1、 四、血细胞比容测定四、血细胞比容测定 血细胞比容(血细胞比容(hematocrithematocrit,HCTHCT,HtHt,HCTHCT)是指在)是指在一定条件下经离心沉淀压紧的红细胞在全血标本中一定条件下经离心沉淀压紧的红细胞在全血标本中所占体积的比值。所占体积的比值。【原理原理】WintrobeWintrobe法和微量法:均属离心法法和微量法:均属离心法。抗凝剂处理的抗凝剂处理的全血注入全血注入WintrobeWintrobe管或毛细管内管或毛细管内,以一定转速离心以一定转速离心一定时间后一定时间后,计算红细胞层占全血的体积比计算红细胞层占全血的体积比。血液分析仪法:血液分析仪法:H
2、CT=HCT=红细胞计数红细胞计数*红细胞平均体积红细胞平均体积 【方法学评价方法学评价】手工法:离心沉淀法、放射性核素法、比重计法、折手工法:离心沉淀法、放射性核素法、比重计法、折射仪法和黏度计法等。射仪法和黏度计法等。1 1放射性核素法最为准确,被放射性核素法最为准确,被ICSHICSH规定为参考方法;但方法繁琐,规定为参考方法;但方法繁琐,不适用于临床常规检查。不适用于临床常规检查。2 2微量离心法相对离心力大,红细胞间残留的血浆含量低,标本微量离心法相对离心力大,红细胞间残留的血浆含量低,标本用量少。但高速离心容易导致靠近封口端的红细胞变形,而靠用量少。但高速离心容易导致靠近封口端的红
3、细胞变形,而靠近血浆端的红细胞中容易混入白细胞及血小板,也影响了测定近血浆端的红细胞中容易混入白细胞及血小板,也影响了测定的准确性。的准确性。3 3温氏法无需特殊仪器,但不能完全排除红细胞间残留血浆,且温氏法无需特殊仪器,但不能完全排除红细胞间残留血浆,且需单独采血,用血量大,通常用于血液流变学检查。但有被微需单独采血,用血量大,通常用于血液流变学检查。但有被微量离心法取代的趋势。量离心法取代的趋势。血液分析仪法血液分析仪法 简便快速简便快速、精密度高的优点精密度高的优点,应当注意患者为红应当注意患者为红细胞增多症或血浆渗透压异常时仪器常会出现误差细胞增多症或血浆渗透压异常时仪器常会出现误差。
4、表表2 2-10 10 临床常用临床常用HCTHCT检测方法的比较检测方法的比较 方法方法 优点优点 缺点缺点 WintrobeWintrobe法法 无需特殊仪器无需特殊仪器,应用广泛应用广泛 不能完全排除残留血浆不能完全排除残留血浆,且单独且单独采血采血,用血量大用血量大,有逐渐被淘汰有逐渐被淘汰的趋势的趋势 微量法微量法 快速快速(5 5minmin)标本用量小标本用量小、结果准确结果准确、重复性好重复性好。WHOWHO推荐的首选参考方法推荐的首选参考方法 残留血浆较温氏法少残留血浆较温氏法少,但高速离但高速离心易使毛细管底端的红细胞压缩心易使毛细管底端的红细胞压缩变形甚至破坏变形甚至破坏
5、 电阻抗法电阻抗法 简便快速简便快速(5 51515s s)白细胞白细胞、血小板增多可引起血液血小板增多可引起血液导电异常导电异常,使结果不可靠使结果不可靠 血 液 分 析血 液 分 析仪法仪法 简便快速简便快速、精密度高精密度高,无无需单独采血需单独采血 准确性稍低准确性稍低,结果仅供参考结果仅供参考 【质量控制质量控制】手工法:采血手工法:采血 、抗凝、抗凝 、离心速度、离心速度 血液分析仪法:血液分析仪法:HCTHCT与红细胞计数和红细胞平与红细胞计数和红细胞平均体积测定的相关性均体积测定的相关性 【参考值参考值】表表2 2-11 HCT11 HCT参考范围参考范围 成年男性成年男性 成
6、年女性成年女性 新生儿新生儿 WintrobeWintrobe法法 0 0.42420 0.4949 0 0.37370 0.4848 0 0.47470 0.6767 微量离心法微量离心法 0 0.4674670 0.039039 0 0.4214210 0.054054 【临床意义临床意义】临床补液量的参考:各种原因导致病人脱水时临床补液量的参考:各种原因导致病人脱水时,HCTHCT都会升高都会升高,补液时可监测补液时可监测HCTHCT,HCTHCT 恢复正常表示血容量得到纠正恢复正常表示血容量得到纠正。真性红细胞增多症的诊断指标:当真性红细胞增多症的诊断指标:当HCTHCT0 0.7 7
7、;RBCRBC为为(7 71010)10101212/L/L;HbHb180180g/Lg/L,即可成立诊断即可成立诊断。红细胞平均值计算的基本参数之一:利用红细胞平均值计算的基本参数之一:利用RBCRBC、HbHb、HCTHCT三个指三个指标可计算出红细胞的三个平均值标可计算出红细胞的三个平均值,可用以进行贫血的形态学分可用以进行贫血的形态学分类类。重要的血液流变学指标:重要的血液流变学指标:HCTHCT升高表明红细胞数量偏高升高表明红细胞数量偏高,可导致可导致全血黏度增加全血黏度增加,可用于监测血栓前状态可用于监测血栓前状态。五、五、红细胞平均红细胞平均指数指数 由于血红蛋白存在于红细胞内
8、由于血红蛋白存在于红细胞内,不同原因造成的不同原因造成的贫血贫血,其红细胞其红细胞、血红蛋白下降的程度未必一致;血红蛋白下降的程度未必一致;同时同时,不同数量不同数量、大小及形态的红细胞占全血容积大小及形态的红细胞占全血容积的比例也不尽相同的比例也不尽相同。由此可见由此可见,RBCRBC、HbHb、HCTHCT三个三个参数之间有着内在的联系参数之间有着内在的联系。计算三者之间的关系计算三者之间的关系,可加深对红细胞的特征认识可加深对红细胞的特征认识,进而为贫血的鉴别诊进而为贫血的鉴别诊断提供更多线索断提供更多线索。【检测原理检测原理】手工法:手工法:1 1红细胞平均体积(红细胞平均体积(mea
9、n corpuscular volumemean corpuscular volume,MCVMCV)指每个红细胞平均体积的大小。单位:指每个红细胞平均体积的大小。单位:flfl(1fl=101fl=10-1515L L)。)。MCV=HCT/RBC10MCV=HCT/RBC101515(fl)(fl)2 2平均红细胞血红蛋白含量(平均红细胞血红蛋白含量(mean corpuscular mean corpuscular hemoglobinhemoglobin,MCHMCH)指每个红细胞内平均所含血红指每个红细胞内平均所含血红蛋白的量。单位:蛋白的量。单位:pg(1pg=10pg(1pg=1
10、0-1212g)g)。MCH=Hb/RBCMCH=Hb/RBC 3 3.平均红细胞血红蛋白浓度平均红细胞血红蛋白浓度(meanmean corpuscularcorpuscular hemoglobinhemoglobin concentrationconcentration,MCHCMCHC)指测定红细指测定红细胞比容时被压紧的红细胞血红蛋白浓度胞比容时被压紧的红细胞血红蛋白浓度。单位:单位:g/Lg/L。MCHC=Hb/HctMCHC=Hb/Hct 血液分析仪法血液分析仪法:能直接导出能直接导出MCVMCV,计算,计算MCH MCH、MCHCMCHC 【方法学评价方法学评价】手工法和仪器法
11、:手工法和仪器法:MCV:MCV:仪器法仪器法CVCV值小于值小于1%1%,手工法在,手工法在10%10%左右。左右。MCH:MCH:仪器法仪器法CVCV值值为为0.6%0.6%-1.2%1.2%,手工法在,手工法在10%10%左右左右.MCHC:.MCHC:仪器法仪器法CVCV值值1%1%-1.5%,1.5%,手工法手工法MCHCMCHC受受HBHB和和HCTHCT的影响的影响 【质量控制质量控制】手工法:必须用同一血标本手工法:必须用同一血标本 血液分析仪法:血液分析仪法:必须注意三个平均指数的相必须注意三个平均指数的相关性关性 【参考值参考值】表表2 2-12 MCV12 MCV、MCH
12、MCH、MCHCMCHC参考值参考值 人群人群 MCVMCV(fLfL)MCHMCH(pgpg)MCHCMCHC(g/Lg/L)成年人成年人 8282-9494 27273131 320320360360 1 13 3岁岁 7979104104 25253232 280280350350 新生儿新生儿 8686120120 27273636 250250370370 【临床意义临床意义】MCV MCH MCHC 红细胞形态特征红细胞形态特征 意义意义 正常正常 正常正常 正常正常 正细胞正色素性贫正细胞正色素性贫血血 慢性肾病、慢性炎症、内分泌疾病、消化吸慢性肾病、慢性炎症、内分泌疾病、消化吸
13、收不良、恶性肿瘤收不良、恶性肿瘤 正常正常 升高升高 升高升高 正细胞高色素性贫正细胞高色素性贫血血 体外溶血、高脂血症、溶血性贫血体外溶血、高脂血症、溶血性贫血 升高升高 升高升高 正常正常/升升高高 大细胞高色素性贫大细胞高色素性贫血血 巨幼细胞贫血巨幼细胞贫血/伴高浓度冷凝集素,肿瘤、伴高浓度冷凝集素,肿瘤、乙醇中毒乙醇中毒 升高升高 减低减低 减低减低 增生性贫血增生性贫血 仍有足够补充的铁,铜或仍有足够补充的铁,铜或VitBVitB6 6缺乏性贫血的缺乏性贫血的前几天前几天 减低减低 增加增加 增加增加 小细胞高色素性贫小细胞高色素性贫血血 重型遗传性球性细胞增多症重型遗传性球性细胞
14、增多症 正常正常 减低减低 正常正常 轻微低色素性贫血轻微低色素性贫血 缺铁性贫血早期缺铁性贫血早期 减低减低 减低减低 减低减低 小细胞低色素性贫小细胞低色素性贫血血 常见于缺铁性贫血,偶见于铜、常见于缺铁性贫血,偶见于铜、VitBVitB6 6缺乏缺乏 六、红细胞体积分布宽度六、红细胞体积分布宽度(RDW)是由血液分析仪根据红细胞体积的直方图导出,反映是由血液分析仪根据红细胞体积的直方图导出,反映所测标本中红细胞体积大小异质程度,常用变异系数所测标本中红细胞体积大小异质程度,常用变异系数表示,它比血图片上红细胞形态大小不均的观察更为表示,它比血图片上红细胞形态大小不均的观察更为客观和准确。
15、客观和准确。检测原理检测原理 多采用电阻抗原理,红细胞经过小孔时多采用电阻抗原理,红细胞经过小孔时产生脉冲信号,有多少红细胞经过小孔产生脉冲信号,有多少红细胞经过小孔就有多少脉冲信号,脉冲信号的强弱与就有多少脉冲信号,脉冲信号的强弱与细胞大小成正比。对被检测的所有红细细胞大小成正比。对被检测的所有红细胞体积进行统计学分析,则导出胞体积进行统计学分析,则导出RDW的的值值 方法学评价 对红细胞体积大小的评价,过去仅靠血对红细胞体积大小的评价,过去仅靠血图片上图片上RBC形态的观察,受血图片的制形态的观察,受血图片的制作及观察者主观因素的影响较大,仪器作及观察者主观因素的影响较大,仪器法克服以上缺
16、点,且能定量。比较而言,法克服以上缺点,且能定量。比较而言,MCV作为贫血的形态学分类参考依据,作为贫血的形态学分类参考依据,则可能掩盖病理性则可能掩盖病理性RBC体积大小的异质体积大小的异质性实际情况,从而影响贫血分类的准确性实际情况,从而影响贫血分类的准确性性 参考值 成人:11.6%-14.6%临床意义 缺铁贫的筛选诊断和疗效观察铁贫的筛选诊断和疗效观察 RDW增大对缺增大对缺铁贫诊断的灵敏度为铁贫诊断的灵敏度为95%,但特异性不强,但特异性不强,可作为缺铁贫的筛选指标。缺铁贫时可作为缺铁贫的筛选指标。缺铁贫时RDW增增大,尤其是大,尤其是MCV尚处于参考值范围时,尚处于参考值范围时,RDW增大更是早期诊断缺铁贫指标。给予铁剂治疗增大更是早期诊断缺铁贫指标。给予铁剂治疗有效时,有效时,RDW将比给药前更大。将比给药前更大。鉴别缺铁贫和鉴别缺铁贫和B珠蛋白生成障碍性贫血珠蛋白生成障碍性贫血 前者前者RDW增大,而后者常正常增大,而后者常正常 七、网织红细胞计数七、网织红细胞计数 网织红细胞(网织红细胞(reticulocytereticulocyte,RetRet或或RETRET)