1、利水化湿类方药研究思路与方法,荣向路,第一页，共四十页。,利水化湿药分类,芳香化湿药药性：辛香温燥，兼苦味归经：脾、胃常用方药：藿香、厚朴、苍术、砂仁藿香正气散、平胃散、不换金正气散,利水渗湿药药性：甘、淡渗利，苦、寒降泻。归经：膀胱、脾、肾分类：利水消肿药：茯苓、泽泻利水通淋药：木通、滑石利胆退黄药：茵陈蒿、垂盆草五苓散、茵陈蒿汤、八正散,第二页，共四十页。,水湿为病病机,肺,脾,肾,膀胱,生理：通调水道、宣发肃降,病理：肺失宣肃-喘、咳、痰,生理：运化水谷、水湿,病理：脾失健运-纳呆、泻泄、腹满,生理：肾主水,病理：阳虚水泛-水肿、面色晄白、尿少或夜尿频多,生理：膀胱气化,病理：气化失职-
2、水肿、癃闭、尿崩,第三页，共四十页。,水湿为病病机,水,生理：水、津液,病理：湿、痰、饮,有形：水、痰,无形：痰、湿,相关病证,水湿壅盛：水肿、癃闭、淋浊、痰饮、泄泻,湿阻中焦,暑湿证,湿温,第四页，共四十页。,主要药理作用,利尿,调整胃肠功能、促进消化液分泌、抗溃疡,利胆保肝,对免疫功能的影响、抗肿瘤、抗病原微生物,对代谢的影响：降糖、降脂,降血压,第五页，共四十页。,研究思路,理论研究,应用研究,证本质,药效,淋证,水肿,湿邪内结,湿热黄疸,湿邪困脾,“芳香药性,新药开发,作用机理,临床应用,目的？,第六页，共四十页。,淋证,相关疾病：与泌尿系感染、结石有关-利水通淋药/方膀胱炎、尿道炎、
3、急性前列腺炎、泌尿系结石、肾盂肾炎,水肿,实验设计：抗病原微生物、利尿、抗结石、解热、镇痛、解痉,相关疾病：-利水渗湿药/方急慢性肾炎，心、肝、肾病的水肿,实验设计：利尿、实验性肾炎、抗病原体、降压、解热、镇痛,第七页，共四十页。,湿邪内结寒、热,相关疾病：-泽泻、车前子、茵陈、茵陈五苓散高脂血症、脂肪肝、动脉粥样硬化,湿热黄疸,实验设计：调节物质代谢、能量代谢,相关疾病：胆道系统疾病-茵陈蒿、金钱草、茵陈蒿汤胆道感染、胆石症,实验设计：胆汁流量、胆囊运动、胆道括约肌紧张度、相关模型,第八页，共四十页。,湿邪困脾,相关疾病：脾湿证-芳香化湿药/方以药测证,“芳香药性,实验设计：复制脾湿证模型胃
4、肠功能、止泻、镇痛、食欲、抑菌、保肝,相关说法：气香入脾、香味醒脾、芳香开窍、芳香辟秽、芳香通邪,存在问题：物质根底-挥发油？挥发性成分经呼吸道吸收时药动学特性？芳烃类致癌，平安性？,第九页，共四十页。,研究方法,一、以化湿和胃治疗急性胃肠炎为主的方药,二、以化湿和胃治疗消化性溃疡病及慢性胃炎为的方药,三、利水化湿类方药,第十页，共四十页。,以化湿和胃治疗急性胃肠炎为主的方药,1.抗腹泻,3.调节胃肠运动,2.抗感染,4.燥湿健脾,5.其他,胃排空试验,在体胃肠运动,离体胃肠运动,致病菌,病毒,体内,体外,镇痛,抗炎,解热,第十一页，共四十页。,以化湿和胃治疗消化性溃疡病及慢性胃炎为主的方药,
5、1.抗溃疡,3.抑菌：幽门弯曲杆菌、空肠弯曲杆菌,2.胃液、胃酸分析,5.燥湿健脾,4.调整胃肠运动,急性溃疡,慢性溃疡,第十二页，共四十页。,利水化湿类方药设计要点,1.利尿：称重法、输尿管集尿法、家兔尿导管集尿法、代谢笼法、尿液中钠、钾、氯离子测定法、截流分析实验。,3.其他病理模型：肾小球肾炎、肾病模型、肾功能衰竭、内淋巴积水模型等,2.防治泌尿系结石：植入异物或药物造成肾结石、膀胱结石,4.其他功能：抗病原微生物、降血脂,第十三页，共四十页。,常用动物模型,一、前列腺炎动物模型,二、Masugi肾小球肾炎模型,三、大鼠Heyman肾小球肾炎模型,四、兔C-BSA异种血清免疫复合物型肾炎
6、模型,五、乙二醇性泌尿系结石模型,六、异物性膀胱结石模型,药物性,细菌性,第十四页，共四十页。,前列腺炎动物模型,角叉菜胶、消痔灵、大肠杆菌,麻醉、切口、暴露前列腺,前列腺头叶精囊,精囊内侧前列腺背叶,1%角叉菜胶,消痔灵,精囊,卵磷脂小体密度，白细胞，病理改变,前列腺炎,大肠杆菌混悬液,第十五页，共四十页。,兔大鼠)Masugi肾小球肾炎模型,特点：肾小球基底膜肾炎,A Renal corpuscleB Proximal tubuleC Distal convoluted tubuleD Juxtaglomerular apparatus1.Basement membrane(Basal l
7、amina)2.Bowmans capsule parietal layer3.Bowmans capsule visceral layer3a.Pedicels(Foot processes from podocytes)3b.Podocyte,4.Bowmans space(urinary space)5a.Mesangium Intraglomerular cell5b.Mesangium Extraglomerular cell6.Granular cells(Juxtaglomerular cells)7.Macula densa8.Myocytes(smooth muscle)9.
8、Afferent arteriole10.Glomerulus Capillaries11.Efferent arteriole,Iv家兔，1.5-2ml,1次/30min,3-8次,别离兔肾皮质，匀浆+弗氏完全佐剂,免疫绵羊：sc，每处1ml，每2周1次，共4次,别离羊血清+兔RBC，混匀，4过夜，离心，弃血细胞,抗肾血清,8W后,蛋白尿、Crea、BUN、病理,第十六页，共四十页。,大鼠Heyman肾小球肾炎模型,特点：肾小球基底膜肾炎,A Renal corpuscleB Proximal tubuleC Distal convoluted tubuleD Juxtaglomerular
9、 apparatus1.Basement membrane(Basal lamina)2.Bowmans capsule parietal layer3.Bowmans capsule visceral layer3a.Pedicels(Foot processes from podocytes)3b.Podocyte,4.Bowmans space(urinary space)5a.Mesangium Intraglomerular cell5b.Mesangium Extraglomerular cell6.Granular cells(Juxtaglomerular cells)7.Ma
10、cula densa8.Myocytes(smooth muscle)9.Afferent arteriole10.Glomerulus Capillaries11.Efferent arteriole,别离大鼠肾皮质，匀浆+弗氏完全佐剂,同种大鼠ip，2ml/次，2周1次，3-6次,蛋白尿、Crea、BUN、病理,6-12W后,第十七页，共四十页。,兔C-BSA异种血清免疫复合物型肾炎模型,特点：可溶性循环抗原-抗体复合物沉淀于肾小球血管壁,A Renal corpuscleB Proximal tubuleC Distal convoluted tubuleD Juxtaglomerula
11、r apparatus1.Basement membrane(Basal lamina)2.Bowmans capsule parietal layer3.Bowmans capsule visceral layer3a.Pedicels(Foot processes from podocytes)3b.Podocyte,4.Bowmans space(urinary space)5a.Mesangium Intraglomerular cell5b.Mesangium Extraglomerular cell6.Granular cells(Juxtaglomerular cells)7.M
12、acula densa8.Myocytes(smooth muscle)9.Afferent arteriole10.Glomerulus Capillaries11.Efferent arteriole,冷冻枯燥，4双蒸水中透析48h，得BSA干粉,67ml EDA+5ml H2O+5ml 6mol/L HCl,加N-BSA 0.2g/ml溶液25ml,加1.8g EDC，25，PH4.75，搅拌2h,加4mol/L磷酸buffer(PH4.75)30ml，中止反响,1次/日，共5W，第6W剂量加倍,调PH至4.75，25,加PH7.4磷酸buffer，阳离子化BSA,蛋白尿、Crea、BU
13、N、病理肾小球直径,兔iv C-BSA 10mg,第十八页，共四十页。,大鼠乙二醇泌尿系结石模型,特点：乙二醇乙醇酸乙醛酸草酸+钙盐草酸钙,乙二醇+NH4Cl 饲料,连续喂养1月,肾剖面有结晶沉淀、游离结石、钙化斑等,注意：应选雄性大鼠，雌性大鼠无乙醇酸氧化酶！,第十九页，共四十页。,异物性膀胱结石模型,特点：异物核心+尿中结晶+基质凝聚,注意：结石应80烧烤12h后称重。,雄性大鼠/家兔麻醉，切开膀胱,缝合关闭伤口,放入圆形异物,膀胱结石,4-10周,可用45Ca示踪,第二十页，共四十页。,常用方研究概况,一、五苓散,二、茵陈蒿汤,三、平胃散,第二十一页，共四十页。,五苓散,组成：猪苓、茯苓
14、、泽泻、白术、桂枝,成效：利水渗湿，温阳化气,主治：1.外有表证，内停水湿；2.水湿内停；3.痰饮。,?伤寒论?第71条：“太阳病，发汗后，大汗出，胃中干，烦躁不得眠，欲得饮水者，少少与饮之，令胃气和那么愈。假设脉浮，小便不利，微热消渴者，五苓散主之。,第72条：“发汗己，脉浮数，烦渴者，五苓散主之。,第73条：“伤寒汗出而渴者，五苓散主之。不渴者，茯苓甘草汤主之。,第74条：“中风发热，六七日不解而烦，有表里证，渴欲饮水，水入那么吐者，名曰水逆，五苓散主之。,第141条：“病在阳，应以汗解之，反以冷水潠之，假设灌之，其热被劫不得去，弥更益烦，肉上粟起，意欲饮水，反不渴者，服文蛤散。假设不差者
15、，与五苓散。寒实结胸，无热证者，与三物小陷胸汤，白散亦可服。,第二十二页，共四十页。,第156条：“本以下之，故心下痞，与泻心汤；痞不解，其人渴而口燥烦，小便不利者，五苓散主之。,第244条：“太阳病，寸缓、关浮、尺弱，其人发热汗出，复恶寒，不呕，但心下痞者，此以医下之也。如其不下者，病人不恶寒而渴者，此转属阳明也。小便数者，大便必硬，不更衣十日，无所苦也。渴欲饮水，少少与之，但以法救之。渴者，宜五苓散。,第386条:“霍乱，头痛，发热，身疼痛，热多，欲饮水者，五苓散主之；寒多，不用水者，理中丸主之。,?痰饮咳嗽病脉证并治?第31条：“假令瘦人脐下有悸，吐涎沫而癫眩，此水也，五苓散主之,?消渴
16、小便不利淋病脉证并治?第5条：“脉浮，小便不利，微热消渴者，宜利小便发汗，五苓散主之。,?消渴小便不利淋病脉证并治?第6条：“渴欲饮水，水入那么吐者，名曰水逆，五苓散主之。,第二十三页，共四十页。,五苓散相关现代研究,方证相应研究,降血压,防治肾病综合症,对乙醇代谢的影响,对代谢性疾病的影响,第二十四页，共四十页。,原方研究说明：四气以热性为主，五味以甘辛为主，药物归经主入脾和膀胱。医案研究说明：泄泻和水肿是五苓散最常用于治疗的疾病；最常见病症为小便不利；证候要素以湿为主；治那么以从脾论治为多。贝叶斯网络研究说明：五苓散方证各要素都与脾密切相关。加减药物四性以温性为主，五味以苦甘辛为主，归经以入肺肝为主。结论：脾是津液代谢的重要藏象学根底；肾是津液代谢的调控之机；应高度重视膀胱在津液代谢中的地位与作用；五苓散“方证相应研究为藏象学研究提供了新思路、新方法。,窦志芳 基于五苓散“方证相应研究的津液代谢脏象学根底研究 山东中医药大学2022届博士论文,基于五苓散“方证相应研究的津液代谢藏象学根底研究,第二十五页，共四十页。,窦志芳 基于五苓散“方证相应研究的津液代谢脏象学根底研究 山东中医