1、海军医学杂志 2022 年 12 月第 43 卷第 12 期 Journal of Navy Medicine，Vol.43，No.12，12 2022ICAM1 及 VEGF 在脑胶质瘤中的表达及其与临床预后的关系陆冠平，李瑛，陈晓武，张征军摘要 目的探讨细胞间黏附分子1（ICAM1）及血管内皮生长因子（VEGF）在脑胶质瘤中的表达及其与临床预后的关系。方法收集 2015 年 6 月至 2018 年 1 月广西壮族自治区南溪山医院手术切除的 85 例脑胶质瘤组织为观察组，25 例颅脑外伤患者的正常脑组织为对照组。对比 2 组标本中 ICAM1 及 VEGF 表达差异，分析肿瘤组织中 ICAM
2、1 及 VEGF 表达与各病理参数的相关性，绘制 KeplanMeier 生存曲线分析 ICAM1 及 VEGF 表达对生存预后的影响。结果观察组 ICAM1 及VEGF 高表达率较对照组显著升高（P0.05）。病理分级级、低分化患者 ICAM1 及 VEGF 高表达率明显高于分级和高、中分化患者（P0.05）。病理分级级、低组织分化、ICAM1 及 VEGF 高表达是影响脑胶质瘤患者预后状况的独立危险因素（P0.05）。ICAM1 高表达组、VEGF 高表达组患者平均生存时间较低表达组明显缩短（P0.05）。1.2治疗及随访方法所有观察组患者实施肿瘤切除术治疗，术后依据伤口恢复以及脑水肿情况
3、实施同步放疗及替莫唑胺化疗，放化疗开始时间在 24 周。所有患者术后每 3 个月电话随访并门诊复查，1 年后每 6 个月门诊复查，记录术后 3 年内患者生存预后情况。1.3检测方法术中留取脑胶质瘤组织标本及对照组正常脑组织标本，用 10%甲醛固定，经常规脱水、包埋、切片后4保存。通过光镜对初步处理切片进行观察，精准定位肿瘤组织病变显著部位，通过组织芯片仪精确定位肿瘤切片及健康脑组织标本，重新石蜡包埋；对新石蜡标本 4 m 切片连续切片 5 张，脱蜡水化、抗原修复 15 min，在双氧水-甲 短篇论著 基金项目 广西壮族自治区卫生和计划生育委员会自筹经费科研课题（Z20201206）作者单位 5
4、41002广西 桂林，广西壮族自治区南溪山医院神经外科通信作者 张征军,电子信箱：1384海军医学杂志 2022 年 12 月第 43 卷第 12 期 Journal of Navy Medicine，Vol.43，No.12，12 2022醇溶液中以 25孵育 12 min，再以 10%山羊血清封闭10 min；加入 1 100 一抗工作液 160 l（ICAM1、VEGF 兔抗人抗体）4孵育过夜；次日取出切片用缓冲溶液冲洗 4 次，加入二抗 140 l 在 25 孵育 20 min，再以缓冲溶液冲洗4 次；最后加入 DAB 在 25显色 10 min，缓冲液冲洗、苏木素复染、常规干燥、透明
5、、中性树脂封片，晾干后镜下观察，分析检测结果。结果判定：采取 Volm 评分法7判定，于染色良好的组织切片区域选取 5 个视野（400），综合染色强度及染色阳性细胞数分析结果：视野中未发现棕黄色反应记 0 分（阴性）；视野中胞浆呈轻微黄色，阳性细胞数20%记 1 分（弱阳性）；视野中胞质或胞核小簇聚集呈棕黄色，阳性细胞数55%记2 分（中阳性）；视野内胞核弥漫性呈深棕色，阳性细胞数55%记 3 分（强阳性）。其中以阴性和弱阳性为低表达，中阳性和强阳性为高表达。1.4统计学处理采用 SPSS 19.0 软件进行统计分析，计数资料以百分比（%）表示，采用 2检验或秩和检验；采用Cox 回归探讨影响
6、脑胶质瘤患者预后情况的危险因素，根据KeplanMeier 曲线分析 ICAM1、VEGF 表达与患者预后的关系。以 P0.05 为差异有统计学意义。2结果2.1ICAM1 及 VEGF 表达情况比较观察组脑胶质瘤组织中ICAM1 及 VEGF 高表达率显著高于对照组（P0.05）。见表 1。2.2不同病理参数患者 ICAM1 及 VEGF 表达情况比较病理分级级、低分化患者 ICAM1 及 VEGF 高表达率明显高于级和高中分化患者（P0.05）。见表 2。2.3影响生存预后的单、多因素分析以预后状况为因变量，各病理参数为协变量进行 Cox 回归分析，病理分级-级、低分化、ICAM1 及 V
7、EGF 高表达是影响脑胶质瘤患者预后状况的独立危险因素（P0.05）。见表 3。2.4ICAM1 及 VEGF 表达与生存预后的相关性KeplanMeier 生存曲线表明，ICAM1 高表达组、VEGF 高表达组患者平均生存时间较低表达组明显缩短，差异有统计学意义（2=5.863，P=0.015；2=5.452，P=0.020）。见图 1、2。表 1观察组与对照组患者脑胶质瘤组织中 ICAM1 及VEGF 表达情况比较 例（%）组别观察组对照组2值P 值例数8525ICAM1高表达61（71.76）4（16.00）24.8510.01低表达24（28.24）21（84.00）VEGF高表达66
8、（77.65）5（20.00）28.0530.01低表达19（22.35）20（80.00）注：ICAM1 为细胞间黏附分子1，VEGF 为血管内皮生长因子表 2不同病理参数脑胶质瘤患者 ICAM1 及 VEGF 表达情况比较 例（%）项目性别男女年龄50 岁50 岁肿瘤直径3 cm3 cm肿瘤部位大脑额叶颞叶顶叶病理分级级级组织分化高中分化低分化例数45403649374820392646395629ICAM1高表达(n=61)31（68.89）30（75.00）24（66.67）37（75.51）25（67.57）36（75.00）13（65.00）29（74.36）19（73.08）26
9、（56.52）35（89.74）35（62.50）26（89.66）低表达(n=24)14（31.11）10（25.00）12（33.33）12（24.49）12（32.43）12（25.00）7（35.00）10（25.64）7（26.92）20（43.48）4（10.26）21（37.50）3（10.34）2值0.3900.8010.5700.60311.4966.953P 值0.5320.3710.4500.7400.0010.008VEGF高表达(n=66)34（75.56）32（80.00）26（72.22）40（81.63）27（72.97）39（81.25）15（75.00）32
10、（82.05）19（73.08）29（63.04）37（94.87）38（67.86）28（96.55）低表达(n=19)11（24.44）8（20.00）10（27.78）9（18.37）10（27.03）9（18.75）5（25.00）7（17.95）7（26.92）17（36.96）2（5.13）18（32.14）1（3.45）2值0.2411.0590.8250.82912.3199.064P 值0.6230.3030.3640.6610.010.003注：ICAM1 为细胞间黏附分子1，VEGF 为血管内皮生长因子1385海军医学杂志 2022 年 12 月第 43 卷第 12 期
11、Journal of Navy Medicine，Vol.43，No.12，12 20223讨论脑胶质瘤是临床上较常见的神经系统恶性肿瘤，具有发病率高、致死率高和复发率高的特点，早期诊断和干预治疗对改善患者预后尤为重要8。脑胶质瘤的早期症状缺乏特异性，影像学检查仅能协助评估病灶大小、病变部位和颅内压迫等情况，无法明确判断病理分期9。病理学检查是肿瘤性疾病诊断的金标准，可为临床合理治疗提供基础，也是评估预后的重要标准10。ICAM1 是组织内皮细胞所分泌的一种跨膜糖蛋白，在细胞信号传导中起着一定作用，具有调控细胞及胞外基质之间的黏附性、调节组织细胞分化以及促进炎症反应等生理病理功能11。有研究证
12、实，ICAM1 在肺癌、胃癌、结肠癌等恶性肿瘤细胞中均存在高表达现象，且对肿瘤细胞的侵袭、扩散和免疫逃逸活动具有重要促进作用12。新血管生成与肿瘤的发展、转移、复发等存在密切关系，多种血管调节因子与肿瘤血管生成密不可分。VEGF 是已知的最强促血管生成因子，通过与其受体的相互作用，刺激血管内皮细胞增殖和迁移，促进血管的形成和增加血管通透性13。有学者认为，VEGF 作为肿瘤血管促生长因子，参与多种肿瘤疾病的发生及发展过程，同时也是影响患者预后的重要危险因素14-15。本研究结果显示，脑胶质瘤中 ICAM1 及 VEGF 高表达率高于正常脑组织，且脑胶质瘤病理分级级、低分化患者 ICAM1 及
13、VEGF 高表达率也分别高于分级和高中分化患者。提示 ICAM1、VEGF 共同参与脑胶质瘤的发生及发展过程，脑胶质瘤的病理级别越高，ICAM1 及VEGF 的阳性率也越高。ICAM1 过表达使免疫细胞的监视缺失，肿瘤细胞容易躲过免疫防御，从而促进肿瘤疾病的发生及发展；另外，ICAM1 的表达能增加肿瘤细胞黏附性，容易发生扩散转移等生物学行为。VEGF 可以促进肿瘤血管生成和增加血管通透性，不仅能为肿瘤细胞生长提供充足血运，还能为肿瘤细胞逃逸提供条件，增加肿瘤远端转移风险。随着医学科技的进步，显微外科手术、先进化疗药物以及伽马射线等被应用于脑胶质瘤的临床治疗，但由于脑胶质瘤侵袭性强、增殖快及复
14、发性高等特点，较多患者在经过正规治疗后生存预后依然很差16-17。脑胶质瘤的生物学机制复杂，涉及细胞信号传导、免疫分子学等多个方面，多种因子参与脑胶质瘤的恶化进程，检测相关细胞因子水平变化对评估患者预后和指导临床治疗具有重要意义18。本研究经 Cox 回归模型分析发现，除了高病理分级、低组织分化外，肿瘤组织中 ICAM1 及 VEGF 高表达同样是影响脑胶质瘤患者生存状况的独立危险因素。另外，KeplanMeier 生存曲线显示，ICAM1 高表达组、VEGF 高表达组患者平均生存时间较低表达组均明显缩短，提示肿瘤组织中 ICAM1、VEGF 的表达状况与脑胶质瘤患者预后密切相关。ICAM1
15、及 VEGF 高表达是影响脑胶质瘤患者预后的重要因素，联合分析肿瘤组织中 2 项指标表达状况，既考虑到肿瘤细胞黏附、侵袭性，又兼顾肿瘤内血管生成活性，为更好判断病情和评估预后提供依据。值得注意的是，本研究仅分析 ICAM1、VEGF 在脑胶质瘤中的表达，及其与临床预后的关系，今后可建立预后相关模型，以 ICAM1、VEGF 为靶点，设计肿瘤特异性治疗方案，为临床上脑胶质瘤的靶向治疗提供新的方向。综上所述，ICAM1、VEGF 在脑胶质瘤中的表达显著增强，且随着病理程度的升高，ICAM1、VEGF 阳性表达率也增高，检测病理组织中 ICAM1、VEGF 表达情况有助于判断脑胶质瘤病理特征和评估患
16、者生存预后。表 3影响脑胶质瘤患者预后的单、多因素分析项目性别年龄肿瘤直径肿瘤部位病理分级组织分化ICAM1VEGF单因素分析OR 值0.9760.8060.6561.0260.1400.1720.1980.13395%CI0.4312.2130.3491.8610.2781.5480.2962.9350.0480.4130.0710.4200.0490.8560.0180.985P 值0.9540.6130.3360.9030.010.010.0290.048多因素分析OR 值0.2530.2600.1790.06495%CI0.0810.7980.1000.6780.0410.7800.0090.484P 值0.0190.0060.0220.008注：ICAM1 为细胞间黏附分子1，VEGF 为血管内皮生长因子注：ICAM1 为细胞间黏附分子1图 1不同 ICAM1 表达情况 KeplanMeier 生存曲线注：VEGF 为血管内皮生长因子图 2不同 VEGF 表达情况 KeplanMeier 生存曲线1386海军医学杂志 2022 年 12 月第 43 卷第 12 期 Journ