1、现代消化及介入诊疗2022 年 第27 卷 第12 期Modern Interventional Diagnosis and Treatment in Gastroenterology 2022，Vol27，No121509论 著DLX2、Ki-67 在结肠腺瘤 癌进程中的表达及临床意义程永莉1，3，邓晓钟2，刘欣1，史海涛1，姜丽红3，张胜利2，冯文华2，彭安海3【摘要】目的通过分析 DLX2、Ki-67 在结肠增生性息肉、结肠腺瘤及结肠癌的表达情况，探讨上述指标在结肠腺瘤 癌进程中的临床意义，为结肠早期病变的监测、筛查提供依据。方法:收集西安某医院 96 例结肠息肉及结肠癌患者，其中结肠增
2、生性息肉 22 例，结肠腺瘤 43 例，结肠癌 28 例。采用免疫组织化学染色方法，检测结肠增生性息肉、结肠腺瘤、结肠癌组织中DLX2 和 Ki-67 的表达情况，并比较差异。结果:DLX2 在结肠增生性息肉、结肠腺瘤、结肠癌的表达率分别为 22.7%、45.2%和53.5%，三者之间比较差异有统计学意义(P 0.05)。Ki-67 在结肠增生性息肉、结肠腺瘤、结肠癌的表达率分别为 22.7%、31.0%和 67.8%，三者之间比较差异有统计学意义(P 0.05)。DLX2 在结肠腺瘤中的表达高于增生(P 0.001);DLX2、Ki-67 在结肠高级别腺瘤组织中的表达高于低级别腺瘤(P 0.
3、05)，在结肠癌组织中的表达高于结肠腺瘤性息肉(P 0.001)。DLX2 与 Ki-67 在低级别腺瘤、高级别腺瘤和结直肠癌组织中的表达呈正相关关系(P 0.001)。结论:DLX2 和 KI-67 在结肠增生性息肉、结肠腺瘤、结肠癌中表达逐渐升高，且与结肠息肉异型增生程度有关，异型增生程度越高，其表达越高。DLX2、Ki-67 与细胞增殖有关，可能共同参与结肠腺瘤癌变、结肠腺瘤 癌序列进程，有望成为监测结肠腺瘤病变程度及恶性潜能的分子学标志物。【关键词】结肠息肉;癌变;DLX2;KI-67中图分类号:574文献标志码:ADOI:10 3969/j issn 1672 2159 2022 1
4、2 004作者单位:1 710004 西安交通大学第二附属医院消化内科;2 710100 西安航天总医院消化内科;3 710118 西安市长安区医院通信作者:刘欣，E-mail:docliuxin126 com基金项目:西安市科技项目(2020yb81)Expression and clinical significance of DLX2 and Ki-67 in colorectal adenoma-carcinoma progressionCHENG Yong-li1，DENG Xiao-zhong2，LIU Xin1，SHI Hai-tao1，JIANG Li-hong3，ZHANG
5、Sheng-li2，FENG Wen-hua2PENG An-hai31 Department of Gastroenterology，the Second Affiliated Hospital of Xian Jiaotong University，Shanxi Province，710004;2 Departmentof Gastroenterology，Xian Aerospace General Hospital，Xian，710100;3 Xian Changan District Hospital，Shanxi Province，710118【Abstract】Objective
6、To analyze the expression of DLX2 and Ki-67 in colonic hyperplastic polyps，colonic adenomas and coloncancer，and to explore the clinical significance of the above indicators in the process of colonic adenoma-carcinoma sequence，so as toprovide basis for the monitoring and screening of early colonic le
7、sions MethodsA total of 93 patients with colonic polyps and coloncancer were collected from a hospital in Xian，including 22 with hyperplastic polyps，43 with colonic adenomatous polyps and 28 withcolon cancer Immunohistochemical staining was used to detect the expressions of DLX2 and Ki-67 in hyperpl
8、astic polyps，colorectaladenomas and colon cancer tissues，and the differences were compared esultsThe expression rates of DLX2 in hyperplastic polyps，adenomatous polyps and colon cancer were 22.7%，45.2%and 53.5%，respectively，and the difference among them was statisticallysignificant(P 0.05)The expres
9、sion rates of Ki-67 in hyperplastic polyps，adenomatous polyps and colon cancer were 22.7%，31.0%and 67.8%，respectively，and the differences among them were statistically significant(P 0.05)The expression of DLX2 incolorectal adenomatous polyps was higher than hyperplastic polyps(P 0.001)The expression
10、s of DLX2 and Ki-67 in high-gradecolon adenoma were higher than those in low-grade colon adenoma(P 0.05)，and those in colon cancer were higher than those incolorectal adenomatous polyps(P 0.001)DLX2 was positively correlated with Ki-67 expression in low-grade adenoma，high-gradeadenoma and colorectal
11、 cancer(P 0.001)ConclusionDLX2 and Ki-67 are related to cell proliferation，and may participate in thecarcinogenesis of colon adenoma and the progression of colon adenoma-carcinoma sequence together，which is expected to become1510现代消化及介入诊疗2022 年 第27 卷 第12 期Modern Interventional Diagnosis and Treatmen
12、t in Gastroenterology 2022，Vol27，No12molecular markers for monitoring the degree of lesion and malignant potential of colon adenoma【Key words】Colon polyp;Canceration;DLX2;Ki-67结肠癌(colon cancer，CC)是消化系统常见恶性肿瘤，全球每年有超过 100 万人患结肠癌。近年来结直肠癌发病率逐年升高，已成为男性第 3 位、女性第 2 位的高发恶性肿瘤，且发病人群逐渐年轻化1 2。目前研究表明约 80%的结直肠癌起源
13、于结肠腺瘤，癌变率为 17.2%，被称为“腺瘤 癌序列”3 7。如果通过筛查高危人群，早期识别恶变潜能较高或异型增生程度较高的结肠腺瘤，并通过内镜下进行切除，则可以控制并减少结肠癌的发生率7。因此寻找一种评估及预测结肠腺瘤恶变潜能或异型增生程度的分子标志物尤为重要。distal-less 同源盒(distal-less homeobox，DLX)基因家族是同源盒基因家族的亚家族，同源盒转录因子基因 2(DLX2，distal-less homeobox2)是 DLX 家族中的一员6 9，既往研究表明 DLX2 表达增加与急性髓性白血病、淋巴瘤、肝癌、前列腺癌、胶质瘤、卵巢癌、乳腺癌、胃癌、结肠
14、癌的发展进程密切相关，能促进肿瘤细胞的增殖、肿瘤生长和转移8 14。Ki-67 最初在霍奇金淋巴瘤细胞核中发现，其在分裂细胞中高度表达，在静息细胞中下调17。因此 Ki-67 在临床中被广泛用于多种癌症的分级，在大型癌症队列中具有重要的评估恶性肿瘤预后的价值17。既往研究表明 DLX2、Ki-67 参与肿瘤细胞的生长及增殖，并且肿瘤细胞不可控增殖是恶性肿瘤发生、发展的主要原因，然而 DLX2、Ki-67 与结肠腺瘤 癌序列的关系尚不明确，我们研究 DLX2、Ki-67 在结肠增生性息肉、结肠腺瘤、结肠癌中的表达情况，从细胞增殖基因调控及细胞增殖过程方面，了解结肠腺瘤 癌序列过程中细胞增殖情况，
15、并探讨DLX2、Ki-67 是否可以成为一种监测和早期筛查具有恶变潜能或异型增生程度较高的结肠腺瘤的分子标志物，对研究结肠腺瘤癌变过程及结肠癌发病机制具有重要作用。1资料与方法1 1组织标本收集西安航天总医院 96 例结肠息肉及结肠癌患者，其中结肠增生性息肉22 例，结肠腺瘤44 例，结肠癌 30 例。采用免疫组织化学染色方法，检测结肠增生性息肉、结肠腺瘤、结肠癌组织中 DLX2 和 Ki-67 的表达情况进行检测，用户统计学方法比较差异，并与分析与临床资料之间的关系，探讨其临床意义。1 2方法所有活检标本均分别作 HE 染色(图 1)和免疫组织化学染色(图 2)。常规 HE 染色，观察结肠腺
16、瘤、结肠癌的病理形态。采用免疫组化法分别标记 DLX2、Ki-67，主要试剂鼠抗人的 DLX2 多克隆抗体、鼠抗人 Ki-67 抗体。按结肠增生性息肉、结肠腺瘤不典型增生程度(低级别腺瘤、高级别腺瘤)、结肠癌分化及转移程度等分别进行表达对比。操作步骤按说明书进行，DLX2、Ki-67 用柠檬 5 min，滴加 DLX2 和 Ki-67 抗体，室温或37 孵育1 2 h 或4冰箱过夜，滴加通用型 IgG抗体-HP 多聚体，室温或 37 孵育 15min，DAB 显色，阳性显色为棕黄色，苏木精复染，中性树胶封片，BPS 代替第一抗体作为阴性对照组。1 3判定标准判定标准参照 1996 年全国免疫组织化学技术与诊断标准化专题研讨会意见，用普通显微镜选取 6 个视野，然后在高倍视野下进行观察。Ki-67 染色定位于细胞核15，DLX2 染色定位于胞核与胞浆。每张切片在显微镜下选取 6 个视野中的3 个视野，按照阳性细胞所占百分比评分，计算阳性率。阳性细胞数占计数细胞的百分率50 为阳性，50 为阴性。染色结果均有 2 位副主任医师以上的病理医师用双盲法进行评估。1 4统计学处理采用 SPSS