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工业循环冷却水中土壤真菌的测定 平皿计数法 GBT 14643.4-1993.pdf

1、GB/T14643.4-935.4鼓风电热干燥箱:温度可控制在(60280)士2,5.5铝锅:200mm;5.6.塘瓷量杯:1000mL;5.7磨口三角瓶:1000mL:5.8培养皿:90mm;5.9磨口试剂瓶:1000mL:5.10刻度吸管:1mL:5.11刻度吸管:5mL:5.12三角瓶:500mL。6试验前的准备6.1培养基的制备称取约200g的马铃薯于铝锅中,加水约1000mL在电炉上加热溶解后,趁热用四层医用脱脂纱布过滤到搪瓷量杯中,收集到约900mL滤液,滤液搅匀待用。于上述滤液中加入20.0g琼脂和20.0g葡萄糖,并放在电炉上加热,不断地搅拌,待琼脂完全溶化后趁热用四层医用脱脂

2、纱布过滤于搪瓷量杯中,用热水补充至1000mL,并用乳酸调节pH至4.0土0.1,并分装在500mL三角瓶中,每瓶分装量不超过其总量的2/3,塞上棉塞,再用牛皮纸把瓶口包好,用蒸汽压力灭菌器于121土1灭菌15min.6.2无菌稀释水的制备6.2.1生理盐水的配制:称取8.5g氯化钠溶解在1000mL水中,混匀。6.2.2将生理盐水(6.2.1)分装在1000mL磨口三角瓶中,每瓶45mL,每个三角瓶塞子和瓶口间插入一小纸片,塞紧瓶塞,每个瓶子的瓶口均用牛皮纸包扎以防污染,用蒸汽压力灭菌器于121士1灭菌15min。6.3刻度吸管的灭菌6.3.1将洗净并烘干后的吸管粗端塞上医用脱脂棉,棉花量要

3、适宜,长度大约1015mm,棉花不宜露在口外,多余的棉花可以用火焰烧掉。6.3.2每支刻度吸管用一条约4050mm宽的牛皮纸条,以45左右角螺旋形卷起来,吸管的尖端在头部,粗端用多余的纸条折叠打结,不使散开,标上量度,若干支捆成一束,置电热干燥箱中于160士2灭南2h。6.4培养皿的灭菌将洗净并烘干后的培养皿10个左右叠在一起,用牛皮纸卷成一筒,登电热干燥箱中于160土2灭菌2h。6.5采样瓶的灭菌将洗净并烘干后的1000mL磨口试剂瓶瓶口和瓶颈用牛皮纸裹好,扎紧,置电热干燥箱中于160士2灭菌2h。6.6硫代硫酸钠的灭菌将硫代硫酸钠放入无菌箱(室)内,并均匀地摊在离紫外线灯30cm处,灭菌30min。7测定步骤7.1水样的采集7.1.1用无菌采样瓶采集被测样品,在采样过程中要保护瓶口和瓶颈,防止这些部分受杂菌污染,瓶内要留下足够的空间,以备测定前摇动。7.1.2若采集的水中有余氯,应在采样前,在无菌操作下于无菌采样瓶(6.6)中加入灭过菌的硫代硫酸钠(6.7),加入量为每升水样约0.1g。2

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