿制药稳定性的研究 仿制药的研发过程仿制药的研发过程 找到原料药找到原料药 稳定性的研究稳定性的研究 专利保护将失效或专利保护将失效或专利挑战专利挑战 生物等效性临床试验生物等效性临床试验 简化新药简化新药(ANDA)申请申请 分析方法的研究和验证分析方法的研究
6、和验证 配方和生产工艺的研究配方和生产工艺的研究 成品药片分析样品的制备实例成品药片分析样品的制备实例 把把10片药品放于片药品放于500毫升容量瓶中毫升容量瓶中,加入加入400毫升溶剂毫升溶剂,以以200rpm摇摇30分钟分钟,然后加入溶剂然后加入溶剂到刻度到刻度.摇匀后摇匀后,以以8,000rpm高速离心高速离心10分钟分钟,取上清液用取上清液用高压液相色谱高压液相色谱(HPLC)(HPLC)进行进行分析分析.分析方法的验证分析方法的验证 API全部溶于溶剂全部溶于溶剂 HPLC正确分析出样品溶液的浓度正确分析出样品溶液的浓度 分析结果的可靠性分析结果的可靠性 分析方法验证的内容分析方法验
7、证的内容 API全部溶于溶剂全部溶于溶剂 准确度准确度,精密度精密度 正确分析出样品溶液的浓度正确分析出样品溶液的浓度 专属性专属性,线性线性,范围范围,检测限检测限,定量限定量限 分析结果可靠性分析结果可靠性 耐用性耐用性,精密度精密度 分析方法验证内容分析方法验证内容 专属性专属性 线性线性 准确度准确度 精密度精密度 范围范围 检测限检测限,定量限定量限 耐用性耐用性 样品溶液稳定性样品溶液稳定性 分析方法验证分析方法验证-专属性专属性 专属性的定义专属性的定义 在其它成分可能存在下在其它成分可能存在下,分析方法能够正确检分析方法能够正确检测出被分析物的特性测出被分析物的特性.专属性的测
8、定举例专属性的测定举例:高压液相色谱高压液相色谱 高压液相色谱的系统适用性高压液相色谱的系统适用性 色谱峰的容量因子色谱峰的容量因子:1k20:1k=1.5:R=1.5 色谱峰的拖尾系数色谱峰的拖尾系数:T2.0:T=99.9%(LC/MS,:=99.9%(LC/MS,DAD,UV)DAD,UV)高压液相色谱的系统适用性高压液相色谱的系统适用性 色谱峰的容量因子色谱峰的容量因子:k=t/tM-1 色谱峰分辨率色谱峰分辨率:R=2(t2-t1)/(W1+W2)高压液相色谱的系统适用性高压液相色谱的系统适用性 色谱峰的拖尾系数色谱峰的拖尾系数:T=W0.05/(2f)高压液相色谱的系统适用性高压液
9、相色谱的系统适用性 色谱峰分辨率色谱峰分辨率:2.0 色谱峰的拖尾系数色谱峰的拖尾系数:1.0 AU0.0000.0050.0100.0150.0200.0250.0300.0350.0400.0450.0500.0550.060Minutes8.509.009.5010.0010.5011.0011.5012.0012.5013.0013.5014.00Peak 1-11.655Peak 2-11.923分析方法验证分析方法验证-线性线性 线性的定义线性的定义 在测定范围内在测定范围内,检测结果与被分析物浓检测结果与被分析物浓度呈线性关系的程度度呈线性关系的程度.线性的测定线性的测定 在被分
10、析物浓度在被分析物浓度20%20%-150%150%内内,至少测至少测5 5个个浓度浓度.例如例如20%,80%,100%,120%,150%20%,80%,100%,120%,150%最小二乘法线性回归最小二乘法线性回归,R=0.999,R=0.999 线性举例线性举例-HPLC Linearityy=31253x-185.39R2=10100000200000300000400000500000600000700000800000900000051015202530Conc.(ug/mL)Peak AreaPeak AreaLinear(Peak Area)线性举例线性举例-HPLC Wa
11、ters 2690 02000000400000060000008000000100000000510152025Inj.VolumePeak AreaAgilent 1100 with UV/VIS010000002000000300000040000005000000010203040Inj.VolumePeak Area分析方法验证分析方法验证-准确度准确度 准确度的定义准确度的定义 测定结果与真实值之间的接近程度测定结果与真实值之间的接近程度.向向制剂中加入已知量的被测物进行回收率制剂中加入已知量的被测物进行回收率测定来验证测定来验证.准确度的测定准确度的测定 在在3 3个浓度个浓度(
12、80%,100%,120%)(80%,100%,120%)中中,每个浓每个浓度制备度制备3 3个样品个样品.每个浓度每个浓度3 3个样品的平个样品的平均均回收率必须在回收率必须在9898-102%.102%.分析方法验证分析方法验证-精密度精密度 精密度的定义精密度的定义 同一样品多次取样测试结果的接近程度同一样品多次取样测试结果的接近程度 精密度的测定精密度的测定:%RSD=2%(6:%RSD=2%(6个样品个样品)重复性重复性:同一分析人所得结果的精密度同一分析人所得结果的精密度 中间精密度中间精密度:同一实验室同一实验室,不同的日期不同的日期,设设备和人员所得结果的精密度备和人员所得结果
13、的精密度 重现性重现性:不同实验室不同实验室,不同人员所得结果的不同人员所得结果的精密度精密度 分析方法验证分析方法验证-范围范围 范围的定义范围的定义 分析药品达到一定准确分析药品达到一定准确度度,精密精密度度和线和线性的区间性的区间.范围的要求范围的要求 含量测定含量测定:80:80-120%120%含量均匀度测定含量均匀度测定:70:70-130%130%溶出度溶出度:50:50-150%150%杂质测定杂质测定:规定限度规定限度20%20%分析方法验证分析方法验证-检测限和定量限检测限和定量限 检测限检测限:试样中被分析物能被检测到的试样中被分析物能被检测到的最低量最低量,一般定义为信
14、噪比大于一般定义为信噪比大于3:1 定量限定量限:试样中被分析物能被定量测定试样中被分析物能被定量测定的最低量的最低量,一般定义为信噪比大于一般定义为信噪比大于10:1 检测限和定量限信噪比的测量检测限和定量限信噪比的测量 分析方法验证分析方法验证-耐用性耐用性 耐用性耐用性的定义的定义 测定条件发生小的变动时测定条件发生小的变动时,测定结果不测定结果不受影响的承受程度受影响的承受程度 耐用性耐用性测定的举例测定的举例:高压液相色谱高压液相色谱 流动相流动相:组成组成,pH值值,流速的变动流速的变动 色谱柱色谱柱:厂家厂家,批号批号,柱温的变动柱温的变动 分析方法验证分析方法验证-样品溶液稳定
15、性样品溶液稳定性 样品溶液稳定性样品溶液稳定性的定义的定义 样品溶液在一定储藏条件下可被重复使样品溶液在一定储藏条件下可被重复使用的时间用的时间 样品溶液稳定性样品溶液稳定性的测定的测定 样品溶液稳定性样品溶液稳定性测定结果是初始结果测定结果是初始结果98.598.5-101.5101.5%.%.仿制药分析方法的来源仿制药分析方法的来源 中国药典 美国药典（USP）欧洲药典（EP）日本药典（JP）原料药厂家 文献 分析方法验证的参考文献分析方法验证的参考文献 ICH Q2-Validation of Analytical Procedures 美国药典（USP）主要内容主要内容 仿制药的GMP
16、要求 仿制药分析方法的验证 仿制药稳定性的研究仿制药稳定性的研究 稳定性测试目的稳定性测试目的 考察原料药或制剂的性质在温度考察原料药或制剂的性质在温度,湿度湿度,光线等条件的影响下随时间变化的规律光线等条件的影响下随时间变化的规律.为药品的生产、包装、贮存、运输条件为药品的生产、包装、贮存、运输条件和有效期的确定提供科学依据和有效期的确定提供科学依据,以保证以保证临床用药安全有效临床用药安全有效.稳定性测试的趋势稳定性测试的趋势 包括更多的贮藏条件以使临床实验可在包括更多的贮藏条件以使临床实验可在不同国家进行不同国家进行 提早开始稳定性研究来附和不同国家药提早开始稳定性研究来附和不同国家药检局的要求检局的要求 稳定性测试稳定性测试需要控制的条件需要控制的条件 测试内容和标准测试内容和标准 贮贮存条件存条件 测试频率测试频率 测试完成时间测试完成时间 原料药的原料药的测试内容和标准测试内容和标准 外观变化外观变化:颜色颜色 物理性质变化物理性质变化:晶型晶型,熔点熔点,热失热失重重,水含量水含量 主要成分含量主要成分含量:97-103%杂质含量：杂质含量：0.15%仿制药对原料药的要求