1、论著临床研究第一作者简介：靳杯，硕士，主治医师，研究方向：小儿普外及小儿肿瘤。蛋白在小儿肾母细胞瘤中的表达及临床意义靳 杯 张建安 王 敏 李新房 张风华（河北省邯郸市中心医院小儿外科，邯郸市）【摘要】目的 探讨溶质载体家族 成员（）蛋白在小儿肾母细胞瘤（）中的表达情况及其临床意义。方法 选取 例 患儿作为研究对象。取手术切除的癌组织及癌旁组织，采用免疫组织化学法检测组织中 蛋白的表达情况。随访 年并记录 患儿存活情况。比较癌组织与癌旁组织中 蛋白的表达情况，以及不同临床病理特征 患儿癌组织中 蛋白的表达情况。分析癌组织中不同 蛋白表达情况的 患儿的预后差异，以及 患儿预后的危险因素。结果 患
2、儿癌组织中的 蛋白阳性表达率高于癌旁组织（）。肿瘤直径、肿瘤分期为 期的 患儿癌组织中 蛋白阳性表达率均分别高于肿瘤直径 、肿瘤分期为 期的 患儿（均 ）。癌组织中 蛋白阳性表达的 患儿 年生存率低于阴性表达的 患儿（分别为、，）。单因素 回归分析显示，肿瘤直径、肿瘤分期、癌组织中 蛋白表达情况均是影响 患儿预后的因素（均 ）；多因素 回归分析显示，癌组织中 蛋白阳性表达是 患儿预后不良的独立危险因素（）。结论 患儿癌组织中 蛋白呈高表达，蛋白阳性表达与 患儿的病情发展及预后有关。检测 蛋白的表达情况对于 患儿的病情监测及预后评估具有重要意义。【关键词】肾母细胞瘤；溶质载体家庭 成员；儿童；预
3、后【中图分类号】【文献标识码】【文章编号】（）：，（，）【】（）（），（），（）（，），（）；，（），【】，肾母细胞瘤（，）是小儿较为常见的腹部恶性肿瘤，属于胚胎恶性混合瘤，在婴幼儿时期多发。目前通过手术、放疗及化疗治疗 可获得较为理想的效果，但部分患儿的治疗效果仍较差，因此寻找与 有关的标志物并探讨其与 预后的关系至关重要。溶质载体家族 成员（，）蛋白在多种癌症中呈高表达，参与多种癌症的发生、发展过程，与多种恶性肿瘤的生物学行为、增殖、转移等关系密切。然而 蛋白在 患儿癌组织中的表达情况尚不清楚。因此，本研究探讨 蛋白在 患儿癌组织和癌旁组织中的表达情况及其与患儿预后的关系。资料与方法 临床
4、资料 选取 年 月至 年 月我院收治的 例 患儿作为研究对象，其中男童例、女童 例，年龄 （）岁。留取手术切除的癌组织及癌旁组织（距离肿瘤边缘 ）进行检测。患儿纳入标准：（）影像学、实验室检查及术后病理确诊为；（）首诊为；（）在手术前均未接受任何免疫抑制治疗、放疗及化疗或其他辅助治疗；（）无肺脏、心脏等其他重要脏器疾病；（）临床资料完整；（）患儿家属均签署知情同意书。排除标准：（）合并其他恶性肿瘤者；（）有 家族遗传史者；（）肝功能异常者；（）存在严重感染性疾病、血液系统疾病、心血管疾病、自身免疫性疾病者；（）长期服用免疫抑制剂或免疫增强剂药物者。蛋白的检测方法 采用免疫组织化学法检测癌组织及
5、癌旁组织中 蛋白的表达情况。经石蜡包埋癌组织及癌旁组织标本后，使用 型轮转式切片机（公司）制作厚度为 的石蜡切片，将其编码并烘干，进行脱蜡、修复抗原等操作后，加 入 兔 抗 人 多 克 隆 抗体（）作为一抗，过夜，次日加入山羊抗兔 二抗后室温孵育 ，然后使用二氨基联苯胺染色，苏木素轻微复染。以 代替一抗作为空白对照，使用高倍镜（）观察切片。采用半定量方法，根据染色强度和阳性细胞百分比的乘积进行评定。阳性细胞比例：记 分，记 分，记 分，记 分；染色强度：无染色记 分，弱染色（浅黄色）记 分，中度染色（黄褐色）记 分，强染色（棕褐色）记 分。染色强度和阳性细胞百分比的乘积为 分则 蛋白表达阴性，
6、分为 蛋白表达阳性。兔抗人 多克隆抗体购自北京索莱宝科技有限公司（批号：），山羊抗兔 二抗购自上海钰博生物科技有限公司（批号：）。收集指标收集患儿的性别、年龄、肿瘤位置、肿瘤大小、肿瘤组织类型、肿瘤分期等资料。通过电话、医院复诊或家中走访等方式随访 年，随访时间截至 年 月，记录 患儿治疗后的存活情况。统计学分析 采用 软件进行统计学分析。计数资料以例数（百分比）表示，组间的比较采用 检验；采用 法分析癌组织中不同 蛋白表达情况的 患儿的生存情况；采用 回归模型分析 患儿预后的影响因素。以 为差异具有统计学意义。结 果 患儿癌组织及癌旁组织中 蛋白表达情况的比较 患儿癌组织的 蛋白阳性表达率高
7、于癌旁组织（，），见表、图。表 患儿癌组织及癌旁组织中 蛋白表达情况的比较（）组别阴性阳性癌旁组织（）（）癌组织（）（）广西医学 年 月第 卷第 期图 免疫组化染色结果（）注：、为癌旁组织，为 蛋白阴性表达的组织，为 蛋白阳性表达（红色箭头所示棕褐色为阳性染色）的组织；、为癌组织，为 蛋白阴性表达的组织，为 蛋白阳性表达（红色箭头所示棕褐色为阳性染色）的组织。不同临床病理特征 患儿癌组织中 蛋白表达情况的比较 肿瘤直径、肿瘤分期为 期的患儿癌组织中 蛋白表达的阳性率均分别高于肿瘤直径 、肿瘤分期为 期的患儿（均 ）；而不同性别、年龄、肿瘤位置、肿瘤组织类型的 患儿癌组织中 蛋白表达情况的比较，
8、差异均无统计学意义（均 ）。见表。表 不同临床病理特征 患儿癌组织中 蛋白表达情况的比较（）项目阳性（）阴性（）值 值性别 男童 女童 年龄 岁 岁 肿瘤位置 左肾 右肾 肿瘤直径 肿瘤分期 期 期 肿瘤组织类型 预后良好型 预后不良型 癌组织中不同 蛋白表达情况的 患儿的预后比较癌组织中 蛋白阳性表达、阴性表达的 患儿的 年生存率分别为 、，阳性表达者的生存率低于阴性表达者（，）。见图。图 癌组织中 蛋白阳性表达与阴性表达的 患儿的生存曲线 患儿预后的影响因素以 患儿预后为因变量，肿瘤直径、肿瘤分期、癌组织中 蛋白表达情况为自变量，进行单因素和多因素 回归分析，变量赋值见表。单因素 回归分析
9、结果显示，肿瘤直径、肿瘤分期、癌组织中 蛋白表达情况均是 患儿预后的影响因素（均 ），见表。多因素 回归分析结果显示，剔除混杂因素后癌组织中 蛋白阳性表达是 患儿预后不良的独立危险因素（），见表。表 赋值方式变量赋值 患儿死亡是，否 肿瘤直径 ，肿瘤分期 期，期 癌组织中 蛋白表达情况 阳性表达，阴性表达 表 单因素 回归分析结果变量 值 值 值（）值肿瘤直径（，）肿瘤分期（，）蛋白表达情况（，），表 多因素 回归分析结果变量 值 值 值（）值肿瘤直径（，）肿瘤分期（，）癌组织中 蛋白表达情况（，）讨 论 是婴幼儿泌尿系统较为常见的恶性肿瘤，发生于肾胚芽细胞，其临床症状主要表现为腹痛、血尿、腹
10、部包块、发热、贫血等，部分患儿有高血压等症状。具有生长迅速、恶化程度高等特点，其占小儿所有类型实体瘤的，手术、放疗、化疗等综合治疗可提高 患儿的存活率，但仍有部分患儿复发。因此，寻找与 有关的标志物并探讨其与 预后的关系，对于更好地诊治 患儿具有重要意义。蛋白对谷氨酸和胱氨酸具有高度特异性，可通过调节内源性谷胱甘肽维持细胞内相关反应的平衡，对细胞的生长和发育具有重要的作用。有研究表明，蛋白参与人类多种恶性肿瘤的发生、发展过程，与多种肿瘤的恶性生物学行为如增殖、转移等有关。党裔武等的研究显示，基因过表达与肺癌的发生和发展过程密切相关，沉默肺癌 细胞、细胞、细胞、细胞中的 基因表达，能够抑制癌细胞
11、的侵袭能力、生长速度。高杰等的研究表明，口腔鳞癌患者癌组织中 蛋白的表达水平明显高于癌旁组织，抑制口腔鳞癌 细胞中 蛋白的表达能够降低细胞迁移数，增加细胞凋亡率，提示 蛋白在口腔鳞癌的发生、发展过程中发挥重要的作用。钟文静等的研究表明，蛋白在非小细胞肺癌组织中阳性表达率明显高于癌旁组织，蛋白阳性表达率有随 分期增加、淋巴结转移和分化程度降低而升高的趋势，且 蛋白高表达与非小细胞肺癌患者不良预后有关。王建国等发现，肝内胆管细胞癌组织中 蛋白的表达与淋巴结转移及患者预后密切相关，提示 蛋白异常表达可能在肝内胆管细胞癌的侵袭、转移、化疗耐药过程中起着关键作用。杜红飞等发现，蛋白在膀胱癌组织中的表达明
12、显高于癌旁组织，蛋白的表达与膀胱癌的 分期有关，蛋白高表达能够促进癌细胞的迁移。而目前关于 蛋白在 中的相关研究较少。故本研究检测 患儿癌组织及癌旁组织中 蛋白的表达情况，并探讨其与 患儿预后的关系。结果表明，患儿癌组织中 蛋白阳性表达率高于癌旁组织，提示 蛋白可能参与 的发生。此外，肿瘤直径、肿瘤分期为 期的患儿癌组织中 蛋白表达的阳性率均分别高于肿瘤直径 、肿瘤分期为 期的患儿（均 ），提示 蛋白高表达可能具有促进 进展的作用。本研究结果还显示，蛋白阳性表达的 患儿 年生存率低于阴性表达的 患儿（），提示 蛋白阳性表达的 患儿预后不良；多因素 回归分析结果进一步表明，蛋白阳性表达是 患儿预
13、后不良的独立危险因素，提示 蛋白或可作为评估 患儿预后情况的辅助指标。综上所述，患儿癌组织中 蛋白呈高表达，蛋白阳性表达与 患儿的病情进展及预后有关。检测 蛋白的表达情况对于 的病情监测及预后评估具有重要意义，可为小儿 的临床诊治提供参考依据，未来有可能成为治疗 患儿的新靶点。参 考 文 献 谢晨捷，顾 松，田瑞成，等 儿童复发肾母细胞瘤的治疗及预后相关因素分析 临床小儿外科杂志，（）：，（）：王亚楠，田亚明，许艳平，等 儿童肾母细胞瘤的临床病理特征及预后影响因素分析 实用癌症杂志，（）：，：，（），（）：，（），（）：广西医学 年 月第 卷第 期 李清华，马志红，李立，等 与 在喉鳞状细胞癌
14、中的表达及临床意义 河北医学，（）：中国抗癌协会小儿肿瘤专业委员会 儿童肾母细胞瘤诊断治疗建议（）中华儿科杂志，（）：孟德光，王佳荣，常晓峰，等 难治性小儿肾母细胞瘤中 的表达及其与临床病理特征和预后的关系中国肿瘤外科杂志，（）：李 露，史艳侠 儿童肾母细胞瘤的诊断与治疗 中国临床医生杂志，（）：，：，（）：赵雨霏，陶圆 基因在恶性肿瘤中的研究进展 中国肿瘤临床，（）：，：，（）：，（）：，：，（）：党裔武，陆会平，陈罡 和 在肺癌中的研究进展 右江医学，（）：高 杰，靳昊，张娟，等 调控 对口腔鳞癌细胞 细胞增殖、凋亡及迁移的影响 医学分子生物学杂志，（）：钟文静，战鹏，朱晓峰，等 与 在
15、中的表达及其与病理特征的关系 医学信息，（）：王建国，陶耀业，陈成，等 蛋白在肝内胆管细胞癌组织中的表达及临床意义 浙江临床医学，（）：杜红飞，庞雪利，阳燕，等 在膀胱癌组织及细胞 中 的 表 达 及 意 义 现 代 肿 瘤 医 学，（）：（收稿日期：修回日期：）（上接第 页），：中华医学会妇产科学分会妊娠期高血压疾病学组 妊娠期高血压疾病诊治指南（）中华妇产科杂志，（）：李冠琳，杨慧霞 子痫前期的预测与预防 中华妇产科杂志，（）：，；（）：，：史云芳，翁文芳，林 燕 拉贝洛尔对子痫前期孕妇外周血氧化应激产物表达及分娩的影响 临床合理用药杂志，（）：，：马臣杰，张 雯，曾瑾，等 铁死亡调控机制的研究进展 生物学杂志，（）：董 捷，颜建英，张勤建 铁与子痫前期发病的研究进展 中华围产医学杂志，（）：，（）（），（）：，（）：，：，（）：，：马建彩，武 红，杨丽萍，等 和 在子痫前期胎盘组织中的表达及意义 标记免疫分析与临床，（）：（收稿日期：修回日期：），