1、GB/T31730-2015表1（续）目标基因引物名称序列扩增片段大小Forward5-TGCATGACGTTATTTATGAGATGGGTTT-3NOS-3113bpReverse5-biotin-GCGCGCGATAATTTATCCTAGTTT-3Forward5-CCAGATAAGGGAATTAGGGTTC-3CaMV35S-T132bpReverse5-biotin-ACTGGATTTTGGTTTTAGGAATTAGA-3Forward5-GACGATCCGTAGTGGAGC-3GOS9117bpReverse5-biotin-GTAATCGTAGTTGGATTTCCACC-35.1.
2、3探针膜芯片表面包被的目标基因探针序列应符合表2的规定。表2目标基因探针序列名称序列修饰基团5-CGCGGCATGCTGCGGGCGGCCGGCTTCAAGCACGGGAACTGGCATGAC-BAR5-AminolinkerC6GTGGGTTTCTG-35-GCAGCTAATCTTCACCTCAGCGTGCTTCGAGACGTTAGCGTGTTTGGGCrylAb5-AminolinkerC6CAAAGGTGGGG-35-TCTACCAGATATAGAGTTCGTGTGAGGTATGCTTCTGTGACOCCTAT-CrylAc5-AminolinkerC6TCACCTCAACGT-35-A
3、GGAGCATCGTGGAAAAAGAAGACGTTCCAACCACGTCTTCAAAGCA-CaMV35S-P5-AminolinkerC6AGTGGATTGATG-35-TTATGATTAGAGTCCCGCAATTATACATTTAATACGCGATAGAAAA-NOS35-AminolinkerC6CAAAATATAGCGC-35-AGCATATAAGAAACCCTTAGTATGTATTTGTATTTGTAAAATACTT-CaMV35S-T5-AminolinkerC6CTATCAATAAAAT-35-GCCTTTACATACGTTGGCACGGACGGGAATGAACATCTTGCA
4、GGTCC-GOS95-AminolinkerC6TTGGGGTGGTGG-35-GCATCCAGATCAGAAGCAATAATGAGCAGTGCGAGAAGAACGAGTGPC5-AminolinkerC6TCCAAAGTACCAG-35-GGTTCCTTGAGAAATGTTTTACGGGATTACTTCCATGTTTGTTGGAT-NC5-AminolinkerC6GATCCTATTTTC-3注：阳性寡核苷酸单链DNA(Positive-O川go,10mo/L):核苷酸序列与阳性对照核酸探针(PC)序列互补，用于膜芯片杂交过程质量控制，5端带生物素(bioi)标记，序列如下：5-biotin-CTGGTACTTTGGACACTCGTTCTTCTCGCACTGCTCATTATTGCTTCTGATCTGGATGC-35.1.4其他试剂5.1.4.1碱性磷酸酶标记链霉亲和素(AP-streptavidin)。5.1.4.2碱性磷酸酶化学显色底物5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸和氣化硝基四氨唑蓝(BCIP/NBT)。
