1、书书书基金项目:国家工业和信息化部 2019 年产业技术基础公共服务平台项目(2019-00902-1-2)作者简介:李国卫(1989.05)，男，硕士，副主任中药师，研究方向:中药配方颗粒质量控制及标准研究，E-mail:452048107 通信作者:孙冬梅(1969.12)，女，硕士，教授，研究方向:中药新药研发及中药质量评价研究，E-mail:1113915624 中药研究不同产地矮地茶药材差异成分筛选及标准汤剂的质量研究李国卫罗宇琴刘潇晗邱韵静刘晓琳吴文平索彩仙孙冬梅(广东一方制药有限公司/广东省中药配方颗粒企业重点实验室，佛山，528244)摘要目的:建立矮地茶超高效液相色谱法特征图
2、谱以筛选不同产地矮地茶药材差异成分，并同时建立岩白菜素和槲皮苷的含量测定方法以探索饮片及标准汤剂的量值传递。方法:制备矮地茶标准汤剂，同时建立超高效液相色谱法特征图谱及含量测定方法，对不同产地的 17 批矮地茶样品进行测定，采用判别分析及熵权 Topsis 法对不同产地矮地茶药材进行评价，筛选其差异化合物，并对其中 2 个成分进行含量测定。结果:通过建立矮地茶超高效液相色谱法特征图谱指认了 4个成分;筛选得到不同产地间的矮地茶样品差异化合物为峰 2、峰 4(岩白菜素)、峰 5(杨梅苷)。标准汤剂岩白菜素含量均值为 4.53%，转移率均值为 63.05%，槲皮苷含量均值为 0.57%，转移率均值
3、为 57.31%，量值传递均较好。结论:本研究采用超高效液相色谱法特征图谱结合多指标含量测定评价不同产地矮地茶药材和标准汤剂量值传递规律，结果科学合理，为矮地茶药材和标准汤剂的质量控制及评价提供参考。关键词矮地茶;岩白菜素;槲皮苷;标准汤剂;判别分析;熵权 Topsis 法;量值传递;质量控制Screening of Differential Components in Herba Ardisiae Japonicae of Different Originsand Quality of Its Standard DecoctionsLI Guowei，LUO Yuqin，LIU Xiaoha
4、n，QIU Yunjing，LIU Xiaolin，WU Wenping，SUO Caixian，SUN Dongmei(Guangdong Efons Pharmaceutical Co，Ltd/Guangdong Provincial Key Laboratory of TraditionalChinese Medicine Formula Granule，Foshan 528244，China)AbstractObjective:To screen the differential components in Herba Ardisiae Japonicae of different o
5、rigins by the ultra-high-per-formance liquid chromatography(UPLC)，and to construct a method for the determination of bergenin and quercetin to explore thedissemination of quantity value between decoction pieces and standard decoctions Methods:Standard decoction of Herba ArdisiaeJaponicae was prepare
6、d The UPLC chromatogram and the content determination method were established to determine 17 batches ofHerba Ardisiae Japonicae samples from different producing areas Discriminant analysis and entropy-weighted TOPSIS method wereperformed to evaluate the samples and screen the differential compounds
7、，and the contents of two components were measured e-sults:Four components were identified，and the screened differential compounds in Herba Ardisiae Japonicae of different originswere peak 2，peak 4(bergenin)，and peak 5(myricitrin)In the standard decoction，the average contents of bergenin and querceti
8、nwere 4.53%and 0.57%，respectively，and the average transfer rates were 63.05%and 57.31%，respectively，indicating good dis-semination of quantity value Conclusion:In this study，UPLC chromatogram combined with multi-index content determination wasused to evaluate the dissemination law of quantity value
9、between Herba Ardisiae Japonicae from different producing areas and itsstandard decoctions，and achieves scientific and reasonable results This study provides a reference for the quality control and evalu-ation of Herba Ardisiae Japonicae and its standard decoctionKeywordsHerba Ardisiae Japonicae;Ber
10、genin;Quercetin;Standard decoction;Discriminant analysis;Entropy-weighted TOP-SIS method;Dissemination of quantity value;Quality control中图分类号:283文献标识码:Adoi:10 3969/j issn 1673 7202 2023 04 001矮地茶为紫金牛科植物紫金牛 Ardisia japonica(Thunb.)Blume 的干燥全草，具有化痰止咳、清利湿热、活血化瘀的功效，临床常用于治疗新久咳嗽、湿热黄疸等1。矮地茶主产湖南、安徽、湖北、广西等地，
11、多栽培或生于山谷、山坡湿润肥沃的丛林中。目前，矮地茶的质量控制包括含量测定及特征图谱或544世界中医药2023 年 2 月第 18 卷第 4 期指纹图谱2-6。方法较为全面，研究对象多以原料为主，但临床上矮地茶多以汤剂用药，实验研究中多采用有机溶剂作为提取溶剂，而临床汤剂多以水为提取溶媒，提取溶媒的不同可能会导致原料与汤剂的质量评价不一致，如矮地茶的祛痰止咳的主要功效成分酚类物质(如没食子酸、岩白菜素)及黄酮类物质(槲皮素、山柰酚)在有机溶剂及水中的提取效率差异较大7，仅对原料进行研究未能客观反映出临床用药质量。中药标准汤剂是在中医药理论指导下依据临床汤剂煎煮方式规范化进行煎煮、固液分离、浓缩
12、并干燥制得的，是衡量与临床汤剂是否基本一致的标准参照物，目前采用中药标准汤剂来标化临床用药质 量 的 研 究 在 多 个 常 用 中 药 中 已 有 报道8-17，为结合临床用药实际客观评价中药材质量提供了新思路。因此，本研究以矮地茶的饮片及标准汤剂为研究对象，采用超高效液相色谱法特征图谱结合多指标含量测定的方式，对不同产地的矮地茶药材质量研究进行探讨。1仪器与材料1.1仪器高效液相色谱仪(沃特斯公司，美国，型号:H-Class);数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司，型号:KQ-500DE);万分之一天平(梅特勒-托利多公司，瑞士，型号:ME204E);百万分之一天平(梅特勒-托利多公司
13、，瑞士，型号:XP-26);超纯水系统(默克股份有限公司，德国，型号:Milli-Q Di-rect)。1.2试剂色谱纯甲醇试剂(赛默飞世尔科技有限公司，美国，批号:218078);色谱纯磷酸试剂(天津科密欧化学试剂有限公司，批号:20201127);分析纯甲醇试剂(西陇科学股份有限公司，批号:220706);去离子水(实验室自制)。1.3分析样品没食子酸(批号:110831-201605，含量:90.8%);岩白菜素(批号:111532-201601，含量:94.1%);槲皮苷(批号:111538-201606，含量:90.6%);杨 梅 苷(批 号:111860-201102，含 量:93
14、.8%)均为中国食品药品检定研究院提供;分别收集了 5 个产地共 17 批矮地茶样品，经广东一方制药有限公司孙冬梅主任中药师鉴定鉴定为紫金牛科植物紫金牛 Ardisia japonzca(Thunb.)Blume 的干燥全草。见表 1。2方法与结果2.1色谱条件选择 Waters COTECS T3 色谱柱(2.1 mm 100 mm，1.6 m);以甲醇为流动相 A，以0.1%磷酸为流动相 B，梯度洗脱(0 5 min，0%7%A;5 10 min，7%13%A;10 18 min，13%30%A;18 23 min，30%35%A;23 30 min，35%55%A);检测波长为 270
15、nm，进样量为 1 L，流速为 0.3 mL/min，柱温为 35。表 117 批矮地茶样品信息编号批号产地信息编号批号产地S1ADC-1湖南常德市S10ADC-10安徽亳州市S2ADC-2湖南常德市S11ADC-11安徽亳州市S3ADC-3湖南常德市S12ADC-12湖北宜昌市S4ADC-4湖南张家界市S13ADC-13湖北宜昌市S5ADC-5广西玉林市S14ADC-14湖北宜昌市S6ADC-6广西玉林市S15ADC-15 河南驻马店市确山县S7ADC-7广西玉林市S16ADC-16 河南驻马店市确山县S8ADC-8广西玉林市S17ADC-17 河南驻马店市确山县S9ADC-9安徽亳州市2.
16、2对照品溶液的配制取没食子酸、岩白菜素、杨梅苷和槲皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每毫升含没食子酸 80 g、岩白菜素 150 g、杨梅苷50 g 和槲皮苷 10 g 的混合对照品溶液，即得。2.3供试品溶液的制备取本品 0.2 g，精密称定，精密加入 75%甲醇 25 mL，称定重量，超声处理(功率 250 W，频率 40 kHz)30 min，放冷，补重，滤过，即得。2.4标准汤剂的制备参考国家药监局发布的中药配方颗粒质量控制与标准制定技术要求 相应要求制备标准汤剂。取饮片 100 g，加水煎煮 2 次，加水量分别是 12 倍和 10 倍，浸透，煎煮时间分别为30 min和 25 min，采用低温 65 浓缩至清膏，真空冷冻干燥。2.5特征图谱的建立2.5.1共有峰的标定取 17 批矮地茶样品，按“2.2”项下方法制备，按“2.1”项下色谱条件，测定，记录色谱图，根据国家药典委员会颁布的 中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012 版)进行校对，以S1 为参照图谱，采用多点校正自动匹配，选择平均数法生成对照特征图谱。见图1 2。共标定了6 个共有峰，与对照品的保留时间进行比对，并