1、 2 0 2 3年河北大学学报(自然科学版)2 0 2 3第4 3卷 第2期J o u r n a l o f H e b e i U n i v e r s i t y(N a t u r a l S c i e n c e E d i t i o n)V o l.4 3 N o.2D O I:1 0.3 9 6 9/j.i s s n.1 0 0 0 1 5 6 5.2 0 2 3.0 2.0 0 7甘露糖醛酸寡糖增敏环丙沙星抑制大肠埃希菌机制的研究 谢笑莹1,郭怀忠1,2,曹丽军3,马梦楠1,崔秀彦4(1.河北大学 药学院,河北 保定 0 7 1 0 0 2;2.河北省药物质量分析控制重
2、点实验室,河北 保定 0 7 1 0 0 2;3.河北大学附属医院 检验科,河北 保定 0 7 1 0 0 0;4.河北大学附属医院 药学部,河北 保定 0 7 1 0 0 0)摘 要:通过考察大肠埃希菌(E s c h e r i c h i a.c o l i)体内环丙沙星(c i p r o f l o x a c i n,C P F X)的含量以及联用不同浓度甘露糖醛酸寡糖(MO S)对C P F X抑制E.c o l i效果的影响,探讨了MO S增敏C P F X抑制E.c o l i活性的作用机制.在菌液中加入C P F X和不同质量浓度的MO S,3 7 培养1 5 0 m i
3、n,观察抑菌效果,并用H P L C法测定E.c o l i体内C P F X的含量,同时通过激光扫描共聚焦显微镜(C L S M)观察E.c o l i体内C P F X的荧光强度进行验证.还考察了C a2+对MO S增敏C P F X抑菌效果的影响.结果显示:C P F X与高浓度的MO S联用时,E.c o l i体内C P F X的含量较低;与较低浓度的MO S联用时,E.c o l i体内C P F X的含量较高,与其抑菌实验联用MO S高浓度时拮抗,低浓度时增敏的结果一致.C a2+的加入,在一定程度上逆转了高浓度MO S与C P F X的拮抗作用.该研究可为新型抗菌增效剂的开发和
4、抗耐药菌感染的临床应用提供参考.关键词:甘露糖醛酸寡糖;环丙沙星;大肠埃希菌;C a2+中图分类号:R 9 1 7 文献标志码:A 文章编号:1 0 0 0 1 5 6 5(2 0 2 3)0 2 0 1 5 6 0 7S t u d y o n t h e m e c h a n i s m o f m a n n u r o n i c a c i d o l i g o s a c c h a r i d es e n s i t i z i n g c i p r o f l o x a c i n a g a i n s t E s c h e r i c h i a c o l i
5、X I E X i a o y i n g1,G U O H u a i z h o n g1,2,C A O L i j u n3,M A M e n g n a n1,C U I X i u y a n4(1.C o l l e g e o f P h a r m a c e u t i c a l S c i e n c e s,H e b e i U n i v e r s i t y,B a o d i n g 0 7 1 0 0 2,C h i n a;2.K e y L a b o r a t o r yo f P h a r m a c e u t i c a l Q u a
6、l i t y A n a l y s i s a n d C o n t r o l o f H e b e i P r o v i n c e,B a o d i n g 0 7 1 0 0 2,C h i n a;3.D e p a r t m e n t o f C l i n i c a l L a b o r a t o r y,A f f i l i a t e d H o s p i t a l o f H e b e i U n i v e r s i t y,B a o d i n g 0 7 1 0 0 0,C h i n a;4.D e p a r t m e n t
7、o f P h a r m a c y,A f f i l i a t e d H o s p i t a l o f H e b e i U n i v e r s i t y,B a o d i n g 0 7 1 0 0 0,C h i n a)A b s t r a c t:B y i n v e s t i g a t i n g t h e c o n t e n t o f c i p r o f l o x a c i n(C P F X)i n E s c h e r i c h i a c o l i a n d t h e e f f e c t o f m a n n
8、u r o n i c a c i d o l i g o s a c c h a r i d e(MO S)w i t h d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s o n t h e i n h i b i t o r y a c t i v i t y o f C P F X a g a i n s t E.c o l i,t h e m e c h a n i s m t h a t MO S s e n s i t i z e t h e i n h i b i t o r y a c t i v i t y o f C P F X
9、a g a i n s t E.c o l i w a s e x p l o r e d.C P F X a n d MO S w i t h d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s w e r e a d d e d i n t o t h e b a c t e r i a l s u s p e n s i o n a n d c u l t u r e d f o r 1 5 0 m i n a t 3 7 t o o b s e r v e t h e b a c t e r i o s t a t i c e f f e c t
10、.T h e c o n t e n t o f C P F X i n t h e b a c t e r i a w a s d e t e r m i n e d b y H P L C,a n d t h e f l u o r e s c e n c e i n t e n s i t y o f C P F X i n t h e b a c t e r i a w a s o b s e r v e d b y c o n f o c a l l a s e r s c a n n i n g m i c r o s c o p e(C L S M)t o v e r i f y
11、 t h e a b o v e r e s u l t.T h e e f f e c t o f C a2+o n t h e e l e v a t e d a n t i m i c r o b i a l e f f e c t o f C P F X w i t h MO S w a s a l s o i n v e s t i g a t e d.T h e r e s u l t s s h o w e d t h a t w h e n C P F X w a s 收稿日期:2 0 2 2 0 4 2 5 基金项目:河北省自然科学基金资助项目(H 2 0 2 1 2 0 1
12、 0 1 8,H 2 0 1 6 2 0 1 2 2 1);河北省创新能力提升计划(2 0 5 6 7 6 0 5 H)第一作者:谢笑莹(1 9 9 5),女,河南商丘人,河北大学在读硕士研究生.E-m a i l:7 9 2 2 7 0 0 6 4q q.c o m 通信作者:郭怀忠(1 9 6 8),男,内蒙古商都人,河北大学教授,博士,主要从事中药质量控制及其药效学研究.E-m a i l:g h u a i z h a l i y u n.c o m第2期谢笑莹等:甘露糖醛酸寡糖增敏环丙沙星抑制大肠埃希菌机制的研究c o m b i n e d w i t h MO S o f h i
13、 g h e r c o n c e n t r a t i o n,t h e c o n t e n t o f C P F X i n E.c o l i w a s l o w e r,h o w e v e r,w h e n w i t h MO S o f a l o w e r c o n c e n t r a t i o n,t h e c o n t e n t o f C P F X i n E.c o l i w a s h i g h e r.T h e a n t a g o n i s t i c r e s u l t s w e r e c o n s i
14、s t e n t w i t h t h e i n h i b i t o r y r e s u l t s w h e n MO S w a s c o m b i n e d u n d e r h i g h c o n c e n t r a t i o n i n t h e b a c t e r i o s t a t i c e x p e r i m e n t.T h e a d d i t i o n o f C a2+r e v e r s e d t h e a n t a g o n i s m b e t w e e n h i g h c o n c e
15、n t r a t i o n o f MO S a n d C P F X t o a c e r t a i n e x t e n t.T h i s s t u d y c a n p r o v i d e r e f e r e n c e f o r t h e d e v e l o p m e n t o f n e w a n t i m i c r o b i a l s y n e r g i s t a n d c l i n i c a l a p p l i c a t i o n o f a n t i-d r u g r e s i s t a n t b a
16、 c t e r i a i n f e c t i o n.K e y w o r d s:m a n n u r o n i c a c i d o l i g o s a c c h a r i d e;c i p r o f l o x a c i n;E s c h e r i c h i a c o l i;C a2+大肠埃希菌(E s c h e r i c h i a c o l i)是临床常见致病菌,其耐药性逐年上升.E.c o l i对头孢类抗生素的耐药率超过4 0%,对氟喹诺酮类抗菌剂的耐药率达到5 0.8%1.当前,许多抗细菌感染药物的选择越来越少,甚至无适合的药物可用,增加现有药物的用量又会增加其毒副作用.因此,构建新型联合用药策略2-3、恢复耐药菌对现有抗菌药物的敏感性,是治疗耐药菌感染的有效途径之一.褐藻胶寡糖(a l g i n a t e o l i g o s a c c h a r i d e,AO S)是褐藻胶部分降解得到的混合寡糖,内含甘露糖醛酸寡糖(m a n n u r o n i c a c i d o l i g o s a c c h