1、学习项目二学习项目二 实验室检验实验室检验 学习任务一学习任务一 血液常规检验血液常规检验 子任务一子任务一 动物采血技术动物采血技术 血液检验血液检验 血液样本的采取与抗凝血液样本的采取与抗凝 血液样本的采取血液样本的采取 采血的部位和方法，根据检验的项目、所采血的部位和方法，根据检验的项目、所需血量和动物种类的不同，可分为毛细血需血量和动物种类的不同，可分为毛细血管采血、静脉采血和心脏采血。管采血、静脉采血和心脏采血。毛细血管采血法毛细血管采血法 除血沉测定和红细胞压积测定除血沉测定和红细胞压积测定需较多量血液外需较多量血液外，其他各项测定均可在耳尖其他各项测定均可在耳尖、耳耳缘及耳静脉处
2、按毛细血管采血缘及耳静脉处按毛细血管采血。采血前先剪毛采血前先剪毛，酒精棉球消毒酒精棉球消毒，待酒精挥发后待酒精挥发后，用消毒的干燥的用消毒的干燥的针头迅速刺入针头迅速刺入2 2 3 3mmmm深深，让血液自然流出让血液自然流出，且勿挤且勿挤压以免混入过多组织液压以免混入过多组织液。流出的第一滴血流出的第一滴血，可用于制作血片可用于制作血片，然后用干然后用干棉球擦去局部的剩余血液棉球擦去局部的剩余血液，用流出的第二滴血用流出的第二滴血液作红液作红、白细胞计数和血红蛋白测定白细胞计数和血红蛋白测定，若利用若利用第三滴血时第三滴血时，仍要将第二滴血擦干仍要将第二滴血擦干，否则流出否则流出的血不能形
3、成滴状的血不能形成滴状，不易吸取不易吸取。静脉采血法静脉采血法 马马、牛牛、羊可由颈静脉采血羊可由颈静脉采血。鸡可由翼下静脉鸡可由翼下静脉采血采血，即用细针头刺入翼下静脉后即用细针头刺入翼下静脉后，任血液自行流出并接入任血液自行流出并接入试管中试管中。犬犬、猫可于小腿外侧跖背外侧静脉或前臂内侧皮下猫可于小腿外侧跖背外侧静脉或前臂内侧皮下静脉采血静脉采血。局部剪毛消毒局部剪毛消毒，用止血带扎住采血部上端用止血带扎住采血部上端，使静使静脉怒张脉怒张，用消毒用消毒、干燥的注射器接上针头干燥的注射器接上针头，针头斜上面刺入针头斜上面刺入静脉采血静脉采血，待抽至所需量后待抽至所需量后，先放松止血带先放松
4、止血带，再用消毒棉球再用消毒棉球按住伤口按住伤口，拔出针头拔出针头。除去针头除去针头，将血液缓缓注入清洁的试将血液缓缓注入清洁的试管内管内。需抗凝血液时需抗凝血液时，试管内加抗凝剂试管内加抗凝剂，并立即混匀并立即混匀，以免以免凝固凝固。心脏采血法心脏采血法 多用于鸡及实验动物多量血液时多用于鸡及实验动物多量血液时，鸡可由胸腔入口处向心脏刺入由于心腔压力较静鸡可由胸腔入口处向心脏刺入由于心腔压力较静脉高脉高，血液自然涌入注射器血液自然涌入注射器，兔及鸡亦可在左侧兔及鸡亦可在左侧胸部第胸部第1 1、2 2肋间肋间，心搏动明显处的肋间隙心搏动明显处的肋间隙，针头针头与胸壁呈垂直方向刺入与胸壁呈垂直方
5、向刺入。牛尾静脉采血牛尾静脉采血 采样者接触牛的头部，容易引起牛发惊，难保定，牛角容易伤人，危险性大，特别是奶牛应激强烈，产奶量减少，容易引起流产，造成经济损失。牛尾静脉采血法采集，接触牛尾部，牛不惊，牛尾神经相对迟钝，疼痛轻，保定省力，只须一人将牛牵好即可，无应激。1、尾静脉采血部位、尾静脉采血部位 牛尾静脉位于牛尾腹侧面的中心线皮下位置，因离尾根大约牛尾静脉位于牛尾腹侧面的中心线皮下位置，因离尾根大约10cm处，静脉较粗且较浅，所以此处为采血最佳部位。处，静脉较粗且较浅，所以此处为采血最佳部位。2、采血过程采血过程 助手将牛牵好，采血者左手托起牛尾巴，右手对采血部位消助手将牛牵好，采血者左
6、手托起牛尾巴，右手对采血部位消毒后，持带有毒后，持带有7号针头的一次性注射器，右手食指控制针头号针头的一次性注射器，右手食指控制针头深度，由下向上垂直刺入牛尾腹侧中心线位置约深度，由下向上垂直刺入牛尾腹侧中心线位置约0.5cm见有见有回血即可抽血，一般采用回血即可抽血，一般采用5ml即可，拔出采血针，用酒精棉即可，拔出采血针，用酒精棉球压一下针孔防止出血。球压一下针孔防止出血。注意事项注意事项 1.做好保定做好保定:保定后，牛不要左右活动，采血者左手托起牛尾巴，与水平线成45度角左右。2.找准部位找准部位:保定后选择最佳采血点，第4、5尾椎交界中点凹陷处垂直刺入，针头刺入约1cm深，针头触到尾
7、骨后再后退1mm，轻轻抽动注射器内芯，直到抽出一定量的血液为止，采到的动脉血鲜红，量多，如果是静脉血颜色暗，量少。3.做好消毒卫生做好消毒卫生:采血前要清理牛舍粪便、尿液，保持圈舍、牛体干净卫生，以免污染采血部位和血样；采血部位要用75%的酒精棉球消毒，防止感染。4.注意人身安全卫生注意人身安全卫生:在进行尾部采血时，采血者要上身前倾，腿后移，以防被牛踢伤；要穿工作服，高筒水鞋，防止牛粪飞溅身上。猪采血技术猪采血技术 猪场采血在基层兽医临床上是一项重要的工作。目前，大多数猪场都是使用耳静脉抽血的方法采血，这种方法费时费力，结合生产实际总结了几种采血方法，主要包括耳静脉采血、前腔静脉采血、尾静脉
8、采血和乳静脉采血。前腔静脉采血 猪的尾静脉采血 乳静脉采血 鸡翼下静脉采血法鸡翼下静脉采血法 静脉又称容量血管，其内含血量较多且流速较慢，位于翼下静脉具此特点，此静脉易找到，健康安全范围内在此可采血1020ml。而且操作方便，单人即可完成，采血量极易控制，止血彻底，对家禽影响小。采血步骤：术者右手持注射器，左手将家禽双翼提起，露出翼静脉的采血位置，把覆盖血管的羽毛拔开，即可见到明显一条较粗的静脉血管。采血时用左手大拇指夹住覆盖静脉的羽毛，食指协调大拇指夹住双翼，中指、无名指和手掌轻轻提起或轻按背部保定鸡只，待其安静方可刺针。针头在距静脉血管0.30.5cm一旁倾斜刺入皮肤，再与血管平行进针0.
9、20.4cm后刺入血管，见有少量回血即可采集血液，采血完成后马上用手压迫伤口止血。分离血清 采完血后，先将血清放到37度静置2小时，然后再4度过夜，这样出的血清多。实在不行，将凝固的血液用针头划几下，效果比较好。如果成胶冻样，可以高速离心，就能分离出血清了。血液检验血液检验 血液的抗凝血液的抗凝 草酸钠草酸钠 是常用的抗凝剂，每是常用的抗凝剂，每1.51.52.0mg2.0mg可抗凝可抗凝1.0ml1.0ml血液，可用于血液常规检验。因对红细胞大小血液，可用于血液常规检验。因对红细胞大小有影响，故不能用红细胞压积测定，如测定红细胞压有影响，故不能用红细胞压积测定，如测定红细胞压积时，可用双草酸
10、盐抗凝剂或乙二胺四乙酸二钠。积时，可用双草酸盐抗凝剂或乙二胺四乙酸二钠。双草酸盐抗凝剂双草酸盐抗凝剂 草酸钠草酸钠 0.8g0.8g 草酸铵草酸铵 1.2g1.2g 蒸馏水蒸馏水 加至加至100ml 100ml 溶解后吸取溶解后吸取0.5ml0.5ml，加入供采血试管或小瓶中，置干燥，加入供采血试管或小瓶中，置干燥箱内（温度不超过箱内（温度不超过8080）烘干备用，可供）烘干备用，可供5ml5ml全血抗凝全血抗凝 血液检验血液检验 乙二胺四乙酸二钠乙二胺四乙酸二钠（EDTAEDTANaNa2 2）每每1010mgmg可使可使5 5mlml全血全血抗凝；或配成抗凝；或配成1010%的溶液的溶液，
11、每每2 2滴可使滴可使5 5mlml全血抗凝全血抗凝。可适用于一般的血液学检查可适用于一般的血液学检查，特别是血小板计数特别是血小板计数，但但因为影响血小板聚集和白细胞吞噬功能因为影响血小板聚集和白细胞吞噬功能，不适合于血不适合于血象及血小板功能检查象及血小板功能检查。3 3.8 8%枸橼酸钠溶液枸橼酸钠溶液 每每0 0.5 5mlml可使可使5 5mlml全血抗凝全血抗凝。常常用于血沉用于血沉、凝血因子和血小板功能检查凝血因子和血小板功能检查。因其毒性因其毒性小又可作为血液保养液小又可作为血液保养液。但不适用于血液化学检验但不适用于血液化学检验。由于抗凝剂溶解缓慢由于抗凝剂溶解缓慢，故只能配
12、成溶液故只能配成溶液，不能用粉不能用粉剂剂。血液的抗凝血液的抗凝 血液检验血液检验 肝素肝素 肝素价格最贵，其优点是抗凝作用强，不影响肝素价格最贵，其优点是抗凝作用强，不影响血细胞的体积，不致溶血等，可用于多种血液生物化血细胞的体积，不致溶血等，可用于多种血液生物化学分析和红细胞压积测定。但过量的肝素可引起白细学分析和红细胞压积测定。但过量的肝素可引起白细胞聚集和血小板减少，故不适用于白细胞和血小板计胞聚集和血小板减少，故不适用于白细胞和血小板计数，也不适用于血涂片检查，因其在瑞氏染色时会出数，也不适用于血涂片检查，因其在瑞氏染色时会出现蓝色背景，更不能用于凝血象的检查。现蓝色背景，更不能用于
13、凝血象的检查。血液的抗凝血液的抗凝 通常用肝素粉剂配成通常用肝素粉剂配成1g/L1g/L水溶液。取水溶液。取0.5ml0.5ml置小瓶内，置小瓶内，放于放于37375050中烘干后贮于冰箱内保存。能使中烘干后贮于冰箱内保存。能使5ml5ml血液血液不凝固，肝素抗凝剂应及时使用，放置过久易失效。不凝固，肝素抗凝剂应及时使用，放置过久易失效。怀疑传染病时，采血应防止到处流散，检后残余血液及怀疑传染病时，采血应防止到处流散，检后残余血液及所用器皿应进行消毒处理。所用器皿应进行消毒处理。子任务二子任务二 红细胞沉降率（红细胞沉降率（ESPESP）测定）测定 血液检验血液检验 红细胞沉降率测定红细胞沉降
14、率测定 魏氏法魏氏法 魏氏血沉管长魏氏血沉管长30cm，内径内径2.5mm管上有管上有0200的刻度的刻度，每一刻度每一刻度的距离为的距离为1mm，其溶积为其溶积为1ml。先向先向10ml刻度试管中加入刻度试管中加入3.8%枸橼酸枸橼酸1ml，再自静再自静脉采血脉采血4ml，颠倒混合数次颠倒混合数次，然后用魏氏血沉管吸然后用魏氏血沉管吸取抗凝剂至刻度取抗凝剂至刻度0处处，擦去管外血液擦去管外血液，在室温条件在室温条件下下，垂直放于血沉管架上垂直放于血沉管架上，经经15、30、45、60min，分别观察并记录细胞沉降数值分别观察并记录细胞沉降数值。血液检验血液检验 红细胞沉降率测定红细胞沉降率测
15、定“六五”型血沉管法六五”型血沉管法“六五”型血沉管法内径六五”型血沉管法内径0.9cm，全长，全长1720cm，管，管上有上有100个刻度容积为个刻度容积为10ml。于血沉管中加入抗凝剂（草酸钠于血沉管中加入抗凝剂（草酸钠0.0150.02g，枸橼酸，枸橼酸钠粉末钠粉末0.040.05g）,自颈静脉直接采血至刻度“自颈静脉直接采血至刻度“0”处处，立即充分混合，于室温垂直立于试管架上，镜，立即充分混合，于室温垂直立于试管架上，镜15、30、45、60min各观察一次，并记录红细胞沉降的数值各观察一次，并记录红细胞沉降的数值。血液检验血液检验 红细胞沉降率测定红细胞沉降率测定 各种动物的正常血
16、沉值各种动物的正常血沉值 动物种类动物种类 15分分 30分分 45分分 60分分 测定方法测定方法 马马 驴驴 黄牛黄牛 水牛水牛 奶牛奶牛 山羊山羊 猪猪 31 32 9.8 0.3 3 49 75 30.8 0.7 8 53 96.7 65 0.75 20 55 110.7 0.8 91.6 1.2 0.6 30 六五型法六五型法 魏氏法魏氏法 魏氏法魏氏法 魏氏法魏氏法 魏氏法魏氏法 魏氏法魏氏法 六五型法六五型法 测定血沉时必须用新配制的抗凝测定血沉时必须用新配制的抗凝血；血；血液与抗凝剂混合要充分血液与抗凝剂混合要充分，柱面上不应有气泡柱面上不应有气泡，它可使血沉变它可使血沉变慢；慢；用魏氏法测定时用魏氏法测定时，事先应检事先应检查血沉架是否好用查血沉架是否好用，以防漏用；以防漏用；测定时室温以测定时室温以20左右为宜左右为宜，温度温度过低可以减慢血沉过低可以减慢血沉。血沉加快血沉加快，见于马传染性贫血、梨形虫病、结核、鼻疽、猪，见于马传染性贫血、梨形虫病、结核、鼻疽、猪瘟、化脓性炎症、风湿症等。瘟、化脓性炎症、风湿症等。血沉减慢血沉减慢，见于大出汗、多尿、剧烈腹泻、马流行