1、下丘脑孤啡肽参与电针调整去卵巢大鼠LH异常释放的神经(shnjng)内分泌机制,江苏省中医院内分泌科 安 晓 飞,论文(lnwn)汇报,第一页，共三十页。,OFQ对下丘脑GnRH和垂体(chut)LH释放的药理作用,（3-1）,第二页，共三十页。,孤啡肽（OFQ）1995年 下丘脑 孤儿(g r)受体(ORL1)内源性配体 EOP家族新成员，结构的同源性 痛觉的调制 多种生理功能活动 神经内分泌？1998 PRL GH,研究(ynji)背景,第三页，共三十页。,下丘脑,卵巢(luncho),垂体(chut),GnRH,FSH,LH,E2,P,HPOA,OFQ及其受体分布(fnb),GnRH调控
2、部位（MBH)MPO（内侧视前区）VMH（腹内侧核）ARC（弓状核）,下丘脑OFQ与GnRH释放的调节有关系吗？,第四页，共三十页。,EOP系统(xtng)的比较1998年电生理膜片钳临床疗效和动物实验针灸和血b-内啡肽围绝经期妇女雌激素替代治疗电针调整去卵巢大鼠HPOA异常功能问题 OFQ?GnRH-LH-E2,第五页，共三十页。,研究方法(fngf)实验动物 去卵巢大鼠实验方法 icv injection in vitro incubation RIA ICC RT-PCR Western blot,第六页，共三十页。,The dose response curves for the ef
3、fect of OFQ on plasma LH levels of OVX rats(bP0.05 vs control),第七页，共三十页。,实验(shyn)分组 Control组（ACSF，10l,icv）OFQ组(20nmolOFQ，10l,icv)NC13+OFQ组(20nmol NC13+20nmolOFQ,icv)NC13组(20nmol NC13，10l,icv),OFQ,ORL1,LH,ORL1受体的选择性受体拮抗剂Nphe1NC(1-13)NH2（NC13）,?,第八页，共三十页。,Effect of pretreatment with NC13 on the decrea
4、se of plasma LH level induced by OFQ(bP0.05 vs control),第九页，共三十页。,M:Marker A:hippocampus B:pituitary C:hypothalamus RT-PCR analysis for the expression of ORL1 receptor,问题 OFQ对垂体LH释放(shfng)是否直接作用？,第十页，共三十页。,Effect of OFQ on the LH release from pituitary fragments in vitro,Western blot analysis for th
5、e expression of ORL1 receptor,Ahypothalamus BpituitaryC hippocampus,第十一页，共三十页。,The dose response curves for the effect of OFQ on GnRH release in POA of hypothalamus in PPP,第十二页，共三十页。,OFQ对垂体LH释放（间接(jin ji)作用）是否通过GnRH？OFQ GnRH OFQ LH,40min,2h,OFQ,LH,?,GnRH,直接观察OFQ抑制LH 分泌过程(guchng)中GnRH的变化,第十三页，共三十页。,G
6、nRH 神经元在脑内的分布(fnb),第十四页，共三十页。,The different subtypes of GnRH-IR neurons(800)A13:spins subtype B13:smooth subtype,第十五页，共三十页。,Effect of OFQ on the number of GnRH-IR neurons of OVX rats（bP0.05 vs control）,第十六页，共三十页。,大鼠下丘脑区冠状切面(qimin)概观（10）,第十七页，共三十页。,下丘脑神经(shnjng)解剖和正中隆起GnRH阳性纤维,第十八页，共三十页。,Effect of NC
7、13 and OFQ on GnRH-IR fibers in ME(800),第十九页，共三十页。,The relative density analysis for GnRH-IR fibers in ME hypothalamus(bP0.05 vs control),第二十页，共三十页。,Co-localization of ORL1 mRNA in GnRH-IR neurons in rat hypothalamus.(ORL1 green;GnRH red and double labeled cells yellow),第二十一页，共三十页。,OFQ has no signif
8、icant effect on the release of NE and DA from medial basal hypothalamus of rats(HPLC)国外研究(ynji)OFQ可抑制神经细胞Glu的释放（in vitro and in vivo)Glu是调节GnRH释放兴奋性神经递质（NMDA and KA),调控(dio kn)GnRH释放的因素(+NE,DA,Glu)(-NPY?),第二十二页，共三十页。,NMDA受体的选择性受体拮抗剂 MK-801（0.2mg/kg,sc）实验(shyn)分组 Control组（ACSF，icv）OFQ组(200nmolOFQ，icv
9、)MK801+OFQ组(0.2mg/kg,sc+200nmolOFQ,icv)MK801组(0.2mg/kg,sc),NMDA,第二十三页，共三十页。,Effect of pretreatment with MK801 on the decrease of plasma LH levels induced by OFQ(bP0.05 vs control.eP0.05 vs OFQ group),第二十四页，共三十页。,The dose response study for the effect of NC13 on plasma LH levels of OVX rats(bP0.05 vs
10、 control),第二十五页，共三十页。,小 结,下丘脑OFQ可能通过ORL1 受体介导抑制GnRH的释放，从而减少垂体LH的分泌(fnm)，使血LH水平降低。NMDA受体也可能部分介导了该作用。提示OFQ可能参与了对GnRH和LH释放的生理调节作用，下丘脑可能存在OFQ-Glu-GnRH神经调节通路。,第二十六页，共三十页。,思考(sko)？,OFQ可抑制GnRH和LH的释放的药理和生理作用（OFQ和NC13有潜在的治疗(zhlio)作用）。OFQ及其受体ORL1可能为调整更年期综合症和性早熟神经内分泌异常提供等新的药物治疗靶点。（丹参酮）下丘脑OFQmRNA及其蛋白水平可以作为筛选调节G
11、nRH分泌中西药物的探针。,第二十七页，共三十页。,发表(fbio)论文 Involvement of Nociceptin/Orphanin FQ in release of hypothalamic GnRH mediated by ORL1 receptor in ovariectomized rats Acta Pharmacologica Sinica(SCI,IF=1.125)2005 Sep,26(9):10391044,第二十八页，共三十页。,Thank you,第二十九页，共三十页。,内容(nirng)总结,下丘脑孤啡肽参与电针调整去卵巢大鼠LH异常(ychng)释放的神经内分泌机制。孤啡肽（OFQ）1995年 下丘脑。EOP家族新成员，结构的同源性。in vitro incubation。问题 OFQ对垂体LH释放是否直接作用。Glu是调节GnRH释放兴奋性神经递质（NMDA and KA)。Thank you,第三十页，共三十页。,