1、 血糖实验室检测与血糖实验室检测与 比对比对 临床生物化学实验室临床生物化学实验室 焦翔焦翔 血清葡萄糖测定 概述 血液中的葡萄糖是人体的三大营养物质之一，是人体能量的主要来源，也是指导糖尿病病人用药的重要指标。应用酶学方法测定葡萄糖是临床化学中的主流方法。常用的酶法有葡萄糖氧化酶法和己糖激酶法。这两种方法具有较高的灵敏度、准确度和精密度使用温和的反应条件，操作简单方便，适于自动分析仪。血清葡萄糖测定 血糖检测的方法 一、葡萄糖氧化酶法：本法的测定技术有极谱分析法和比色法两类。但二者的初始反应都是在葡萄糖氧化酶的催化下，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸，同时消耗溶液中的氧，产生过氧化氢。极谱分析发是用氧
2、电极监测溶液中氧的消耗量。氧消耗量与葡萄糖浓度成正比。比色分析法是用葡萄糖氧化酶和辣根过氧化物的偶联反应系统。初始反应中过氧化物的生成量与葡萄糖浓度成正比。在辣根过氧化物酶催化下，过氧化氢和各种色原反应，生成有色化合物，可进行比色测定。该发的缺点是易受还原性物质如胆红素、抗坏血酸和尿酸等的干扰。血清葡萄糖测定 二、己糖激酶法：第一步是在己糖激酶催化下，葡萄糖和ATP发生磷酸化反应，生成葡萄糖-6-磷酸；第二步是在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶催化下，葡萄糖-6-磷酸核N AD或NADP发生氧化还原反应，是生成6-磷酸葡萄糖酸和NADH或NADPH。在波长340NM处，监测吸光度的增高。吸光度的净增高值
3、与葡萄糖浓度成正比。己糖激酶方法对葡萄糖的特异性高，不受尿酸和抗坏血酸的干扰。血清葡萄糖测定 三、葡萄糖脱氢酶法：临床上不常用。己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法相比，已公认前者的测定特异性更好，特别适用于急诊检验使用。标本采集 1.血清、血浆、脑脊液和尿液均为可接受的标本。2。标本置室温中，全血中葡萄糖将被分解代谢，大约每小时降低5%。因此采血后应立即离心，分离出血浆，置于干燥洁净试管中，待血浆凝结后在分离出血清，置2-8 冰箱保存。至少可稳定三天以上。分离出血清或血浆的时间，最好不晚于血液标本采集后1h。标本采集 3.如果采血后不能迅速分离出血清或血浆，必须使用含氟化物或碘乙酸盐的抗凝管，抑制血细
4、胞对葡萄糖的酵解，稳定全血中的葡萄糖。若用抗凝血浆标本，最好用草酸钾-氟化钠抗凝。4.建议使用带分离胶的真空采血管，并及时分离血清，可防止血细胞对葡萄糖的酵解。参考区间 健康成年人血清葡萄糖浓度3.9-6.1mmol/L 成人危急值：血糖小于2.5mmol/L 血糖大于27.8mmol/L 儿童危急值：血糖小于1.7mmol/L 血糖偏高应做葡萄糖耐量试验 概述 随着人们生活水平的改善，健康意识的提高，健康体检者逐年增多,血糖升高者逐年增多。由于血糖受到很多因素的影响，如喝茶，饮酒，情绪，运动，饮食等诸多因素的影响，一次血糖检测升高不一定代表是糖尿病。如空腹血糖测定连续两次不超过7.1mmol
5、/l但是大于6.1mmol/l，应做葡萄糖耐量试验即OGGTT试验。血糖偏高应做葡萄糖耐量试验 方法是先空腹抽血2毫升测定空腹血糖值，再将75克葡萄糖溶于300毫升水中，五分钟内一次喝完，然后隔30、60、120和180各抽血2毫升，测定血糖的浓度 所形成的曲线即OGTT试验。血糖偏高应做葡萄糖耐量试验：参考值 空腹 6.106.95mmol/l 0.5h 9.45-10.55mmol/l 1h 8.9-10mmol/l 2h 6.70-7.78mmol/l 3h 6.10-6.95mmol/l 50岁以上不论男女每增加10岁。空腹血糖值增加0.6mmol/l，1小时值能增加0.6mmol/l
6、，2-3h增加0.17-0.28mmol/l，两点超过此标准者糖耐量减低，三点超过者可确诊为糖尿病。临床意义 糖耐量降低，血糖 增多幅度高于正常值，即血糖大于6.1mmol/l，恢复到空腹水平的时间延长。如糖尿病，甲亢，垂体机能亢进，肾上腺机能亢进，胰腺炎，胰腺癌，严重的肝脏疾病和糖原累积病等。糖耐量增高：空腹血糖值正常或偏低，口服葡萄糖后血糖升高不明显，曲线平坦，多见于内分泌功能低下，如甲状腺，肾上腺皮质功能低下，垂体功能低下。临床意义 1.迟滞性耐量曲线，口服葡萄糖后在正常时间内回复到空腹水平，但有一个明显增高的血糖峰值往往超过10mmol/l 以后可能发展为糖尿病。2.不论空腹是否正常范
7、围。OGTT试验2h后血糖值大于11.1mmol/l者，即可诊断糖尿病。3.如果任何时候血糖小于7.8mmol/l，空腹血糖小于6.1mmol/l，即可排除糖尿病。4.如果连续2次空腹血糖大于7.1mmol/l，餐后2小时血糖大于11.1mmol/l，即可诊断为糖尿病，可不做OGTT试验。注意事项 5.检查者应在早晨7：30到医院抽第一次空腹血，不然的话该试验做不完。6.病人在检查前一天晚饭后至第二天检查完之前不再进食任何食物和任何药物，只可饮水。7.如病人口服激素类药物，受体阻滞剂，氨茶碱类药物必须停药3天后再做试验。8.试验前禁用烟、酒、咖啡、茶等，保持情绪稳定。注意事项 9.抽完空腹血后
8、，马上饮用300毫升含75克葡萄糖水并以第一口糖水开始算起，准确记录抽血时间。10.如果病人近期有感染、创伤、酮症酸中毒等应暂缓做此试验。血糖检测有何意义血糖检测有何意义 众所周知，在检验中心抽血检查中一般都要求空腹采血，故在很多糖尿病人或是健康人群中普遍认为只要查空腹血糖就可以看出自己的血糖水平或控制情况，其实不然，研究表明餐后血糖尤其是餐后2小时血糖、糖化血红蛋白更能反映人体血糖水平及发生糖尿病并发症（如心血管病变）的危险性。下面将对三者分别做简要描述。血糖检测有何意义血糖检测有何意义 定义定义 1.空腹血糖(FBG):一般是指隔夜空腹8小时以上,早晨68点时取血测定的血糖。它反映了无糖负
9、荷时体内的基础血糖水平。正常空腹血糖值为3.9 mmol/L6.1mmol/L。2.餐后2小时血糖：正常饮食从进餐第一口开始算起2小时后采血测定的血糖值，它反映了机体胰岛素分泌情况及对高血糖水平的反应能力。正常餐后2小时血糖水平应78mmolL。血糖检测有何意义血糖检测有何意义 3.糖化血红蛋白：血中葡萄糖与红细胞相结合的产物，即红细胞中血红蛋白的糖基化部分，它能反映近2月内血糖持续的积累作用，即近2个月的血糖控制情况。正常参考值：4%6%。作用机制作用机制 2.1、正常个体的血糖峰值在开始进食后30分出现，在30分60 分钟达最大值，一般在23小时内恢复至餐前水平，即使血糖在3小时内恢复至餐
10、前水平后，摄入碳水化合物的吸收过程仍可至少持续至56小时。如果餐后2小时血糖增高则反映餐后早期胰岛素分泌缺陷，胰岛素峰值出现延迟(60分钟以后)。作用机制作用机制 由此可见，如果空腹血糖正常而餐后2小时血糖增高更能够反映早期的胰岛素分泌缺陷，利于糖尿病的预防及早期治疗，避免糖尿病并发症的发生如心血管疾病等。其机制是：早期胰岛素分泌缺陷，则可引起餐后显著高血糖，餐后高甘油三酯血症；导致餐后血游离脂肪酸得不到有效控制；另外，餐后高血糖刺激后期胰岛素分泌，导致高胰岛素血症。胰岛素峰值出现延迟不足以控制餐后血糖水平，这部分人群经常处于高血糖的毒性作用中，进一步加重胰岛素抵抗和胰岛B细胞分泌缺陷，直接损
11、害终末器官，导致急慢性并发症。作用机制作用机制 2.2、餐后高血糖的葡萄糖毒性作用机制现有的研究资料如下：(1)高血糖使胰岛细胞中的葡萄糖运载体Glut2减少，其mRNA亦减少；(2)B细胞内Ca2的动员及蛋白激酶C(PKC)的活性升高受阻；(3)细胞膜上的K 通道发生障碍；(4)B细胞内葡萄糖代谢发生障碍，己糖激酶活性降低；(5)胰岛素基因的转录受阻，胰岛素合成减少。有资料表明，餐后高血糖可增加肾血流和肾小球滤过率，增加视网膜血流，降低运动和感觉神经传导速度。由此可见，餐后高血糖是2型糖尿病起病、进展和恶化的重要驱动力。作用机制作用机制 另外，餐后高血糖还可通过多种作用机制导致大血管微血管并
12、发症的发生：(1)内皮细胞层通透性增高，使血循环内物质，如白蛋白漏出，于大血管可引起问质水肿，细胞增殖及基质产生增多；(2)影响血管舒缩的因子不平衡，舒血管的NO释放减少，缩血管的内皮素分泌增多，促使血管收缩；内皮细胞抗血栓形成能力、纤溶作用皆减弱，而血管内血凝作用加速；内皮细胞表面粘附物质的表达增多，加上血循环中单核细胞的改变，致后者在血管壁的粘附加强；基质蛋白质如 型胶原、纤维结合素的表达和分泌增多；产生异常的胶原基质使肾小球受损。三者与血管病变的关系三者与血管病变的关系 3.1、空腹血糖、餐后血糖与血管病变 芬兰一项研究高血糖与心血管危险的流行病学调查纳入29108例患者,平均随访8.8
13、年,结果表明:餐后2小时血糖水平与心肌梗死、脑卒中和肿瘤的发生率及死亡率成正相关，其可信性及相关性远远大于空腹血糖，因此可以认为餐后2小时血糖水平是心血管事件发生的独立危险因素，也是一个可信的预测指标。最近的一项“中国心脏调查”纳入我过7大城市52家研究中心对3513例冠心病患者调查显示：（1）冠心病患者中高血糖人数占总人数的80%;（2）单纯检测空腹血糖将漏诊80%的新诊断糖尿病的人群;（3）单纯检测空腹血糖将漏诊70%糖尿病前期人群。三者与血管病变的关系三者与血管病变的关系 3.2、糖化血红蛋白（GHbAlc）与血管病变 1999 2OO2年美国国家健康和营养调查(Health and N
14、utrition Examination SurveyNHNES)资料报道，在4O岁以上的被调查人群中，GHbA1c水平升高和PAD（外周动脉病变）的患病率有相关性，GHbAlc53%时就应该强化干预动脉粥样硬化的危险因素。有文献报道，GHbA1C每增加1%，PAD 的危险性增加28%；GHbAlc每降低1%，PAD危险性降低22%。GHbA1c水平与糖尿病性眼底病变有关，高血糖的眼底病变患者发生PVD的危险性更高。三者与血管病变的关系三者与血管病变的关系 冠心病合并T2DM组的糖化血红蛋白水平及冠脉狭窄程度积分均较单纯冠心病组及冠心病合并IGT组明显升高(P005)；冠心病合并IGT组明显高
15、于单纯冠心病组(P005)；相关分析显示，糖化血红蛋白水平与冠脉病变积分呈正相关(r=06447，P001)，在剔除了其他常见影响因素后这种相关性仍然存在。诸多研究表明，不论是在患者还是在健康人群中，都应更加重视餐后2小时血糖及糖化血红蛋白的检测，将餐后2小时血糖水平及糖化血红蛋白水平分别控制在7.8mmol/l.和6%以内，才能更好地防止心血管事件的发生。血糖仪与实验室检测血糖比对分析报告 根据卫生部办公厅关于印发医疗机构便携式血糖检测仪管理和临床操作规范（试行）的通知，按医务科的要求和部署，在我院床旁血糖与全自动生化分析仪进行比对实验，以便摸索经验，为其他科室血糖仪的比对提供模板。该实验已
16、于2012年3月26日完成，汇报如下：血糖仪与实验室检测血糖比对分析报告 1.材料与方法 1.1 仪器与试剂美国强生surestep 血糖仪，编号：L9045RB00400，配套试条代码009，均由强生公司提供。实验室为0lympus全自动生化分析仪，葡萄糖试剂由欧迪公司提供，标准号：4317，批号：201205。实验室血糖项目室内质控在控，省室间质控评比为优秀。血糖仪与实验室检测血糖比对分析报告 1.材料与方法 1.2 实验方案 本次实验部分参照美国临床实验室标准化委员会（CLSI）EP9-A2文件方案，采用临床标本，以实验室生化仪检测值为参考方法，比对分析血糖仪检测结果。具体为：抽取6份病人的静脉血各3ml于肝素钠抗凝管，充分混匀。所有病人的红细胞比容30%-60%，无严重的心脑血管疾病。从该抗凝血中取全血进行血糖仪检测，完成后立即送至检验科，3000转/分钟离心5分钟，取血浆检测血糖。血糖仪与实验室检测血糖比对分析报告 1.2.1极低值样本的获得：将静脉血样品置于温箱中孵育，使血糖酵解，即可获得血糖浓度2.8mmol/L的样品。1.2.2极高值样本的获得：在静脉血中加入适量的高渗