1、 血液细胞形态学检查血液细胞形态学检查 北京协和医院血液科北京协和医院血液科 葛昌文葛昌文 工作步骤工作步骤 1.登记登记(1)收到标本后，登记患者姓名、性别、年龄、病历号，并告知病人取报告的时间和日期；(2)标本要登记化验号及分类号、标本采取日期穿刺部位、标本来源（如：病房、门诊、外院）。.染色染色 (1)在玻片血膜头部标明姓名或编号，并将其平置于染色架上；(2)加瑞氏染液6-8滴覆盖全部血膜，随后加缓冲液(PH6.4)10-12滴，用洗耳球吹匀；(3)血片染色10-15min，骨髓片染15-20min(根据有核细胞的多少而定)，必要时用低倍镜观察染色效果；(4)手摇玻片数次，使染液渣上浮，
2、用自来水先缓后急冲去染液，晾干待检。3.镜检镜检 外周血涂片检查法 1.复习申请单的临床诊断、送检目的和要求。2.肉眼观察涂片血膜大小、厚薄程度、染色好坏。3.低倍镜检查 （1）涂片的厚薄及染色情况。（2）估计白细胞数（可大体核对WBC直接计数是否正确）。（3）了解白细胞大致分布及片尾部有无异常细胞、特大细胞及细胞团。（4）选择具有代表性的镜检区域（多介于涂片体尾之间，细胞分布均匀，互不重叠、挤压）。4.油镜检查油镜检查 (1)进行WBC分类计数：一般计数100个有核细胞(若WBC1.0109/L，WBC分类计数不足100个，则注明有核细胞少见，全片分类多少个WBC；特殊情况如骨髓移植后，则注
3、明有核细胞少，无法分类)，观察细胞形态、比例及有无巨大或异常细胞。(2)白细胞分类计数：计数中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞及单核细胞比例，注意各类细胞形态有无异常。(3)注意片尾部有无不成熟细胞或异常细胞(如中晚幼粒、有核红细胞、淋巴细胞、吞噬细胞、肿瘤细胞等)。(4)红细胞形态（群体、个体）及排列（重叠、缗钱状）(5)血小板数量、形态及聚集性。(6)寄生虫。5.外周血涂片报告单内容：外周血涂片报告单内容：(1)WBC 数及主要成分、各类白细胞比例及形态是否 正常。(2)有无不成熟白细胞、有核红细胞及异常细胞情况。(3)成熟红细胞大小、形态、色素状态(中心淡染、核 残余物、多
4、嗜性RBC)及排列等情况。(4)血小板数量、形态及聚集性。(5)寄生虫。骨髓细胞形态检查法 1.复习患者病历资料、实验室检查结果及治疗情况 2.肉眼观察 涂片在染色前均需用肉眼观察；以确定标本的取材、涂片是否“合格”，血膜厚薄，有无脂肪珠及“骨髓小粒”。3.低倍镜检查低倍镜检查 (1)取材、涂片、染色的好坏。(2)有核细胞多少(判定增生程度)及其分布；粒与红系 的比例及各阶段比例的初步印象。(3)寻找异常细胞如转移癌细胞等。(4)选择油镜检查区域：要求能代表此涂片细胞的基本情况，有核细胞多，分布均匀，形态舒展、清晰易辨认。4.油镜检查油镜检查 观察细胞形态及进行有核细胞分类计数。一般油镜观察区
5、域在涂片血膜的体尾交界部位，分类计数时标本上下移动，验证低倍镜检查所得的初步印象。通常计数 200个有核细胞，特殊情况可计数 400或 500个有核细胞，增生低下或有核细胞甚少时，可分类计数 100个有核细胞。在油镜观察中，通过血细胞工作站对有代表性的细胞区域采集图象并入库保存（见血细胞工作站操作程序）。具体内容如下：(1)骨髓有核细胞分类计数，以百分率(%)表示，计算各系所占百分比和粒红比例(M/E)。(2)粒系：计算粒系所占%及各阶段比例；观察核移向(左移、右移)及形态的改变(巨幼变、双核、P-H畸形、胞浆颗粒多少或有无)。(3)红系：计算红系所占%及各阶段比例；观察形态有无异常(巨幼变、
6、类巨幼变及双核、多核、核分裂等残余物)、多嗜性红细胞多少、成熟红细胞形态及排列等。(4)淋巴细胞及单核细胞比例及形态有无异常 (5)巨核系：外周血血小板数量正常时(100-300109/L),一般不做巨核细胞计数；当PLT500109/L时，应计数全片的巨核细胞数量，但无需分类；当PLT100109/L，要计数全片巨核细胞，分类50个巨核细胞(或换算成%)，并注明有无血小板生成。注意病理性巨核细胞(巨大异常巨核、亚小型、小型、微型巨核),计数100个有核细胞中的病理性小型、微型及亚小型巨核细胞的数量。注意血小板量与质(形态、大小、聚集性等)的改变。(6)非造血细胞的种类和数量：此类多在涂片尾部
7、或边缘处，分类计数结果可能比实际低。(7)异常细胞：如 转移瘤细胞、高雪氏细胞、N-P细胞、恶组细胞等。5.骨髓涂片检查报告单内容：骨髓涂片检查报告单内容：(1)取材涂片及染色情况。(2)骨髓增生程度及主要成分，一般用M/E表示。(3)粒系：增生情况及所占%，各阶段比例，核移向(左移、右移)形态发育与异常改变，嗜酸性及嗜碱性细胞情况。(4)红系:增生情况及所占%,各阶段比例，形态有无异常(如巨变、类巨幼变、分裂相、核残余物、双核、多核等)及成熟红细胞形态。(5)淋巴及单核细胞：数量和形态是否有异常。(6)巨核系：数量、分类及形态有无异常，产血小板情况；血小板形态和数量。(7)浆细胞：形态与数量
8、，有无不成熟或病理性浆细胞。(8)造血与非造血细胞岛及非造血细胞增生情况。(9)涂片中有无巨大异型及肿瘤细胞等。(10)寄生虫。(11)结论:诊断、印象和建议。附录附录:1.骨髓增生程度标准:增生度 标 准 红(无核)细胞 :有核细胞 增生极度活跃 增生明显活跃 增生活跃 增生尚活跃 增生低下 增生极度低下 1-5 :1 6-10 :1 11-20 :1 21-40 :1 41-100 :1 100以上 :1 2.骨髓细胞正常值骨髓细胞正常值:粒 系 原始 0-1.0 红 系 原始 0-0.5 淋巴系 原始 早幼 0.1-2.5 早幼 0-2.0 幼稚 0-0.6 中 性 中幼 3.18-13
9、.2 中幼 3.77-13.0 淋巴 8.4-32.4 晚幼 5.22-20.2 晚幼 3.44-10.0 其 他 组织 0-1.0 杆状 8.47-24.4 巨 核 系 原始 吞噬 0-0.1 分叶 6.12-25.0 幼稚 内皮 0-0.2 嗜酸性 早幼 颗粒巨 0-0.2 组碱 0-0.1 中幼 0-1.1 产板巨 组酸 0-0.1 晚幼 0-2.1 裸核巨 浆 0-1.2 杆状 0-1.1 小原 成纤 分叶 0-3.4 小幼 脂肪 0-0.1 嗜碱性 早幼 小巨 中幼 0-0.1 单核系 原始 晚幼 0-0.1 幼稚 杆状 0-0.1 单核 0-3.0 分叶 0-0.3 3.说明说明:(1)本室采用国联M99-M型医学图象工作站，参阅其使用手册。(2)本室骨髓分类采用全骨髓计数方法(ANC)，当红系大于50%时，采用非红细胞计数法(NEC)；(3)诊断标准采用张之南主编血液病诊断及疗效标准第二版，其中白血病及MDS的诊断采用FAB分型标准。