1、医院感染指标监测取样指南 1、污水检测 2、物体外表菌落计数 3、手菌落计数 4、空气培养 5、压力蒸汽灭菌效果评价 千麦医学检验所 微生物实验室,第一页，共二十页。,污水检测,1、采样容器：千麦医学检验所提供采样容器，包括：微生物指标采样瓶、理化指标采样瓶2、微生物指标采样：用微生物指标采样瓶采样，采样前无需用水样润洗采样瓶；采样时防止手接触瓶盖内壁或瓶口以防止水样污染。3、理化指标采样：用理化指标采样瓶采样，采样前用水样润洗至少3次，防止其他杂质进入采样瓶中造成污染和干扰。4、采样顺序：同一采样点微生物指标和理化指标同时检测时应先采集微生物指标样品；,第二页，共二十页。,污水检测,5、采样
2、口：选择污水总排放口进行样本采集；如从自来水龙头采样时，采样前可将水龙头开至最大放水3-5分钟，然后关闭水龙头，用70%的酒精溶液消毒水龙头及采样瓶口然后采集水样；6、采样量：一般采集量为采样瓶80%左右；7、申请单填写：在申请单上以下栏目填写相应内容 注：污水检测包括沙门氏菌培养、志贺氏菌培养，粪大肠菌群计数，总余氯检测四项。,第三页，共二十页。,污水检测,8、样本标识：同一采样口的不同样本使用相同的条形码，条形码粘贴在瓶身上，防止贴在瓶盖上；申请单上也粘贴同样的条形码；9、送检时间：采样后2小时内送至实验室，假设2-10冷藏保存，可在6小时内送达实验室；10、防止以下操作，保证样本的代表性
3、：1 从非排放口采样2 人为添加试剂、消毒剂或洁净水3 采样过少4 所采污水为残留污水，非排放时所采集,第四页，共二十页。,1、采样方法：1用55cm2的标准灭菌规格板，放在被检物体外表，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样4个规格板面积；2剪去棉试子手接触局部，将棉拭子放入装10ml采样液的试管中送检 3门把手等小型物体那么采用棉拭子直接涂抹物体外表的方法采样 4采样过程中应防止采样人员手部或其他部位与被采外表直接接触且需无菌操作。,物体外表菌落计数,第五页，共二十页。,2、采样时间：消毒处理后4小时内采样；3、采样面积：被采外表10
4、0cm2：取全部外表 被采外表100cm2：取100cm24、申请单填写：在申请单上以下栏目填写相应内容,物体外表菌落计数,第六页，共二十页。,5、样本标识：粘贴标本条形码于试管或其他容器壁上，禁止粘贴在塞子上，申请单上粘贴同样的条形码；6、送检时间：采样后6小时内送达实验室，假设样本2-4冷藏，可在24小时内送达实验室。,物体外表菌落计数,第七页，共二十页。,1、采样时间：在接触病人、从事医疗活动前进行采样。2、采样方法：1被检人五指并拢，将浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子一支在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两次一只手涂擦面积30cm2 并随之转动采样棉拭子，剪去棉试子手接触部位，将棉拭子放
5、入装有10ml采样液的试管内送检。2采样过程中，防止采样人员和被检人员所采部位的直接接触且需无菌操作。,手菌落计数,第八页，共二十页。,3、申请单填写：在申请单上以下栏目填写相应内容4、样本标识：粘贴标本条形码于试管或其他容器壁上，禁止粘贴在塞子上，申请单上粘贴同样的条形码；5、送检时间：采样后6小时内送达实验室，假设样本2-4冷藏，可在24小时内送达实验室。,手菌落计数,第九页，共二十页。,1、采样时间：消毒处理后、医疗活动之前采样；2、采样高度：与地面垂直高度80150cm；3、布点方法：室内面积30m2：在房间一条对角线上取3点，既中心一点、两端各距墙1m处各取一点；室内面积30m2：设
6、东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北点均距墙1m；,空气培养,第十页，共二十页。,4、采样方法：采样前关好门窗和空调，在无人走动的情况，静止10分钟后进行采样；将9cm直径普通营养琼脂平板开盖后放置在采样点，暴露规定时间后加盖5、暴露时间：,空气培养,第十一页，共二十页。,6、申请单填写：在申请单上以下栏目填写相应内容注：工程名称应包含采样点数、暴露时间的信息,空气培养,第十二页，共二十页。,7、样本标识：一个房间所有培养皿用胶带固定后装入一个自封袋，袋外和袋内平皿上各贴一个相同的条形码，申请单上也粘贴相同的条形码；8、送检时间：采样后6小时内送达实验室，假设样本2-4冷藏，可在24小时
7、内送达实验室。,空气培养,第十三页，共二十页。,1、生物监测法原理：将生物指示管含嗜热脂肪芽孢杆菌置于标准试验包中心部位，经一个灭菌周期后，取出挤破管中的培养基，让灭菌后的嗜热脂肪芽孢杆菌和培养基接触，经 561培养规定时间后观察培养基颜色变化，指示剂保持紫红色说明灭菌成功，指示剂变黄说明灭菌失败，细菌生长。,压力蒸汽灭菌效果评价生物监测法,第十四页，共二十页。,2、标准试验包：可自制，也可采用成品试验包 1自制方法：将以下物料包裹成25cm*30cm*30cm大小的消毒包，将生物指示管置于包中心 3件平纹长袖手术衣 4块小手术巾 2块中手术巾 1块大手术巾 30块10cm*10cm、8层纱布
8、敷料 2成品：3M成品试验包,压力蒸汽灭菌效果评价生物监测法,第十五页，共二十页。,3、灭菌过程：将3个标准试验包分别放置于压力蒸汽灭菌器的上、中部及排气口处进行灭菌4、灭菌条件：下排气式：温度：121、时间：30分钟、压力：0.105MPa/c 温度：115、时间：40分钟、压力：0.070MPa/c 预真空式：温度：134、时间：4-6分钟、压力：0.210MPa/c,压力蒸汽灭菌效果评价生物监测法,第十六页，共二十页。,5、申请单填写：在申请单上以下栏目填写相应内容,压力蒸汽灭菌效果评价生物监测法,第十七页，共二十页。,6、样本标识：灭菌后的指示管及阳性对照管如下标识后与申请单一同送检
9、1每个灭菌器带一个阳性对照未灭菌的指示管，管上标记“+2每个灭菌指示管上标记放置部位“上、“中、“下 3一个灭菌器的所有指示管包括阳性对照使用同样的条码，申请单上也粘贴同样的条码7、送检时间：采样后24小时内送达实验室8、监测频率 1普通物品的灭菌，每月监测一次 2植入型器械、严重污染物的灭菌每锅监测 3采用新的包装材料和方法进行灭菌时应进行监测,压力蒸汽灭菌效果评价生物监测法,第十八页，共二十页。,谢谢！,第十九页，共二十页。,内容总结,医院感染指标监测取样指南。采样时防止手接触瓶盖内壁或瓶口以防止水样污染。4 所采污水为残留污水，非排放时所采集。3门把手等小型物体那么采用棉拭子直接涂抹物体外表的方法采样。被采外表100cm2：取全部外表。1自制方法：将以下物料包裹成25cm*30cm*30cm大小的消毒包，将生物指示管置于包中心。2成品：3M成品试验包。1每个灭菌器带一个阳性对照未灭菌的指示管，管上标记“+。谢谢,第二十页，共二十页。,