1、一、消毒与灭菌(mi jn)二、细菌的分类,第一页，共七十六页。,教学要求,【掌握】消毒、灭菌等基本概念常用(chn yn)消毒灭菌方法及适用范围细菌种、属、菌株、标准菌株的概念，细菌的命名原则和书写规则【熟悉】消毒灭菌的应用【了解】影响消毒灭菌效果的因素,第二页，共七十六页。,消毒灭菌(mi jn)技术发展历史,1847年 匈牙利人塞麦尔维斯：漂白粉洗手降低院内产褥热死亡率1867年 英国人李斯特：发明石碳酸消毒(xio d)法，“腐烂是微生物引起的”1886年 德国人伯格曼：蒸汽灭菌法1890年 美国人哈斯特：戴橡胶手套,李斯特,第三页，共七十六页。,1998年4月，深圳市妇女儿童医院共计
2、手术292例，发生感染166例。致病菌为龟型分枝杆菌。感染原因是浸泡刀片和剪刀的戊二醛配制错误，错把2%戊二醛稀释200倍。2005年12月，上海第九医院专家到安徽宿州市立医院为10例白内障患者实施手术，结果均感染绿脓杆菌，其中9名患者单侧眼球被摘除。感染原因是手术器械不能做到一人一用一灭菌，全用75%的乙醇浸泡手术器械，达不到灭菌要求。2009年10月广东(gung dng)潮阳区谷饶中心卫生院18例剖腹产产妇发生切口感染。原因手术器械等清洗不彻底，手术用刀片、剪刀、缝合线等用戊二醛浸泡，不能达到灭菌效果。,院内感染(gnrn)个案,消毒(xio d)灭菌是减少院内感染发生的关键,第四页，共
3、七十六页。,概念(ginin),灭菌(mi jn),消毒(xio d),防腐,清洁,无菌及无菌操作,概念,视频:供应室消毒灭菌,第五页，共七十六页。,概念(ginin),灭菌(sterilization)杀灭物体上所有微生物的方法(fngf)，包括芽胞在内的全部病原微生物和非病原微生物。消毒(disinfection)杀死物体上病原微生物，不一定能杀死芽胞或非病原微生物的方法。,微生物，包括(boku)有哪些？,第六页，共七十六页。,概念(ginin),防腐(antisepsis)防止或抑制细菌生长(shngzhng)繁殖的方法。细菌一般不死亡。清洁（cleaning）通过除尘埃和一切污秽以减
4、少微生物数量的过程。彻底清洗是保证消毒或灭菌成功的关键,第七页，共七十六页。,概念(ginin),“无菌物品”进入人体内部手术器械、注射器、导管；实验室所用(su yn)培养基、试剂、器材等。,第八页，共七十六页。,概念(ginin),无菌(asepsis)：不含活菌的意思。无菌操作（aseptic technique)：防止微生物进入机体(jt)或物品的操作技术。进行微生物实验、外科手术及医疗技术操作等过程，均需进行严格的无菌操作。,第九页，共七十六页。,擦拭法,第十页，共七十六页。,消毒灭菌(mi jn)的方法,物理消毒(xio d)灭菌法 热力灭菌法 辐射杀菌法 滤过除菌法 干燥与低温抑
5、菌法化学消毒灭菌法 原理及分类,第十一页，共七十六页。,消毒(xio d)灭菌的方法,热力灭菌法（1）干热灭菌 a.焚烧(fn sho)b.烧灼 c.干烤（2）湿热灭菌 a.煮沸法 b.巴氏消毒法 c.间歇灭菌法 d.高压蒸汽灭菌法,利用热力破坏(phui)微生 物的蛋白质、核酸、细胞壁和细胞膜，从而导致其死亡。,第十二页，共七十六页。,干热(n r)灭菌,a.焚烧(fn sho)：b.烧灼：,红外电热(dinr)灭菌器,方法：对废弃物可直接在焚烧炉内焚毁；培养用的试管或烧瓶，当开启或关闭塞子时，将试管（瓶）口或塞子，在火焰上来回旋转2-3次，实验室接种环烧灼。,适用范围：污染的废弃物、病理标
6、本、带脓性分泌物的敷料和纸张等的处理，实验室接种环的消毒灭菌；某些金属器械、搪瓷类物品急用时。,视频：灭菌操作,第十三页，共七十六页。,干热(n r)灭菌,c.干烤：160170 2小时。适用于高温(gown)下不变质、不蒸发的物品，如玻璃器皿、瓷器等。d.红外线 适用于医疗器械、食具,烤箱(ko xin),第十四页，共七十六页。,湿热灭菌比干热(n r)灭菌效力大,（1）菌体蛋白较易凝固；（2）穿透力大；（3）潜热。蒸气(zhn q)变为液态的潜热,穿透力和灭菌(mi jn)效果比较,第十五页，共七十六页。,湿热(sh r)灭菌,a.巴氏消毒法pasteurization：用较低温度杀灭液体
7、中的病原菌、同时又不影响消毒物品的营养成分及香味的消毒 方法:71.715-30s，常用(chn yn)于牛奶和酒类等的消毒。,第十六页，共七十六页。,湿热(sh r)灭菌,b.煮沸法：1005min杀死繁殖体；1001-2h 杀死芽胞 水中加2%碳酸氢钠，可提高沸点到105c.流动蒸汽(zhn q)灭菌法:,是一种简单、经济、应用最早的消毒方法(fngf)之一。适用于耐湿、耐高温的物品。,第十七页，共七十六页。,湿热(sh r)灭菌,d.间歇蒸汽灭菌(mi jn)法：杀死细菌所有繁殖体和芽胞的灭菌法。适用不耐高热含糖、牛奶的培养基。,100 30min37 培养(piyng)1824h 10
8、0 30min37 培养1824h 100 30min,第十八页，共七十六页。,湿热(sh r)灭菌,e.高压(goy)蒸汽灭菌法：103.4kPa,121,1530min，杀死芽胞在内的所有微生物。灭菌效果最好、目前应用最广用于耐高温和不怕潮湿物品的灭菌。,不能灭活朊粒,临床上最常用的一种灭菌(mi jn)法，利用高压及饱和蒸气的高热所释放的潜热灭菌(mi jn)。,第十九页，共七十六页。,手提式高压(goy)蒸汽灭菌器,小型全自动高压(goy)灭菌器不向外排放蒸汽和热力,大型(dxng)全自动高压灭菌器,下排气式压力蒸汽灭菌器,预真空压力蒸汽灭菌器,手提高压蒸汽灭菌器,第二十页，共七十六页
9、。,灭菌(mi jn)效果监测,第二十一页，共七十六页。,灭菌效果监测高压蒸汽灭菌法:嗜热脂肪芽胞杆菌(gnjn)环氧乙烷法：枯草芽胞杆菌,第二十二页，共七十六页。,辐射(fsh)杀菌法,a.紫外线:波长240280nm，260nm最强穿透力差，适用于实验室、无菌室、培养箱等的空气(kngq)消毒及物品表面消毒。注意防护：紫外线对眼睛和皮肤有刺激作用,改变DNA分子构型，干扰细菌(xjn)DNA复制转录,第二十三页，共七十六页。,紫外线消毒(xio d),实验室,杀菌效率与强度和时间的乘积成正比。空气消毒：每10m3空间用30W紫外灯照30min物体表面消毒：紫外灯与物体的距离1.2m。应将物
10、品 摊开(tn ki)或挂起，使其表面直接受到照射,生物(shngw)安全柜,第二十四页，共七十六页。,辐射(fsh)杀菌法,b.日光，微波 c.电离辐射:射线、射线（如60Co）等，用于一次性医用塑料制品，食品保存。穿透力强，可在包装后灭菌(mi jn)辐照食品。,第二十五页，共七十六页。,滤过(l u)除菌法,滤菌器filter 薄膜滤菌器：孔径 0.1m-0.45m 硝基纤维素膜。常用0.22m深层滤器:石绵、玻璃(b l)滤菌器 用途：不耐高温灭菌的血清、细菌毒素、抗生素，以及空气等的除菌。不能除去支原体和病毒。高效空气过滤器HEPA应用于无菌手术室、生物安全柜。,第二十六页，共七十六
11、页。,第二十七页，共七十六页。,高效(o xio)空气过滤器：应用于无菌手术室、生物安全柜等,第二十八页，共七十六页。,干燥(gnzo)与低温抑菌法,低温法:贮藏(zhcng)菌种冷冻真空干燥法-最好的菌种保存方法 加入冷冻保护剂-20-70,冻干(dn n)菌种,低温冰箱,第二十九页，共七十六页。,消毒剂杀菌(sh jn)机制,消毒剂的分类(fn li),消毒剂使用(shyng)原则,消毒剂使用方法,常用化学消毒剂,化学消毒灭菌法,第三十页，共七十六页。,如皮肤(p f)、粘膜、排泄物及周围环境、光学仪器、金属锐气和某些塑料制品的消毒。,用化学药品进行消毒灭菌的方法，凡不适用于热力消毒灭菌和
12、不怕湿的物品(wpn)均可选用此法消毒 杀菌机制：（1）使菌体蛋白质变性或凝固；（2）干扰细菌的酶系统和代谢；（3）损伤细胞膜影响通透性。,消毒剂杀菌(sh jn)机制,第三十一页，共七十六页。,哪种消毒剂适用(shyng)？,中效：杀灭细菌繁殖体、结核杆菌、真菌(zhnjn)、病毒，但不能杀灭芽孢,低效：杀灭细菌(xjn)繁殖体、部分真菌、亲脂性病毒，但不能杀灭结核杆菌、亲水性病毒和芽孢,高效：能杀灭一切微生物，包括芽孢。,消毒剂的分类,第三十二页，共七十六页。,1、根据物品的性能和各种微生物的特性，选择(xunz)合适的消毒剂。,2、严格(yng)掌握消毒剂的有效浓度、消毒时间及使用方法。
13、,3、消毒剂应定期更换(gnhun)，易挥发的要加盖，定期检测、调整浓度。,4、待消毒的物品必须先洗净擦干，全部浸没在消毒液内，并打开物品的套盖。,消毒剂使用原则,第三十三页，共七十六页。,消毒剂使用(shyng)方法,1、浸泡(jnpo)法,2、擦试法(sh f),3、喷雾法,4、熏蒸法,第三十四页，共七十六页。,常用(chn yn)消毒剂类型作用机制及种类,第三十五页，共七十六页。,常用消毒剂种类(zhngli)及使用,第三十六页，共七十六页。,常用(chn yn)消毒剂,高效消毒剂 含氯消毒剂：次氯酸、漂白粉、二氯异氰酸尿酸钠 过氧化物(u yn hu w)消毒剂：过氧乙酸、过氧化氢、二
14、氧化氯 醛类消毒剂：戊二醛（不腐蚀金属）、甲醛 环氧乙烷：800-1200mg/L 56 6h,第三十七页，共七十六页。,环氧乙烷灭菌器（环氧乙烷易燃，有毒）,过氧化氢灭菌器（安全：常温(chngwn)、常压、无毒、无残留 杀菌谱广，杀菌力强）,第三十八页，共七十六页。,中效消毒剂含碘消毒剂：碘伏、碘酊醇类：乙醇7075低效消毒剂季铵盐类：苯扎溴铵（新洁尔灭）氯已定(y dn)（洗必泰）高锰酸钾,常用(chn yn)消毒剂,第三十九页，共七十六页。,高危：需进入无菌组织的物品(wpn)。灭菌 中危：接触黏膜的器械。消毒低危：只接触未损伤皮肤。清洗、消毒室内空气消毒灭菌 物理消毒法：紫外线照射（
15、1.5W/m3，1h）最常用；滤过除菌：高效过滤装置化学消毒法：过氧乙酸或过氧化氢喷雾、熏蒸,医疗器械物品(wpn)的消毒灭菌,消毒灭菌(mi jn)的运用,第四十页，共七十六页。,手和皮肤的消毒 用肥皂(fizo)和流动水正确洗手 病原微生物污染时应用消毒剂消毒。,消毒(xio d)灭菌的运用,免洗手(x shu)消毒液,正确洗手,第四十一页，共七十六页。,黏膜的消毒：过氧化氢、洗必泰病人排泄物与分泌物的消毒灭菌:次氯酸钠病人污染物品的消毒:漂白粉、过氧乙酸 饮水(ynshu)的消毒：氯气环境的消毒,消毒(xio d)灭菌的运用,第四十二页，共七十六页。,影响(yngxing)消毒灭菌效果的
16、因素,抵抗力：芽胞-结核分枝杆菌-病毒(bngd)-繁殖体-真菌,第四十三页，共七十六页。,常用杀菌因子对HIV 污染物消毒(xio d)使用的剂量杀菌因子剂量热（80）72 h紫外线（15 W灯管,距10 cm 处照射）8 min含氯消毒剂（含有效氯500-5000 mg/L）10 30 min碘伏(含有效碘50100 mg/L)1030 min乙醇65%75%溶液 510 min过氧化氢3%溶液 1030 min戊二醛2%溶液 2030 min甲醛5%8%溶液2030 min煤酚皂溶液1%3%溶液1030 min季铵盐类0.1%0.2%溶液30 min 以上,第四十四页，共七十六页。,朊粒的灭活,朊粒：无核酸结构,但在宿主细胞内增殖感染性蛋白质对化学因子的抵抗力是所有(suyu)微生物中最强侵犯中枢神经组织,可引发慢性退行性脑组织病变，如克雅氏病、库鲁病、疯牛病等 1mol/L的氢氧化钠或5%次氯酸钠浸泡1h后，134 高压蒸汽处理2h,第四十五页，共七十六页。,微生物实验室的消毒(xio d)灭菌,实验室哪些常用物品需要(xyo)消毒灭菌？用何方法消毒灭菌？培养基（耐热、不耐热）