1、GB1886.99-20151000mL容量瓶中。加入200mL水使其溶解，用磷酸调节pH至2.5，加水稀释至刻度。经孔径为0.222m微孔滤膜或相当的滤膜过滤。A.3.3仪器和设备A3.3.1高效液相色谱系统(HPIC),A.3.3.2恒流泵。A.3.3.3紫外吸收检测器。A.3.4色谱分析条件推荐的色谱柱及典型操作条件见表A.1。表A.1色谱柱和典型色谱操作条件C色谱柱15 cmX0.4 cm柱温室温流动相附录A中A3.5.1流动速度/(ml/min)1.0检测器检测波长/nm217A.3.5分析步骤A.3.5.1流动相的制备准确量取乙腈和缓冲溶液，体积比为1：3，充分混合。经真空脱气。A
2、.3.5.2标准工作溶液的制备A.3.5.2.1标准溶液A1:称取？异构体和丙氨酸酰胺各约25mg,精确至0.0001g,移入500mL容量瓶中。加50mL甲醇使之溶解，用水稀释至刻度。存储于冰箱中。A.3.5.2.2标准溶液A2:移取15mL土0.02mL标准溶液A1至50mL容量瓶中，用水稀释至刻度。A.3.5.2.3标准工作溶液V1:称取约50mg阿力甜标准样品，精确至0.0001g,移入10mL容量瓶中，加5mL标准溶液A2,用水稀释至刻度。A.3.5.2.4标准工作溶液W2:移取5mL士0.02mL标准工作溶液W1至50mL容量瓶中，用水稀释至刻度。A.3.5.3试验溶液的制备A3.5.3.1试验溶液S1:称取约50mg样品，精确至0.0001g,置于10mL容量瓶中，用水稀释至刻度。A.3.5.3.2试验溶液S2:移取5mL士0.02mL试验溶液S1至50mL容量瓶中，用水稀释至刻度。A.3.5.4系统适应性试验按高效液相色谱操作规程开机预热，调节温度及流量，达到分析条件并基线平稳。重复3次分别注入100L标准工作溶液W1和标准工作溶液V2,B异构体、阿力甜和丙氨酸酰胺的近似保留时间如表A.2所示。峰面积的变化系数(100乘以标准偏差除以平均峰面积)不应超过2%。4
