1、GB/T5009.86-2003蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定(荧光法和2,4-二硝基苯肼法)1范围本标准规定了用荧光法和2,4-二硝基苯肼比色法测定食品中的抗坏血酸。本标准适用于蔬莱、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。本方法检出限：荧光法为0.022g/mL,2,4-二硝基苯肼比色法为0.1g/mL。线性范围：荧光法为5g/mL20g/mL,2,4二硝基苯肼比色法为1g/mL12g/mL,第一法荧光法2原理试样中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸后，与邻苯二按(OPDA)反应生成有荧光的喹唔啉(quinoxaline),其荧光强度与抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食品中抗
2、坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除试样中荧光杂质产生的干扰。3试剂3.1偏磷酸-乙酸液：称取15g偏磷酸，加人40mL冰乙酸及250mL水，加温，搅拌，使之逐渐溶解，冷却后加水至500mL。于4冰箱可保存7d10d。3.20.15mol/L硫酸：取10mL硫酸，小心加人水中，再加水稀释至1200mL。3.3偏磷酸-乙酸-硫酸液：以0.15mol/L硫酸液为稀释液，其余同3.1配制。3.4乙酸钠溶液(500g/L):称取500g乙酸钠(CH,COONa3H.O),加水至1000mL.3.5硼酸-乙酸钠溶液：称取3g硼酸，溶于100mL乙酸钠溶液
3、(3.4)中。临用前配制。3.6邻苯二胺溶液(200mg/L):称取20mg邻苯二胶，临用前用水稀释至100mL。3.7抗坏血酸标准溶液(1mg/mL)(临用前配制)：准确称取50mg抗坏血酸，用偏磷酸-乙酸溶液(3.1)溶于50mL容量瓶中，并稀释至刻度。3.8抗坏血酸标准使用液(100g/mL):取10mL抗坏血酸标准液，用偏磷酸-乙酸溶液稀释至100mL,定容前试pH值，如其pH2.2时，则应用偏磷酸-乙酸-硫酸溶液(3.3)稀释。3.90.04%百里酚蓝指示剂溶液：称取0.1g百里酚蓝，加0.02mo/L氢氧化钠溶液，在玻璃研钵中研磨至溶解，氢氧化钠的用量约为10.75mL,磨溶后用水稀释至250m。变色池围：pH值等于1.2红色pH值等于2.8黄色pH值大于4蓝色3.10活性炭的活化：加200g炭粉于1L盐酸(1十9)中，加热回流1h2h,过滤，用水洗至滤液中无铁离子为止，置于110C120C烘箱中干燥，备用。4仪器4.1实验室常用设备。
