1、论著 和 在良性脑膜瘤组织中的表达分析及临床意义李红旗，戢翰升，王小波湖北医药学院附属随州医院：病理科；神经外科；转化医学研究中心，湖北随州 摘要：目的分析良性脑膜瘤组织中 结合蛋白（）、相关转录因子（）的表达水平及临床意义。方法将 年月至 年月该院收治的 例良性脑膜瘤患者纳入研究。采用反转录实时荧光定量 （）检测患者良性脑膜瘤组织和瘤旁组织中 、的表达水平，对良性脑膜瘤组织中 与 表达水平的相关性进行分析。分析、的表达述评与良性脑膜瘤患者临床病理参数的关系。采用 生存曲线分析 、表达水平对良性脑膜瘤患者预后的影响。采用单因素和多因素 回归分析良性脑膜瘤患者复发的独立危险因素。结果与瘤旁组织相
2、比，良性脑膜瘤组织中 、的表达水平均明显增加（、，）。良性脑膜瘤组织中 和 的表达水平呈正相关（，）。、在良性脑膜瘤组织中的表达水平与肿瘤最大径、有无瘤周水肿及 指数有关（）。高表达及 高表达的良性脑膜瘤患者的复发率均较高（）。高表达、高表达、肿瘤最大径、有瘤周水肿和 指数是良性脑膜瘤患者复发的独立危险因素（）。结论 和 是预测良性脑膜瘤患者复发的参考指标。关键词：良性脑膜瘤；结合蛋白；相关转录因子；临床病理参数 ：中图法分类号：文章编号：（）文献标志码：，；，：（）（）（），（，）（，），（）（），（）国际检验医学杂志 年月第 卷第期 ，基金项目：湖北省教育厅科学技术研究计划（）。作者简介：
3、李红旗，女，主治医师，主要从事神经肿瘤方面的研究。：；脑膜瘤是中枢神经系统最常见的原发性肿瘤之一，占所有原发性脑肿瘤的 以上。根据世界卫生组织（）的分级标准，脑膜瘤在组织学上分为级，其中级和级脑膜瘤具有侵袭性，为恶性脑膜瘤，的脑膜瘤为级，是良性脑膜瘤。然而，的级脑膜瘤在完全切除后会复发，这表明需要做进一步的风险分层来指导良性脑膜瘤患者随访期间的管理。结合蛋白（）是一种锌指转录因子，对早期胚胎的心脏和肠道发育非常重要，具有组织特异性，基因敲除小鼠由于心脏和肠道缺陷在胚胎发育早期死亡。研究显示 表达异常与肺癌、胃癌和鼻咽癌等肿瘤的发生、发展密切相关，既可以充当抑癌因子，又可以充当促癌因子。符方旭等
4、报道 在恶性脑膜瘤中阳性表达增加，并与患者预后不良相关。相关转录因子（）也称为核心结合因子，已被证明 是 成 骨 细 胞 分 化 所 需 的 主 要 转 录 因 子，缺 乏 的小鼠由于成骨细胞生成缺陷而无法进行骨化。研究表明 在乳腺癌、胃癌和胰腺癌等肿瘤中发挥促癌作用，能促进细胞增殖和转移，增强化疗药物抵抗。但目前 和 在良性脑膜瘤中的表达情况和临床价值尚不清楚，因此本研究分析了良性脑膜瘤 和 的表达情况，对 和 的表达与患者预后的关系进行了探讨，现报道如下。资料与方法一般资料将 年月至 年月本院收治的 例良性脑膜瘤患者纳入研究，男 例、女性 例；年龄：岁 例、岁 例；肿瘤部位：额部 例、蝶骨
5、嵴 例、岩骨斜坡 例、其他 例；肿瘤最大径：例、例；组织类型：上皮型 例、纤维型 例、过渡型 例、其他 例，瘤周水肿：有 例、无 例，指数：例，例。纳入标准：（）患者术前未进行化疗或放疗；（）患者为首次手术切除；（）手术后经病理切片明确诊断为 级良性脑膜瘤；（）具备完整的临床病理资料和随访资料。排除标准：（）合并严重的器质性或精神性疾病；（）合并其他原发性肿瘤；（）术后并发症死亡者。研究经本院伦理委员会审批通过，纳入研究的患者均对本研究知情同意。仪器与试剂 试剂购自美国 公司；无水乙醇、异丙醇和氯仿购自天津风船化工试剂有限公司；反转录和实时荧光定量聚合酶链反应（）试 剂 购 自 日 本 公 司
6、；和 的引物均由上海生工生物科技有限公司合成；枪头和无 酶 管购自美国 公司；扩增仪器购自美国 公司；仪购自美国 公司。方法 和 表达水平的检测采用 法提取手术切除的良性脑膜瘤和瘤旁组织的总，紫外分光光度法检测 纯度 吸光度（）比值 符合要求 和浓度。采用反转录试剂盒将 反转录为 。采用 检测组织中 和 的表达水平。引物序列如 下，：，：；：，：；内 参 ：，：。采 用 体 系：，上下游引物各，蒸馏水。反应条件：预变性；变性，退火，共循环 次。采用 计算、的相对表达水平。随访资料收集对纳入研究者进行年随访，对患者复发情况进行记录。统计学处理采用 软件进行数据分析。符合正态分布的计量资料以表示，
7、两组间比较采用独立样本检验，多组间比较采用方差分析，进一步两两比较采用 检验。采用 相关分析良性脑膜瘤组织中 和 表达水平的相关性。绘制 生存曲线，采用 检验分析 和 的表达水平对良性脑膜瘤患者预后的影响。采用单因素和多因素 回归分析良性脑膜瘤患者复发的独立危险因素。以 为差异有统计学意义。结果良性脑膜瘤中 和 的表达水平良性脑膜瘤及瘤旁组织中 的相对表达水平分别为 、，的相对表达水平分别为 、。与瘤旁组织相比，良性脑膜瘤组织中 、的表达水平均明显增加（、，）。良性脑膜瘤组织中 和 表达水平的相关性 相关分析显示：良性脑膜瘤组织中 和 的表达水平呈正相关（，）。、表达水平与良性脑膜瘤患者临床病
8、理参数之间的关系、在良性国际检验医学杂志 年月第 卷第期 ，脑膜瘤组织中的表达水平与性别、年龄、肿瘤部位、组织类型和肿瘤分期无关（），而与肿瘤最大径、有无瘤周水肿及 指数有关（），见表。表 和 在良性脑膜瘤组织中的表达水平与临床病理参数之间的关系临床病理参数 性别 男 女 年龄 岁 岁 肿瘤部位 额部 蝶骨嵴 岩骨斜坡 其他 肿瘤最大径 组织类型上皮型 纤维型 过渡型 其他 瘤周水肿有 无 指数 良性脑膜瘤组织中、表达水平与患者预后的关系随访资料显示：纳入研究的 例患者中，复 发 例，年 复 发 率 为 （）。高表达组和 低表达组的年复发率 分 别 为 （）和 （）。高表达组的年复发率显著高于
9、 低表达组（，）；高表达组和 低表达组年复发率分别为 （）和（），高表达组的年复发率显著高于 低表达组（，）。见图。单因素和多因素 回归分析良性脑膜瘤患者复发的危险因素单因素和多因素 回归分析显示：高表达、高表达、肿瘤最大径、有瘤周水肿和 指数是良性脑膜瘤患者复发的独立危险因素（），见表。注：为 表达水平对良性脑膜瘤患者预后的影响；为 表达水平对良性脑膜瘤患者预后的影响。图 生存曲线分析 、表达水平高低对良性脑膜瘤患者预后的影响国际检验医学杂志 年月第 卷第期 ，表 回归分析影响良性脑膜瘤患者预后的独立危险因素临床病理参数单因素分析 多因素分析 （高表达 低表达）（高表达 低表达）性别（男性
10、女性）年龄（岁 岁）肿瘤部位（额部蝶骨嵴岩骨斜坡 其他）肿瘤最大径（）组织类型（其他 上皮型纤维型过渡型）瘤周水肿（有 无）指数（）注：表示该项无数据。讨论脑膜瘤的处理方式选择包括观察、手术切除和放射治疗。研究显示，即使是良性脑膜瘤也可能复发，其长期随访中的复发率高达，对于复发的患者经常需要额外的手术治疗或补救性地进行放射治疗，预后不良。因此，预测良性脑膜瘤复发的能力是良性脑膜瘤临床管理的关键组成部分。有研究表明一些差异性的分子表达与脑膜瘤的复发和进展有关，例如端粒酶反转录酶（）启动子突变、甲基化或组蛋白 缺失等，提示研究脑膜瘤进展中发生改变的分子可能对监测良性脑膜瘤复发具有重要价值。家族属于
11、锌指转录因子家族，其在细胞增殖和分化中发挥重要作用。其中 以高度动态的方式与共有序列结合，可以在器官发生过程中调节多种靶基因的表达，被认为是调控细胞命运的关键控制器。（）的错义突变导致小鼠肺结构异常和死胎，但是在人类肺癌标本中发现了 启动子的高频甲基化，经表观遗传修饰后沉默，有抑癌作用。等报道 在鼻咽癌组织和细胞系中表达上调，并与肿瘤大小、转移和预后不良有关，促进鼻咽癌细胞的增殖和转移能力，表明 在肿瘤的恶性进展中具有功能多样性，在不同的肿瘤中可能发挥相反的作用。研究报道，在脑膜瘤组织中的阳性表达率增加，并且在 分级较高及颅外转移的脑膜瘤组织中阳性表达率更高，并且是恶性脑膜瘤患者预后不良的危险
12、因子。大多数脑膜瘤是良性的，对良性脑膜瘤的预后判断是否具有指导价值还不清楚。本文研究结果显示，脑膜瘤组织中 的表达水平显著高于瘤旁组织（）。同时，在肿瘤最大径、有瘤周水肿及 指数的良性脑膜瘤患者中 的表达水平较高（）。等报道 在鼻咽癌中表达上调，并通过调节 信号通路促进上皮间质转化和转移能力。等 报道在胰腺癌中 与 相互作用激活 信号通路促进肿瘤的进展。及 信号通路在正常发育过程中发挥重要作用，同时在肿瘤中也处于激活状态，均促进肿瘤的恶性进展，因此笔者推测 在 良 性 脑 膜 瘤 中 可 能 通 过 调 控 或 等信号通路促进肿瘤的复发，但是本课题组尚未对此进行研究，仍需后续在细胞水平进行实验
13、验证及探讨。本研究进一步分析发现 高表达的良性脑膜瘤患者复发率较高，是患者复发的独立危险因素，表明 可作为良性脑膜瘤预后判断的参考指标。有研究显示，和 共定位，并且 通过在 启动子和增强子处维持染色质开放，上调 表达水平，从而调控成人骨的形成。在乳腺癌和胃癌等多种肿瘤的疾病进展中发挥关键作用，促进肿瘤细胞的增殖和转移。在胃癌早期高表达，并与患者临床病理特征相关，是影响胃癌患者预后的独立危险因素。然而，在良性脑膜瘤中的作用尚未阐明。本文研究结果显示：脑膜瘤组织中 的表达水平显著高于瘤旁组织（），提示 参与了脑膜瘤的发生、发展，可能与 的磷酸化水平增高相关，有研究报道 磷酸化后其活性增加促进乳腺癌
14、细胞的侵袭。本研究结果中，在肿瘤最大径、有瘤周水肿及 指数的良性脑膜瘤患者中的表达水平较高（），与 在胃癌中的研究具有一致性，在胃癌中 通 过 调 节 相 关 转 录 调 节 因 子（）发挥促癌作用。作为 信号通路的关键基因，在脑膜瘤的相关研究中被报道为促癌基因，而 也调控 信号通路，因此 可能通过结合并调控 的表达，激活 信号通路促进良性脑膜瘤的进展。同时，本研究结果显示良性脑膜瘤组织中 和 的表达呈正相关，也能辅助证实该结论，但是具体的国际检验医学杂志 年月第 卷第期 ，作用机制还需后续进一步研究。本研究结果发现，高表达的良性脑膜瘤患者复发率较高，并且 高表达是良性脑膜瘤患者复发的独立危险
15、因素，表明检测 的表达水平有助于良性脑膜瘤患者的随访管理。此外，本研究还显示肿瘤最大径、有瘤周水肿及 指数均是良性脑膜瘤患者复发的独立危险因素，与 等 的研究具有一致性。综上所述，和 均在良性脑膜瘤中表达上调，并在肿瘤最大径、有瘤周水肿及 指数的患者中表达水平更高，两者都是良性脑膜瘤复发的独立危险因素。参考文献 ，：，（）：，：，：，（）：，（）：，（）：符方旭，李庆志，王栋恶性脑膜瘤组织中转录因子结合蛋白、微小 表达水平及其对预后影响创伤与急危重病医学，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，：，（）：，（）：，（）：，（）：胡专华 通过 信号影响恶性脑膜瘤细胞增殖和侵袭的研究 南昌：南昌大学，（）：（收稿日期：修回日期：）（上接第 页），（）：，（）：，（）：，：，（）：，（）：，（）：（收稿日期：修回日期：）国际检验医学杂志 年月第 卷第期 ，