1、第 1 页 乙肝、乙肝、HIV、梅毒实验室检验技术、梅毒实验室检验技术 甘肃省妇幼保健院 临床检验中心：赵翠生 第 2 页 综合产前检查服务综合产前检查服务+检测检测 孕产妇参加产前检查服务 检测前信息 HBV 检测 梅毒检测 HIV检测 全血细胞计数和其它检测 取血样 2 第 3 页 梅毒的实验室检测梅毒的实验室检测 3 第 4 页 梅毒梅毒 病原体为梅毒螺旋体，属于密螺旋体属，苍白密螺旋体苍白亚种(Treponema pallidum subspecies pallidum)苍白亚种 梅毒 苍白螺旋体 地方亚种 地方性梅毒 极细亚种 雅司病 密螺旋体属 品他螺旋体 品他病 第 5 页 梅毒
2、血清学试验基本实验室设备梅毒血清学试验基本实验室设备 检方法检方法 检测样本类型检测样本类型 必要设备必要设备 血清血清 血浆血浆 全血全血 RPR/TRUSTRPR/TRUST 水平旋转仪 TPPATPPA 震荡仪 ELISAELISA 酶标仪、洗板机 POCTPOCT检测检测 无需特殊设备 5 第 6 页 筛查时间筛查时间 梅毒梅毒 检测方法检测方法 非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验（RPRRPR或TRUSTTRUST检测）梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验（TPPATPPA、ELISAELISA或梅毒快速检测或梅毒快速检测）检测时间检测时间 第一次产检（
3、孕早期）第一次产检（孕早期）或下一次产检时 如有必要，孕晚期再次检测 此前无检测结果，则在分娩时检测 6 第 7 页 梅毒的实验室检测方法梅毒的实验室检测方法 显微镜检测显微镜检测法（诊断技术）：法（诊断技术）：（1）暗视野显微镜检查 （2）镀银染色检查 血清学检测血清学检测法法（筛查技术）（筛查技术）非梅毒螺旋体抗原血清试验：检测检测非特异性抗体非特异性抗体：抗心磷脂抗体、即非特异 性抗体、反应素 梅毒螺旋体抗原血清试验：检测检测特异性梅毒螺旋体抗体特异性梅毒螺旋体抗体 第 8 页 梅毒早期诊断的依据之一诊断的依据之一是病原学检测，即在组织或分泌物中检测到苍白螺旋体苍白螺旋体：暗视野显微镜
4、镀银染色镜检 梅毒检测技术梅毒检测技术 8 第 9 页 非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验 RPR（快速血浆反应素环状卡片试验）TRUST（甲苯胺红不加热血清试验）VDRL（性病研究实验室试验）梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验 TPPA（梅毒螺旋体颗粒凝集试验）ELISA（酶联免疫吸附试验）POCT（胶体金技术，快速检测、一站式检测）梅毒检测技术梅毒检测技术 9 第 10 页 围产期梅毒检测方法特点围产期梅毒检测方法特点 用于诊断产检、临产及分娩的孕产妇是否感染梅毒 梅毒血清学检测筛查试验应具有的特点筛查试验应具有的特点 具有较高的灵敏度较高的灵敏度和特异度特
5、异度 操作简单、容易获得、便宜 尽可能在“当日”获得结果 10 第 11 页 非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验 梅毒螺旋体感染可产生非特异性抗体非特异性抗体（非梅毒螺旋体抗体）非梅毒螺旋体抗体 又称之为反应素，是抗心磷脂等抗原的抗体 随菌体和宿主细胞的类脂质抗原量升高 除梅毒外，其他医学情况会造成非梅毒螺旋体抗原血清学试验假阳性假阳性结果，包括结核、疟疾、妊娠和风湿关节炎、狼疮及硬皮病等自体免疫性疾病自体免疫性疾病 11 第 12 页 非梅毒螺旋体抗原血清学试验的特点非梅毒螺旋体抗原血清学试验的特点 非梅毒螺旋体抗原血清学试验：非梅毒螺旋体抗原血清学试验：快速、简便、便宜
6、敏感性和特异性较高 硬下疳后1-2周变为阳性 可用于 筛查样本 评估对治疗的反应评估对治疗的反应 鉴别复燃还是再次感染鉴别复燃还是再次感染 12 第 13 页 确保非梅毒螺旋体抗原血清学试验确保非梅毒螺旋体抗原血清学试验 质量的关键点质量的关键点 1.按照标准操作程序（SOPs）进行操作 2.2.推荐使用评价特性较好的试剂推荐使用评价特性较好的试剂*3.按照统一的标准报告结果 4.4.开展实验室质控（开展实验室质控（QCQC）和参加室间能力验证（）和参加室间能力验证（PTPT）*由中国疾病预防控制中心性病中心国家参比实验室提供 13 第 14 页 非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清
7、学试验 抗体滴度通常与疾病活动度有关抗体滴度通常与疾病活动度有关 治疗后（可能几个月）非梅毒螺旋体抗原血清学试验通常转变为不反应不反应 如果用同一种实验，相同试验滴度4 4倍变化倍变化（如从1:16下降到1:4或从1:8上升到1:32）为临床显著变化临床显著变化 有些病人，抗体滴度可始终处于较低水平，有时可持续终生（血清固定血清固定）注意：注意：病人血清学监测应在同一个实验室使用同一种检测方法（RPR、TRUST）进行连续多次检测；RPRRPR和和TRUSTTRUST方法均有效，但检测的滴度结果不能直接进方法均有效，但检测的滴度结果不能直接进行比较行比较 14 第 15 页 治疗后非梅毒螺旋体
8、抗原血清学试验治疗后非梅毒螺旋体抗原血清学试验 抗体滴度变化的临床意义抗体滴度变化的临床意义 一期梅毒和二期梅毒：成功治疗，抗体滴度应 3个月后下降2倍 6个月后下降4倍 一期梅毒：1年后抗体滴度转阴 二期梅毒：2年后抗体滴度转阴 晚期梅毒：治疗后抗体滴度缓慢下降 50%的病人2年后抗体滴度仍为阳性 15 第 16 页 梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验 梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验 检测梅毒螺旋体抗原特异性抗体 可用于确认非梅毒螺旋体抗原血清学试验的阳性结果确认非梅毒螺旋体抗原血清学试验的阳性结果，排除其假阳性，排除其假阳性 阳性结果可持续存在，即使治疗后仍
9、可为阳性阳性结果可持续存在，即使治疗后仍可为阳性。*梅毒螺旋体抗原血清学试验与疾病的活动度无关与疾病的活动度无关，不能不能用于鉴别现症感染还是既往感染，也不能用于用于鉴别现症感染还是既往感染，也不能用于判断疗效判断疗效 *一期梅毒治疗病人中，一期梅毒治疗病人中，15%15%-25%25%可在可在2 2-3 3年后转为血清学阴性年后转为血清学阴性 16 第 17 页 妊娠期梅毒检测妊娠期梅毒检测 所有孕产妇所有孕产妇应进行梅毒筛查检测：孕期尽早孕期尽早（如果可能，在孕早期时）以及 如果在分娩前/临产时没有筛查检测结果，在分娩时检测 筛查检测可应用以下任何一类方法：非梅毒螺旋体抗原血清学试验（滴度
10、）或 梅毒螺旋体抗原血清学试验 所有筛查检测结果阳性的孕产妇都应用另一类检测方法进行复检确认是否为现症所有筛查检测结果阳性的孕产妇都应用另一类检测方法进行复检确认是否为现症 梅毒梅毒 所有产妇及所生婴儿出院前，产妇梅毒检测结果都应记录在病历中，以确保需要时给予治疗 17 第 18 页 孕产妇梅毒检测流程孕产妇梅毒检测流程 非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验 梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验 孕产妇孕产妇 治疗后，随访监测非梅毒螺旋治疗后，随访监测非梅毒螺旋体抗原血清学试验体抗原血清学试验 非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验 梅毒螺旋体抗原血清
11、学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验 每3个月进行非梅毒螺旋体抗原血清个月进行非梅毒螺旋体抗原血清学试验学试验 如果需要进行治疗如果需要进行治疗 报告：报告：非梅毒螺旋体抗原血清学非梅毒螺旋体抗原血清学试验阴性试验阴性 报告：两种检测均阳性两种检测均阳性 治疗病人治疗病人 报告：报告：梅毒螺旋体抗原血清梅毒螺旋体抗原血清学试验阴性学试验阴性 报告：报告：非梅毒螺旋体抗原血清学非梅毒螺旋体抗原血清学试验阳性试验阳性 梅毒螺旋体抗原血清学试梅毒螺旋体抗原血清学试验阴性验阴性 报告：报告：梅毒螺旋体抗原血清学试梅毒螺旋体抗原血清学试验阳性验阳性 非梅毒螺旋体抗原血清学非梅毒螺旋体抗原血清学试验阴性试验阴性
12、 阳性反应 阴性反应 阴性反应 阳性反应 阳性反应 或 阴性反应 阳性反应 阴性反应 阳性反应 第 19 页 HIVHIV感染病人的梅毒血清学试验感染病人的梅毒血清学试验 一些HIV感染病人，其梅毒血清学试验结果不典型，包括 滴度超常高或超常低 滴度不断变动 如果临床表现提示早期梅毒，而血清学试验结果与此不一致，考虑 病灶活检 或 暗视野显微镜检查 注意：注意：对于大多数HIV感染病人而言，梅毒血清学试验是诊断梅毒感染、随访观察疗效准确、可靠的检测方法 19 第 20 页 梅毒血清学检测结果的解释梅毒血清学检测结果的解释 非梅毒螺旋体非梅毒螺旋体试验试验 梅毒螺旋体梅毒螺旋体试验试验 临床参考
13、意义临床参考意义 +-RPR假阳性 考虑其他医学状况*+现症梅毒现症梅毒 -+既往感染既往感染或极早期梅毒极早期梅毒 -排除梅毒感染 由于免疫缺陷，也可发生于艾滋病晚期*包括结核、疟疾、风湿性关节炎或妊娠。20 第 21 页 暴露婴儿的梅毒检测暴露婴儿的梅毒检测 21 第 22 页 梅毒暴露婴儿先天梅毒检测梅毒暴露婴儿先天梅毒检测 母体非梅毒螺旋体和梅毒螺旋体IgGIgG抗体可通过胎盘，所以应谨慎地对婴儿梅毒血抗体可通过胎盘，所以应谨慎地对婴儿梅毒血清学试验结果进行解释清学试验结果进行解释 婴儿需要接受预防性治疗还是规范的抗梅毒治疗应根据：母亲确诊梅毒感染 母亲治疗情况 婴儿梅毒感染的临床表现
14、、实验室或放射线检查结果 母亲及婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验滴度水平的比较（尽可能在同一个实验室使用相同的试验方法）22 第 23 页 先天梅毒的诊断先天梅毒的诊断 先天梅毒的诊断标准：先天梅毒的诊断标准：梅毒暴露婴儿具有以下条件之一：梅毒暴露婴儿具有以下条件之一：任何先天梅毒临床表现 暗视野显微镜检梅毒螺旋体阳性（+）梅毒螺旋体IgM抗体阳性*RPR/TRUST检测阳性，滴度比母亲分娩前最近一次滴度高4倍及以上 RPR/TRUST监测随访中，任何一次滴度不下降或反而上升 满满1818月龄后，月龄后，TPPATPPA检测阳性检测阳性 *IgM抗体反映近期感染，可帮助鉴别婴儿先天梅毒，但我国尚
15、不能广泛开展 23 第 24 页 梅毒暴露婴儿的评估梅毒暴露婴儿的评估 梅毒暴露婴儿：婴儿RPR检测 婴儿RPR检测不能使用脐带血，因其易被母体血液 污染，从而出现假阳性结果 检查先天梅毒临床表现：非免疫性水肿、黄疸、肝脾大、鼻炎、皮疹、末端肢体假性麻痹 对可疑病灶或体液进行暗视野显微镜检查 24 第 25 页 先天梅毒检测流程先天梅毒检测流程 婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验定量检测 梅毒暴露婴儿 母亲、婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验定量检测（应同时进行梅毒螺旋体抗原血清学试验，用于随访诊断）组织或分泌物暗视野显微镜检，有条件进行IgM抗体检测 报告母亲、婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验检测滴度
16、水平滴度水平 报告婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验检测滴度水滴度水平平 报告暗视野显微镜检或IgM抗体检测结果 阳性 阴性 没有梅毒感染的症状 有梅毒感染的症状 25 第 26 页 梅毒检测小结梅毒检测小结 早期梅毒早期梅毒诊断可根据在组织诊断可根据在组织或或分泌物样本中通过显微检测到苍白螺旋体而诊断分泌物样本中通过显微检测到苍白螺旋体而诊断 应用梅毒血清学试验进行梅毒筛查应用梅毒血清学试验进行梅毒筛查 非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验检测梅毒感染过程中产生的非特异抗体。滴度通常与滴度通常与疾病的活动度有关，因此可用于监测对治疗的反应疾病的活动度有关，因此可用于监测对治疗的反应 梅毒螺旋体抗原血清学试验检测梅毒螺旋体抗原血清学试验检测对抗梅毒螺旋体抗原的特异性抗体，可用于确认临确认临床诊断或非梅毒螺旋体抗原血清学试验的阳性结果，可反映任何阶段的梅毒暴露床诊断或非梅毒螺旋体抗原血清学试验的阳性结果，可反映任何阶段的梅毒暴露 先天梅毒的诊断复杂，应根据：先天梅毒的诊断复杂，应根据：1.母亲梅毒感染状态 2.母亲梅毒治疗情况 3.婴儿梅毒感染的临床表现、实验室或X线检查结果