1、如何正确采集医院感染如何正确采集医院感染卫生学监测标本卫生学监测标本 华中科技大学同济医学院协和医院医院感染管理科华中科技大学同济医学院协和医院医院感染管理科 吴艳艳吴艳艳 采样及检查原则采样及检查原则 采样后必须尽快对样品进行相应指标的检采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测测,送检时间不得超过送检时间不得超过6h,若样品保存于若样品保存于0-4条件时条件时,送检时间不得送检时间不得超过超过24h。空气采样方法空气采样方法 采样时间采样时间 选择消毒处理后与进行医疗活动之前期选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。间采样。采样高度采样高度 与地面垂直高度与地面垂直高度80-150cm。空气
2、采样方法空气采样方法 布点方法布点方法 室内面积室内面积30m2,设一条对角线上取设一条对角线上取3点点,即即中心一点、两端各距墙中心一点、两端各距墙1m处各取一点处各取一点;室内室内面积面积30m2,设东、西、南、北、中设东、西、南、北、中5点点,其其中东、西、南、北点均距墙中东、西、南、北点均距墙1m。采样方法采样方法 用用9cm直径普通营养琼脂平板在采样点直径普通营养琼脂平板在采样点暴露暴露5min后送检培养。后送检培养。物体表面采样方法物体表面采样方法 采样时间采样时间 选择消毒处理后选择消毒处理后4h内进行采样。内进行采样。采样面积采样面积 被采表面被采表面100cm2,取全部表面；
3、被采表取全部表面；被采表面面100cm2,取取100cm2。物体表面采样方法物体表面采样方法 采样方法采样方法 用用55cm2的标准灭菌规格板的标准灭菌规格板,放在被检放在被检物体表面物体表面,用浸有无菌生理盐水采样液的棉用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹支，在规格板内横竖往返各涂抹5次次,并随之转动棉拭子并随之转动棉拭子,连续采样连续采样1-4个规格板个规格板面积，剪去手接触部分面积，剪去手接触部分,将棉拭子放入装将棉拭子放入装l0ml采样液的试管中送检。采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样。
4、抹物体的方法采样。医护人员手采样方法医护人员手采样方法 采样时间采样时间 在接触病人、从事医疗活动前进行采样。在接触病人、从事医疗活动前进行采样。采样面积及方法采样面积及方法 被检人五指并拢，将浸有无菌生理盐水采样被检人五指并拢，将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支在双手指曲面从指根到指端来液的棉试子一支在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积回涂擦各两次（一只手涂擦面积30cm2），并），并随之转动采样棉试子，剪去手接触部位，将棉随之转动采样棉试子，剪去手接触部位，将棉试子放入装有试子放入装有10ml采样液的试管内送检。采样液的试管内送检。医疗用品采样方法医疗用品采样方法 采样
5、时间采样时间 在消毒或灭菌处理后，存放有效期内采样。在消毒或灭菌处理后，存放有效期内采样。采样量及采样方法采样量及采样方法 可用破坏性方法取样的医疗用品，如输液可用破坏性方法取样的医疗用品，如输液（血）器、注射器和注射针等均参照（血）器、注射器和注射针等均参照消毒消毒技术规范技术规范（2002年版）规定执行。年版）规定执行。医疗用品采样方法医疗用品采样方法 采样量及采样方法采样量及采样方法 对不能用破坏性方法取样的特殊医疗对不能用破坏性方法取样的特殊医疗用品，可用浸有无菌生理盐水采样液的棉用品，可用浸有无菌生理盐水采样液的棉试子在被检物体表面涂抹采样，被采表面试子在被检物体表面涂抹采样，被采表
6、面 100cm2，取全部表面；被采表面，取全部表面；被采表面100cm2，取，取100cm2。使用中消毒剂与无菌器械保存液使用中消毒剂与无菌器械保存液采样方法采样方法 采样时间采样时间 采取更换前使用中的消毒剂与无菌器械采取更换前使用中的消毒剂与无菌器械保存液。保存液。采样量及方法采样量及方法 在无菌条件下，用无菌吸管吸取在无菌条件下，用无菌吸管吸取2ml被被检样液，注入空试管中。检样液，注入空试管中。各类环境空气、物体表面细菌菌各类环境空气、物体表面细菌菌落总数卫生标准落总数卫生标准 环境环境类别类别 范范 围围 标准标准 空气空气 cfu/m3 物体表物体表面面 cfu/cm2 I类类 层
7、流洁净手术室、层流洁净病房层流洁净手术室、层流洁净病房 10 5 类类 普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无菌区、烧伤普通保护性隔离室、供应室无菌区、烧伤病房、重症监护病房病房、重症监护病房 200 5 类类 儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室、供应室清洁区、急诊室、化室、治疗室、供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房和房间验室、各类普通病房和房间 500 10 类类 传染病科及病房传染病科及病房 15 各类环境空气、物体表面细菌菌各类环境空气、物体表面细菌菌落总数卫生标准落总数卫
8、生标准 不得检出乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄不得检出乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌及其他致病性微生物。球菌及其他致病性微生物。母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿及母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿及儿科病房的物体表面不得检出沙门氏菌。儿科病房的物体表面不得检出沙门氏菌。手消毒效果手消毒效果 卫生手消毒，监测的细菌菌落总数应卫生手消毒，监测的细菌菌落总数应10 cfu/cm2 外科手消毒，监测的细菌菌落总数应外科手消毒，监测的细菌菌落总数应5 cfu/cm2 医疗用品卫生标准医疗用品卫生标准 进入人体无菌组织、器官或接触破损皮肤进入人体无菌组织、器官或接触破损皮肤、粘膜的医疗用品必须无菌。、粘
9、膜的医疗用品必须无菌。接触粘膜的医疗用品接触粘膜的医疗用品 细菌菌落总数应细菌菌落总数应20cfu/g或或100cm2；致病性微生物不得检出。致病性微生物不得检出。接触皮肤的医疗用品接触皮肤的医疗用品 细菌菌落总数应细菌菌落总数应200cfu/g或或100cm2；致病性微生物不得检出。致病性微生物不得检出。使用中消毒剂与无菌器械保存液使用中消毒剂与无菌器械保存液卫生标准卫生标准 使用中消毒剂使用中消毒剂 细菌菌落总数应细菌菌落总数应100cfu/ml；致病性微；致病性微生物不得检出。生物不得检出。无菌器械保存液无菌器械保存液 必须无菌。必须无菌。内镜内镜 灭菌后的内镜应当每月进行生物学监测并灭
10、菌后的内镜应当每月进行生物学监测并做好监测记录。做好监测记录。消毒后的内镜合格标准为：消毒后的内镜合格标准为：细菌细菌总数总数20cfu/件，不能检出致病菌；件，不能检出致病菌；灭菌后内镜合格标准为：无菌检测合格。灭菌后内镜合格标准为：无菌检测合格。内镜内镜 内镜的消毒效果监测采用以下方法：内镜的消毒效果监测采用以下方法：采样方法：监测采样部位为内镜的内腔面采样方法：监测采样部位为内镜的内腔面。用无菌注射器抽取。用无菌注射器抽取10ml含相应中和剂的含相应中和剂的缓冲液缓冲液，从待检内镜活检口注入，用，从待检内镜活检口注入，用15ml无菌试管从活检无菌试管从活检出口出口收集，及时送检，收集，及
11、时送检，2小小时内检测。时内检测。内镜内镜 菌落计数：将送检液用旋涡器充分震荡，菌落计数：将送检液用旋涡器充分震荡，取取0.5ml，加入，加入2只直径只直径90mm无菌平皿，无菌平皿，每平皿分别加入已经熔化的每平皿分别加入已经熔化的45-48营养营养琼脂琼脂15ml-18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，于固，于35培养培养48小时后计数。小时后计数。结果判断：菌落数结果判断：菌落数/镜镜=2个平皿菌落数平均个平皿菌落数平均值值20。内镜内镜 致病菌检测：将送检液用旋涡器充分震荡致病菌检测：将送检液用旋涡器充分震荡，取，取0.2ml分别接种分别接种90mm血平皿、中国兰血
12、平皿、中国兰平皿和平皿和SS平皿，均匀涂布，平皿，均匀涂布，35培养培养48小小时，观察有无致病菌生长时，观察有无致病菌生长 血液透析中心血液透析中心 透析用水透析用水 细菌培养应每月细菌培养应每月1次，采样部位为反渗水供次，采样部位为反渗水供水管路的末端，细菌数水管路的末端，细菌数200cfu/ml合格。合格。内毒素检测应每内毒素检测应每3个月个月1次，采样部位为反次，采样部位为反渗水供水管路的末端，内毒素渗水供水管路的末端，内毒素2EU/ml合合格。格。储水装置的采样部位应在出口点，细菌数储水装置的采样部位应在出口点，细菌数200cfu/ml合格，内毒素合格，内毒素2EU/ml合格合格 血液透析中心血液透析中心 透析液透析液 透析液应每月进行透析液应每月进行1次细菌培养，在透析液次细菌培养，在透析液进入透析器的位置收集标本，细菌数进入透析器的位置收集标本，细菌数200cfu/ml。透析液应每透析液应每3个月进行个月进行1次内毒素检测，留次内毒素检测，留取标本方法同细菌培养，内毒素取标本方法同细菌培养，内毒素2EU/ml。