1、职业与健康2023 年 2 月第 39 卷第 3 期Occup and Health，Feb.2023，Vol.39，No.3基金项目：沧州市科技支撑计划项目（183302140）作者简介：吴秉伦，男，副主任医师，主要从事传染病控制工作。2021 年河北省沧州市水产品中致病性弧菌污染状况分析吴秉伦a，张瑞b，毕红杰b，卢伟b，胡倩倩b，王巨忠b沧州市疾病预防控制中心 a 应急办公室，b 微生物检验科，河北 沧州 061000摘要：目的了解致病性弧菌在沧州市水产品中的污染状况，为食源性疾病防控和食物中毒监测提供数据支持。方法采用随机抽样的方法采集 2021 年沧州市水产品样品，按照 国家食品污染
2、和有害因素风险监测工作手册 中监测方法，对副溶血性弧菌等 4 种致病性弧菌进行检测，对霍乱弧菌和副溶血性弧菌进行基因检测，确定其毒力基因，并对霍乱弧菌进行血清分型。结果220 份水产品中 74 份检出致病性弧菌，检出率为 33.64%。其中副溶血性弧菌检出率为 22.73%，溶藻弧菌检出率为 7.27%，霍乱弧菌检出率为 2.73%，创伤弧菌检出率为 0.91%。分离出的 50 株副溶血性弧菌均携带 tlh 基因型，未携带 tdh 和 trh 基因；6 株霍乱弧菌都为非 O1/O139 群霍乱弧菌，ctx 毒力基因为阴性。结论2021 年沧州市部分水产品中存在致病性弧菌污染，以副溶血性弧菌和溶
3、藻弧菌为主。市场监管部门应加强对各类水产品的监管力度，降低致病性弧菌引发的食源性疾病风险。关键词：水产品；致病性弧菌；污染状况；毒力基因中国图书资料分类号：R155.5文献标识码：A文章编号：1004-1257（2023）03-0326-03Analysis of pathogenic Vibrio contamination in aquatic products in Cangzhou City ofHebei Province in 2021WU Bing-luna，ZHANG Ruib，BI Hong-jieb，LU Weib，HU Qian-qianb，WANG Ju-zhongba
4、 Emergency Response Office，b Microbiology Laboratory Department，Center for Disease Control and Prevention of CangzhouCity，Cangzhou Hebei，061000，ChinaAbstract：Objective To investigate the pollution status of pathogenic Vibrio in aquatic products in Cangzhou City，provide datasupport for the prevention
5、 and control of foodborne diseases and monitoring of food poisoning.Methods The samples of aquaticproducts in Cangzhou City in 2021 were collected by random sampling.According to the methods of National work manual for riskmonitoring of food contamination and harmful factors，four kinds of pathogenic
6、 Vibrio were detected，the virulence genes of Vibriocholerae and Vibrio parahaemolyticus were determined，and the Vibrio cholerae was serotyped.Results The pathogenic Vibrio wasdetected in 74 of 220 aquatic products，and the detection rate was 33.64%.The detection rate of Vibrio parahaemolyticus，Vibrio
7、alginolyticus，Vibrio cholerae and Vibrio vulnificus was 22.73%，7.27%，2.73%and 0.91%，respectively.All 50 strains of Vibrioparahaemolyticus isolated carried the tlh genotype，but did not carry the tdh and trh genes.The six strains of Vibrio cholerae werenon-O1/O139 group，and the ctx virulence gene was
8、negative.Conclusions In 2021，there is pathogenic Vibrio contamination insome aquatic products in Cangzhou City，mainly Vibrio parahaemolyticus and Vibrio alginolyticus.The market supervisiondepartment should strengthen the supervision of various aquatic products to reduce the risk of foodborne diseas
9、es caused bypathogenic Vibrio.Keywords：Aquatic products；Pathogenic vibrio；Pollution status；Virulence genes 论著 随着我国人民生活水平不断提高，饮食结构多样化，由微生物引起的食源性污染已成为食品安全存在的主要问题1，弧菌是引发食源性疾病的主要病原菌之一，分布广泛，主要生活在海水、淡水或水生动物中，一般在盐浓度范围较宽的水域或水生动物的表面和肠道中检出率较高2。沧州地处河北腹地，渤海之滨，为沿海城市，水产品资源丰富，由沿海导致致病性弧菌污染水产品的问题也越来越多，人们通过食用受弧菌污染的水产
10、品而造成食物中毒引起食源性疾病。为了解沧州市水产品中致病性弧菌污染情况，为食品安全监测和市场监管部门提供参考，本研究对沧州市 2021 年市售水产品进行了 4 种致病性弧菌检测和分析。1材料与方法1.1材料2021 年分 4 个季度选择沧州市辖区范围内养殖场、农贸市场、超市、网店及餐馆 5 类场所作为采326DOI:10.13329/ki.zyyjk.2023.0063职业与健康2023 年 2 月第 39 卷第 3 期Occup and Health，Feb.2023，Vol.39，No.3表 12021 年沧州市不同采样季节水产品中致病性弧菌检出情况季度样本数（份）副溶血性弧菌霍乱弧菌溶藻
11、弧菌创伤弧菌小计阳性数（份）检出率（%）阳性数（份）检出率（%）阳性数（份）检出率（%）阳性数（份）检出率（%）阳性数（份）检出率（%）一5223.8511.9235.7723.85815.38二5547.2700.0023.6400.00610.91三583153.45ab23.45610.3400.003967.24ad四551323.64ac35.4559.0900.002138.18acd2值49.2350.34P 值0.0000.391e0.524e0.055e0.000注：a与第一季度比较，P0.01；b与第二季度比较，P0.05；c与第三季度比较，P0.01；d与第二季度比较，P
12、0.01；e采用 Fisher 确切概率法计算。表 22021 年沧州市不同类型采样地点致病性弧菌检出情况地点样本数（份）副溶血性弧菌霍乱弧菌溶藻弧菌创伤弧菌小计阳性数（份）检出率（%）阳性数（份）检出率（%）阳性数（份）检出率（%）阳性数（份）检出率（%）阳性数（份）检出率（%）养殖场4500.0024.4400.0000.0024.44农贸市场752837.33ab11.33810.6711.333850.67超市601525.00ab23.3346.6711.672236.67网店1000.0000.00110.0000.00110.00餐馆30723.33ab13.33310.0000
13、.001136.672值25.4729.80P 值0.0000.758c0.125c1.000c0.000注：a与养殖场比较，P0.01；b与网店比较，P0.01；c采用 Fisher 确切概率法计算。样点，采用随机抽样的方法对采集水产品进行检测分析。1.2检验方法按照 国家食品污染和有害因素风险监测工作手册3、GB 4789.12016 食品安全国家标准4，对 220 份样品进行副溶血性弧菌、霍乱弧菌、溶藻弧菌、创伤弧菌检测。使用分子生物学方法检测副溶血性弧菌中是否携带毒力基因 tlh、tdh 和 trh。利用纯培养物和诊断血清做玻片凝集试验。1.3质量控制实验采用全程质量控制，对阳性菌株与
14、标本同时培养，并进行血清学诊断。1.4统计学分析采用 SPSS 22.0 软件进行统计分析。分类变量采用频数（百分比）进行统计学描述，采用2检验或 Fisher 确切概率法进行统计学检验，以 P0.05 为差异有统计学意义。如果组间差异有统计学意义，进一步采用 Bonferroni 法进行两两比较。2结果2.14 种致病性弧菌的检出情况采集的 220 份水产品中共检出致病性弧菌样品 74 份，总检出率为 33.64%。其中副溶血性弧菌检出率最高，为 22.73%，霍乱弧菌和溶藻弧菌为 2.73%和 7.27%，创伤弧菌为 0.91%。2.2不同采样季节水产品中致病性弧菌检出情况4 个季度水产品
15、中第三季度样品的 4 种致病性弧菌检出率最高为 67.24%，第四季度和第一季度分别为 38.18%与15.38%，第二季度最低为 10.91%，不同季度水产品中致病性弧菌的检出率比较，差异有统计学意义（P0.01）。4 种致病性弧菌中，副溶血性弧菌第三季度检出率最高为 53.45%，第四季度、第二季度和第一季度分别为23.64%、7.27%和 3.85%。不同季节副溶血性弧菌检出率比较，差异有统计学意义（P0.01）。不同季节霍乱弧菌、溶藻弧菌、创伤弧菌检出率比较，差异均无统计学意义（均 P0.05）。见表 1。2.3不同采样场所致病性弧菌检出情况总体来看，农贸市场的水产品样品中致病性弧菌检
16、出率最高，为50.67%，其次是超市和餐馆，都为 36.67%，养殖场为4.44%，网店为 10.00%。不同类型采样场所水产品中致病性弧菌检出率比较，差异有统计学意义（P0.01）。4 种致病性弧菌中，副溶血性弧菌在农贸市场采集的水产品样品中检出率最高为 37.33%，其次是超市和餐馆，分别为 25.00%和 23.33%，养殖场和网店都未检出。不同采样地点副溶血性弧菌检出率比较，差异有统计学意义（P0.01）。不同采样地点霍乱弧菌、溶藻弧菌和创伤弧菌检出率比较，差异均无统计学意义（均 P0.05）。见表 2。2.4副溶血性弧菌毒力基因检测对 50 株副溶血性弧菌采用实时荧光定量 PCR，检测 tlh 基因和致病性tdh、trh 基因。结果显示，所有菌株 tlh 基因为阳性，均不携带 tdh 和 trh 基因。2.5霍乱弧菌血清鉴定及毒力基因检测经血清鉴定及毒力基因检测，检出的 6 株霍乱弧菌全部为非 O1/O139 群霍乱弧菌，ctx 毒力基因均为阴性。3讨论本研究结果显示，2021 年沧州市各类水产品中共327职业与健康2023 年 2 月第 39 卷第 3 期Occup and