1、蔬菜农药残留的快速检测方法原理及检蔬菜农药残留的快速检测方法原理及检测标准测标准 1、目前农药在蔬菜中的残留问题、目前农药在蔬菜中的残留问题 农药是把“双刃剑”，对促进农业增产有极其重要的作用。但由于农药本身固有的化学属性和对其使用不当，导致农产品农药残留严重超标，严重危害到广大人民群众的身体健康。在我国农药中，70为有机磷农药，而在我国生产使用的有机磷农药中，70为剧毒、高毒类，而且较多是禁止在蔬菜作物上使用的。2、农药中毒事件常有报道、农药中毒事件常有报道，究其原因，究其原因 1.农产品不按规定的用药量、次数、方法或安全间隔期施药，或施用不允许在蔬菜上使用的剧毒、高毒农药；2.现在标准施行
2、的农药残留测定需要通过有机溶剂提取、净化和用大型分析仪器进行，无法对廉价的蔬菜进行随时随地或快速的检测而形成的监管不到位。重庆忠县复兴镇发生一起农药中毒事件重庆忠县复兴镇发生一起农药中毒事件 3人死亡人死亡11人住院人住院（2011年有机磷年有机磷农药中毒）农药中毒）安康安康1616村民农药中毒村民农药中毒 14户村民饮用了村里一口水井里的水，井水确实有些异味，下午4时许，已有村民出现身体不适症状。根据警方调查，中毒与井水有关 春蚕间接农药中毒事件 春蚕不吐丝，蚕农受到很大损失（花农中流行着一种叫可汗的农药,毒低效高.其中主要含有防治害虫的保幼激素）蔬菜喷杀虫剂忘告家人 毒倒自家娃 事发当天，
3、在自家种的蔬菜上喷洒了农药杀虫，后来有事外出忘记了叮嘱子女，结果下午三姐弟准备晚餐时，摘了些蔬菜几人炒着吃，不料就发生了中毒，上吐下泻 3、农药分类：、农药分类：按来源分类 *按化合物结构分类 无机化合物无机化合物 化学合成农药化学合成农药 生物源农药生物源农药 矿物源农药矿物源农药 有机合成化合物有机合成化合物 天然有机物天然有机物 抗生素抗生素 生物农药生物农药 有机氯化合物有机氯化合物 有机磷化合物有机磷化合物 拟除虫菊酯拟除虫菊酯 氨基甲酸酯氨基甲酸酯 杂环类化合物杂环类化合物 其它（苯氧羧其它（苯氧羧酸类、脲类化酸类、脲类化合物）合物）矿物源农药矿物源农药 有效成分有效成分起源于起源
4、于矿产矿产无机物无机物和和石油石油的的农药农药。代表有代表有硫酸铜硫酸铜、硫磺硫磺、石硫合剂石硫合剂、磷化铝磷化铝、磷化锌磷化锌和和石油乳剂石油乳剂等等 生物源农药生物源农药 包括植物源农药和动物源农药及微生物源农药。植物类别有植物毒素、植物内源激素、植物源昆虫激素、拒食剂、引诱剂、驱避剂、绝育剂、增效剂、植物防卫素、异株克生物质等。动物资源开发的农药包括动物毒素、昆虫激素、昆虫信息素和天敌等。按作用方式分类按作用方式分类 胃毒性农药（敌百虫、敌敌畏、甲胺磷、马拉硫磷）触杀性农药 （对硫磷、敌敌畏、甲胺磷、马拉硫磷）内吸性农药 （乐果、甲胺磷、氧乐果、久效磷）薰蒸性农药 （溴甲烷、磷化铝、敌敌
5、畏）特异性农药 （乙烯利、赤霉素、灭幼脲）4、目前所使用的农药按其化学结构大致可、目前所使用的农药按其化学结构大致可分为以下几类：分为以下几类：有机氯类；有机磷类；氨基甲酸酯类；拟除虫菊酯类 杂环类化合物 其它（苯氧羧酸类、脲类化合物）等。我国常用农药我国常用农药 A A、有机磷类、有机磷类 滴滴畏、甲拌磷、乐果、对氧磷、对硫磷、喹硫磷、伏杀硫磷、敌百虫、氧化乐果、磷胺、甲基嘧啶磷、马拉硫磷、辛硫磷、亚胺硫磷、甲胺磷、地亚农、甲基毒死蜱、毒死蜱、倍硫磷、杀扑磷、乙酰甲胺磷、巴胺磷、甲基对硫磷、杀螟硫磷、异柳磷、乙硫磷等 我国常用农药我国常用农药 B B、有机氯类、有机氯类 -666666、-6
6、66666、-666666、-666666、op op DDEDDE、pppp-DDEDDE、opop DDDDDD、pppp-DDDDDD、pppp-DDTDDT、opop-DDTDDT、异菌脲、五氯硝基苯、林丹、乙烯、异菌脲、五氯硝基苯、林丹、乙烯菌核利、三氯杀螨醇、功夫、氯硝胺、百菌清、菌核利、三氯杀螨醇、功夫、氯硝胺、百菌清、粉锈宁、甲氰菊酯、氯菊酯、氰戊菊酯、溴氰粉锈宁、甲氰菊酯、氯菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯等。菊酯等。我国常用农药我国常用农药 C、氨基甲酸酯类 涕灭威砜、涕灭威亚砜、灭多威、3-羟基呋喃丹、涕灭威、呋喃丹、甲萘威、叶蝉散、仲丁威、速灭威等 5.最大残留限量标准 最大残
7、留限量（Maximum Residue Limit，MRL）在农畜产品中农药残留的法定最高允许浓度，又称最高残留限量，以每千克农畜产品中农药残留的毫克数（毫克/千克）表示。目的：控制食品中过量农药残留以保障食用者安全，对超标的产品采取措施，即禁止食用。推行和指导合理用药，农产品监测超标时，表明未按规定用药。减少国际贸易纠纷，各国均制订本国的MRL。食品中农药最大残留限量食品中农药最大残留限量标准标准 GB2763-2014,规定了387种农药最高残留限量。国家标准作为一项加强农药管理的措施。其中，针对蔬菜、水果、茶叶等鲜食农产品农药残留超标多发、易发问题，新标准重点增加了蔬菜、水果等鲜食农产品
8、的限量标准。水果农药残留限量增加项，蔬菜（包括食用菌）农药最大残留限量增加项。6、高毒农药禁限用管理措施高毒农药禁限用管理措施 农业部、工业和信息化部、环境保护部、国家农业部、工业和信息化部、环境保护部、国家工商行政管理总局和国家质量监督检验检疫总工商行政管理总局和国家质量监督检验检疫总局于局于20112011年年6 6月月1515日发布第日发布第15861586号公告，决定号公告，决定对高毒农药采取进一步禁限用管理措施。对高毒农药采取进一步禁限用管理措施。.高毒农药禁限用管理措施 停止受理苯线磷、地虫硫磷、甲基硫环磷、磷停止受理苯线磷、地虫硫磷、甲基硫环磷、磷化钙、磷化镁、磷化锌、硫线磷、蝇
9、毒磷、治化钙、磷化镁、磷化锌、硫线磷、蝇毒磷、治螟磷、特丁硫磷、杀扑磷、甲拌磷、甲基异柳螟磷、特丁硫磷、杀扑磷、甲拌磷、甲基异柳磷、克百威、灭多威、灭线磷、涕灭威、磷化磷、克百威、灭多威、灭线磷、涕灭威、磷化铝、氧乐果、水胺硫磷、溴甲烷、硫丹等铝、氧乐果、水胺硫磷、溴甲烷、硫丹等2222种种农药新增田间试验申请、登记申请及生产许可农药新增田间试验申请、登记申请及生产许可申请；停止批准含有上述农药的新增登记证和申请；停止批准含有上述农药的新增登记证和农药生产许可证（生产批准文件）。农药生产许可证（生产批准文件）。高毒农药禁限用管理措施 撤销氧乐果、水胺硫磷在柑橘树，灭多威在柑橘树、撤销氧乐果、水
10、胺硫磷在柑橘树，灭多威在柑橘树、苹果树、茶树、十字花科蔬菜，硫线磷在柑橘树、黄苹果树、茶树、十字花科蔬菜，硫线磷在柑橘树、黄瓜，硫丹在苹果树、茶树，溴甲烷在草莓、黄瓜上的瓜，硫丹在苹果树、茶树，溴甲烷在草莓、黄瓜上的登记。登记。本公告发布前已生产产品的标签可以不再更改，但不本公告发布前已生产产品的标签可以不再更改，但不得继续在已撤销登记的作物上使用。得继续在已撤销登记的作物上使用。高毒农药禁限用管理措施 自自20112011年年1010月月3131日起，撤销（撤回）苯线磷、地虫硫日起，撤销（撤回）苯线磷、地虫硫磷、甲基硫环磷、磷化钙、磷化镁、磷化锌、硫线磷、磷、甲基硫环磷、磷化钙、磷化镁、磷化
11、锌、硫线磷、蝇毒磷、治螟磷、特丁硫磷等蝇毒磷、治螟磷、特丁硫磷等1010种农药的登记证、生种农药的登记证、生产许可证（生产批准文件），停止生产；产许可证（生产批准文件），停止生产；自自20132013年年1010月月3131日起，停止销售和使用。日起，停止销售和使用。根据以上情况，制定出有机磷和氨基甲酸酯类农药的快速检测方法，加强对农药残留的快速检测已成为十分必要的监管措施。7、农药残留主要的检测方法有两种：、农药残留主要的检测方法有两种：1、色谱检测法 色谱检测法用作农残定量分析，可为农药残留执法提供依据。色谱法（包括气相色谱、液相色谱、气质联用等）。优点：灵敏度高、准确、定性定量；缺点：成
12、本高、操作复杂、时间较长。7、农药残留主要的检测方法有两种：、农药残留主要的检测方法有两种：2、速测仪法 速测仪法只能作为农残定性分析，易于在基层推广等特点，是目前我国控制高毒农药残留的一种有效方法，也是目前国内和我省应用最为广泛的农药残留快速检测方法。A 速测仪法的主要优点：速测仪法的主要优点：1.该方法具有快速方便、前处理简单、成本较低等优点，适用于现场定性测定，特别适合在蔬菜生产基地、批发市场及农产品检测部门开展快速检测工作。2.该方法可对有农药残留的蔬菜进行粗筛，将一部分农药残留含量较高的蔬菜控制在市场之外，避免因农药残留发生中毒事件。B 速测仪法的主要缺点速测仪法的主要缺点:1.酶试
13、剂易失活，导致反应不稳定，检测结果误差较大，重复性不好，实际应用中的确认率大约为 60%70%左右；2.存在检测盲区，只能检测有机磷和氨基甲酸酯两类农药，不能检测有机氯类、菊酯和其它类别的剧毒农药；3.不适合检测葱蒜类、香菜、韭菜、番茄、胡萝卜、茭白、蘑菇、花椒等 14 种容易出现假阳性的农产品；8、农药残留速测法依据的标准、农药残留速测法依据的标准 中华人民共和国国家标准中华人民共和国国家标准 GB/T5009.1992003 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测 2003-08-11发布发布 2004-01-01实施实施 中华人民共和
14、国卫生部中华人民共和国卫生部 中国国家标准化管理委员会中国国家标准化管理委员会 发布发布 8、农药残留速测法依据的标准、农药残留速测法依据的标准 中华人民共和国农业行业标准中华人民共和国农业行业标准 NY/T 4882001 蔬菜上有机磷和氨基甲酸醋类蔬菜上有机磷和氨基甲酸醋类 农药残毒快速检测方法农药残毒快速检测方法 2001-06-01发布发布 2001-10-01实施实施 中华人民共和国农业部中华人民共和国农业部 发布发布 9、速测仪的检测方法有两种、速测仪的检测方法有两种:(NY/T 4882001 和和GB/T5009.199-2003)速测卡法（纸片法）酶抑制率法（分光光度法）10
15、、两种快速检测方法的技术原理 根据有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周围神经系统中的乙酰胆碱酯酶的活性造成神经传导介质乙酰胆碱的积累，影响正常传导，导致昆虫中毒致死的原理而设计。如果蔬菜中不含有机磷和氨基甲酸酯类农药，乙酰胆碱酯酶水解后，水解产物可与显色剂反应产生颜色。两种快速检测方法的技术原理 如果蔬菜中含可以抑制乙酰胆碱酯酶的活性的有机磷和氨基甲酸酯类农药，这种酶就不能被水解，从而无显色反应。在溶液中加入乙酰胆碱酯酶和显色剂，用此判断有机磷和氨基甲酸酯类农药残留是否存在。11、速测卡法（纸片法）、速测卡法（纸片法）纸片速测仪 插入速测卡 STARTSTART+SETSET-DISPD
16、ISP黄黄白白按按键键加热片加热片导导纸纸条条图2图2红红 11、速测卡法（纸片法）、速测卡法（纸片法）1.试剂试剂 1.1 固化有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯试剂的纸片(速测卡)。1.2 pH7.5缓冲溶液：分别取15.0g磷酸氢二钠(Na2HP04 12H2O)与1.59g无水磷酸二氢钾KH2P04，用500mL蒸馏水溶解。2仪器仪器 2.1常量天平 有条件时配备372恒温装置 速测卡法（纸片法）速测卡法（纸片法）3.分析步骤分析步骤 3.1整体测定法整体测定法 3.1.1选取有代表性的蔬菜样品选取有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土擦去表面泥土，剪成剪成1cm左右见方碎片左右见方碎片，取取5g放入带盖瓶中放入带盖瓶中，加入加入10mL缓冲溶液缓冲溶液，震摇震摇50次次，静置静置2min以上以上。3.1.2取一片速测卡取一片速测卡，用白色药片沾取提取液用白色药片沾取提取液，放置放置10min以上进行预反应以上进行预反应，有条件时在有条件时在37恒温装置中恒温装置中放置放置10min。预反应后的药片表面必须保持湿润预反应后的药片表面必须保持湿润。速测卡法（纸片法）速测卡法（纸片法）3.1.3将速