1、河南(h nn)中医学院第二临床医学院诊断学科,第一页，共八十二页。,第二页，共八十二页。,输血前检测(jin c)第一节 病毒性肝炎 第二节 艾滋病 第三节 梅毒,第三页，共八十二页。,第一节 病毒性肝炎血清(xuqng)标志物检测,第四页，共八十二页。,病毒性肝炎的实验诊断(zhndun)我国属病毒性肝炎高发区，全国有肝炎病人2700万人，每年新发病例900万人，HBsAg携带者达一亿二千万人。慢性肝炎中有5070有活性性病毒复制，30开展为肝硬化，510开展为肝癌，故我国又是原发性肝细胞癌的高发国家，慢性HBV携带者患肝癌危险性较非携带者高100倍。,第五页，共八十二页。,第六页，共八十
2、二页。,病毒性肝炎分类(Classification of Viral Hepatitis)1、已确定的肝炎：甲、乙、丙、丁、戊五种。2、未定论的：己、庚和输血传播(chunb)病毒TTV引起的肝炎。3、非甲戊型肝炎,第七页，共八十二页。,5型病毒性肝炎病原体、流行病学(li xn bn xu)和临床特征,第八页，共八十二页。,5型病毒性肝炎病原体、流行病学和临床(ln chun)特征,第九页，共八十二页。,一、甲型肝炎病毒(bngd)标志物检测,1 RNA病毒(bngd),2 只有(zhyu)1个血清型,4 引起典型的急性黄疸性肝炎,3 通过消化道粪-口途径传播,第十页，共八十二页。,一、甲
3、型肝炎病毒(bngd)标志物检测,检查：HAV常在转氨酶升高前56天就存在于患者的血液和粪便中。发病2周开始，粪便中不再排出(pi ch)HAV。目前临床上主要采用酶联免疫吸附试验ELISA和放射免疫分析RIA法检测HAV-IgM和HAV-IgG，其次检测HAVAg。HAV-RNA可采用PCR技术检测。,第十一页，共八十二页。,一、甲型肝炎病毒(bngd)标志物检测,【参考值】均为阴性(ynxng)抗HAV-IgM、抗HAV-IgA、抗HAV-IgG HAVAg HAV-RNA,第十二页，共八十二页。,一、甲型肝炎病毒(bngd)标志物检测,【临床意义】1抗HAV-IgM 是病毒衣壳蛋白抗体，
4、于HAV感染1周后产生(chnshng)，血中持续36个月，是 早期诊断甲肝的特异性抗体。抗HAV-IgA是感染早期肠道粘膜分泌的局部抗体。,第十三页，共八十二页。,一、甲型肝炎病毒(bngd)标志物检测,【临床意义】2抗HAV-IgG 代表着抗HAV总抗体，甲肝初期(chq)血中滴度已相当高，23个月达顶峰。抗HAV-IgG为保护性抗体，病愈后可长期存在.对流行病学调查和接种疫苗效果的观察有重要意义。,第十四页，共八十二页。,一、甲型肝炎病毒(bngd)标志物检测,【临床意义】3HAVAg 存在于HAV感染后1020天的粪便中，其阳性(yngxng)可证实HAV在体内的存在.见于急性期甲肝。
5、发病第1周时粪便阳性率为42.9%，12周为18.3%，2周后消失。,第十五页，共八十二页。,一、甲型肝炎病毒(bngd)标志物检测,【临床意义】4HAV-RNA 从分子水平对HAV抗原给以更准确的说明.对甲型肝炎的诊断具有特异性，对早期诊断的意义(yy)更大。临床少用。,第十六页，共八十二页。,二、乙型肝炎病毒(bngd)标志物检测,第十七页，共八十二页。,一 HBV的形态结构形态：球形颗粒，直径约42nm外膜：厚约7nm，HBsAg+脂类内核核衣壳：直径27nm，HBcAg、DNAP、病毒(bngd)DNA、少量来源于宿主的磷酸激酶,第十八页，共八十二页。,Biological Featu
6、res of HBV,30-40 nm,第十九页，共八十二页。,二HBV在血清中的存在形式完整的病毒(bngd)颗粒(Dane颗粒)，如前述，能复制，有传染性；乙肝外表抗原颗粒，为22 nm的小球型颗粒，由HBsAg和脂类组成，不含DNA，不能复制，不具有传染性*，数量最多；管型颗粒，长30-40 nm的，由HBsAg和脂类组成，不含DNA，不能复制，不具有传染性*，血清中数量最少。,第二十页，共八十二页。,三检查工程(xingm)及临床意义 目前实验室常用的至少有四对抗原抗体系统：HBsAg和抗HBs HBcAg和抗HBc HBeAg和抗HBe Pre-S2和抗Pre-S2 及 乙型肝炎病毒
7、DNA,第二十一页，共八十二页。,1.乙型肝炎病毒外表抗原HBsAg参考值 ELISA法为阴性P/N2.1临床意义 阳性见于急性乙肝的潜伏期，发病时达顶峰；如果发病后3个月不转阴，那么易开展(fzhn)成慢性乙型肝炎或肝硬化。携带者HbsAg也呈阴性，HbsAg是HBV的外壳，不含DNA，故HbsAg本身不具传染性。,第二十二页，共八十二页。,总结 HBsAg阳性的意义1HBV感染的潜伏期；2乙型肝炎急性期；3慢性或迁延性乙型肝炎活动期；4肝炎后肝硬化或原发性肝癌；5无病症HBsAg长期携带者。(6)HbsAg阴性(ynxng)不能完全排除慢性乙型肝炎,第二十三页，共八十二页。,血清别离不佳或
8、用肝素(n s)抗凝血常导致 HBsAg假阳性,注意(zh y),第二十四页，共八十二页。,HBsAg假阴性常见的原因为：5%的急性感染者肝炎病症出现后仍阴性，极少数的慢性感染者也为HBsAg阴性，这种情况需要(xyo)检测抗HBc-IgM及HBV DNA；,注意(zh y),第二十五页，共八十二页。,HBsAg假阴性 S基因突变导致HBsAg的氨基酸结构改变，由于多数商用试剂盒检测系统采用的为多克隆抗体检测HBsAg的a决定簇，这一区域的点突变即可导致临界测定(cdng)值或阴性结果；,注意(zh y),第二十六页，共八十二页。,HBsAg假阴性由于慢性病毒携带者低水平HBsAg携带者或HB
9、V感染潜伏期，HBsAg浓度(nngd)低于检测水平的下限。,注意(zh y),第二十七页，共八十二页。,2.乙型肝炎病毒外表抗体测定乙型肝炎病毒外表抗体是患者对HbsAg所产生的一种抗体，它对HbsAg有一定(ydng)的中和作用，说明机体具有一定(ydng)的免疫力。参考值ELISA法为阴性P/N2.1；临床意义 抗-HBs是种保护性抗体，可阻止HBV穿过细胞膜进入新的肝细胞，提示机体对乙肝病毒有一定程度的免疫力。抗-HBs一般在发病后36个月才出现，可持续多年。,第二十八页，共八十二页。,总结 血清抗HBs检测的意义(yy)1在乙型肝炎感染率调查时,HBsAg、抗-HBs和抗-HBc均为
10、感染率的指标。在这三项指标中,只要其中一项阳性,表示受过HBV感染。2抗HBs是对HBV免疫的指标,抗HBs阳性率和滴度表示人群的免疫状况。,第二十九页，共八十二页。,血清抗HBs检测的意义3 乙型肝炎的诊断和鉴别诊断,在HBV感染(gnrn)后3个月,血清中出现抗HBs。采集双份血清急性期和恢复期同时检测,抗HBs阳转，或恢复期与急性期比较,抗体滴度有4倍或4倍以上增长,表示这次感染(gnrn)为HBV感染(gnrn)。,第三十页，共八十二页。,血清(xuqng)抗HBs检测的意义4乙型肝炎疫苗免疫效果考察。在疫苗免疫前后,采集血清检测抗HBs,如抗HBs阳转或抗体滴度明显提高,表示疫苗免疫
11、效果良好。否那么免疫效果不佳。5对乙型肝炎预后的判断。抗HBs的出现表示疾病处于恢复期，预后较佳。,第三十一页，共八十二页。,同时(tngsh)可检出抗HBs及HBsAg见于：,急性HBV感染时一过性存在，两者浓度均很低以免疫复合物的形式出现(chxin)，以后再采血检测仅有抗HBs；前后或同时感染两种亚型HBV，HBsAg短暂或持续存在反映其中一种亚型感染，抗HBs及HBsAg同时检出通常要持续很久，且浓度均很高；,第三十二页，共八十二页。,同时(tngsh)可检出抗HBs及HBsAg见于：,抗HBs假阳性；编码HBsAg的基因变异(biny)使得HBsAg抗原性改变，原型抗HBs不能将其去
12、除。,第三十三页，共八十二页。,3.乙型肝炎病毒e抗原测定乙型肝炎病毒e抗原是HBV核心颗粒中的一种可溶性蛋白质，具有抗原性。参考值ELISA法为阴性P/N2.1；临床意义HbeAg阳性说明乙型肝炎处于活动期，并有较强的传染性。孕妇阳性可引起垂直传播，致90%以上的新生儿呈HbeAg阳性。HbeAg持续阳性，说明肝细胞损害较重，且可转化(zhunhu)为慢性乙型肝炎或肝硬化。,第三十四页，共八十二页。,注意(zh y)!,前C区基因变异如1896位gua变为-arg导致终止密码子的出现干扰了HBeAg的翻译导致不能生成和分泌HBeAg，血清中HBeAg阴性，但这种突变并不影响(yngxing)
13、乙肝病毒的复制，仍可形成完整的病毒颗粒，该种情况下尽管检测不到HBeAg，慢性HBV感染炎症反响也相当强。,第三十五页，共八十二页。,4.乙型肝炎病毒e抗体测定乙型肝炎病毒e抗体是病人或携带者经HbeAg刺激后所产生的一种特异性抗体，常继HbeAg后出现在血液中。参考值ELISA法为阴性P/N2.1 临床意义抗-Hbe阳性(yngxng)表示大局部乙肝病毒被消除，复制减少，传染性降低，但并非无传染性。,第三十六页，共八十二页。,5.乙型肝炎病毒核心抗原测定乙型肝炎病毒核心抗原存在于Dane颗粒的核心部位，是一种核心蛋白，其外面被乙型肝炎外表抗原所包裹，所以一般情况下血清中不易检测到游离的Hbc
14、Ag。参考值ELISA法为阴性；RIA法为阴性。临床意义HbcAg阳性，提示病人血清中有感染性的HBV存在，其含量较多，表示复制活泼，传染性强，预后(yhu)较差。约有78%的阳性病例病情恶化。,第三十七页，共八十二页。,6.乙型肝炎病毒核心抗体测定乙型肝炎病毒核心抗体是HbcAg的抗体，可分为IgM、IgG和IgA三型。1抗-HBc总抗体主要反映的是抗-HbcIgG。抗-HBc检出率比HBsAg更敏感，可作为HBsAg阴性的HBV感染的敏感指标。抗-HBc检测也可用作乙型肝炎疫苗和血液制品的平安性鉴定和献血员的筛选。抗-HbcIgG对机体无保护作用(zuyng)，其阳性可持续数十年甚至终身。
15、,第三十八页，共八十二页。,(2 抗-HbcIgM测定参考值ELISA法为阴性P/N2：1临床意义急性乙肝的发病期，血中抗-HbcIgM100%阳性，滴度较高，持续6-18个月。抗-HbcIgM既是乙型肝炎近期感染指标，也是HBV在体内持续复制的指标，并提示病人血液有传染性。抗-HbcIgM阴性，预示乙型肝炎逐渐恢复(huf)；抗-HbcIgM转阳，预示乙型肝炎复发。,第三十九页，共八十二页。,(3)抗-HbcIgG测定参考值ELISA法为阴性临床意义抗-HbcIgG是在发病后1个月左右升高，可持续终身。它是HBV既往(j wn)感染的指标，不是早期诊断指标，常用于乙型肝炎流行病学调查。,第四
16、十页，共八十二页。,注意!A、临界阳性一般是假阳性，是由于IgM型引起 的交叉反响。B、抗HBc阴性而HBsAg阳性一般发生在免疫(miny)缺陷病例，这时存在HBV复制的其他标志如 HBeAg及高滴度的HBV DNA。,第四十一页，共八十二页。,注意!C、对抗HBc单独阳性，排除假阳性后，美国CDC有以下解释：急性感染后的恢复早期窗期 在HBV急性感染消退时，HBsAg减少甚至消失，抗HBs尚未出现，抗HBc是唯一能检出 的特异性指标，此时抗HBc IgM也为阳性。被动转移：HBsAg携带者母亲所生(su shn)的婴儿可因母体抗体被动转移抗HBc可通过胎盘而呈现抗HBc单独阳性。,第四十二页，共八十二页。,注意!C、对抗HBc单独阳性，排除假阳性后，美国CDC有以下解释：远期感染伴抗 HBs消失，这种情况通常(tngchng)在感染后多年才会 发生，且相当少见0.5%。远期感染伴有低水平HBsAg。HDV重复感染继发HBsAg产生下降,第四十三页，共八十二页。,抗HBc始终不出现(chxin)或延迟出现(chxin)者占一定比例，可能系,1.与抗原复合2.种族差异3.免疫(miny