1、T细胞亚群结果(ji gu)的解读,山东省聊城市人民医院(yyun)ICU 吴铁军,第一页，共三十页。,淋巴细胞分化(fnhu)图,第二页，共三十页。,按T细胞所处(su ch)的活化阶段 初始T细胞（naive T cell）效应T细胞（effector T cell）记忆性T细胞（memory T cell）按T细胞表面受体（TCR）分类+T细胞+T细胞,按T细胞CD4和CD8分子表型 CD4+T细胞 CD8+T细胞 按T细胞的功能分类 Th（辅助(fzh)T细胞）TS（抑制T细胞）Tr（调节T细胞）,T淋巴细胞的分类(fn li)方法,第三页，共三十页。,外周血中各亚群占淋巴细胞总数(z
2、ngsh)的比例,60-80%,27-51%,15-44%,T淋巴细胞,CD4T淋巴细胞,CD8T淋巴细胞,第四页，共三十页。,淋巴细胞监测(jin c)注重数量、比例、功能相结合,血液分析常规(chnggu)检测,依据白细胞、淋巴细胞比例(bl)及计数绑定机体免疫状况，无法精确判断。,T淋巴细胞亚群比例检测,临床常用，但较片面,T淋巴细胞亚群数量,观察免疫细胞数值变化，评估免疫状况，通常采用流式细胞仪法，特别针对CD4的检测，已成为“金标准”。,功能、数量、比例结合,更精确评估机体免疫状态,1,2,3,4,第五页，共三十页。,目前临床主要可以(ky)做以下项目的检测,淋巴细胞亚群(T+B+N
3、K)的比例(bl)和计数T细胞亚群(CD4+细胞、CD8+细胞、CD4+/CD8+比值）MHLA-DR（单核细胞HLA-DR)CD4CD25Treg（调节细胞）及Th17细胞（我们工作）,目前国内绝大多数医院没有开展淋巴细胞计数(j sh)项目,第六页，共三十页。,(BD)健康中国(zhn u)人参考范围,第七页，共三十页。,CD4+、CD8+T淋巴细胞的计数(j sh)方法一（FCM),取100l全血，加三种不同(b tn)荧光素标记的鼠抗人CD3、CD4、CD8McAb，阴性对照。加红细胞裂解液，溶血，离心，弃上清。用PBS洗1次，PBS重悬细胞，上机检测。FCM分析 电子计算机自动计算出
4、阳性细胞百分率及总细胞计数。,简单、快速、相对(xingdu)精确,第八页，共三十页。,CD3+T细胞(xbo)正常范围为：50-84%CD4+T细胞正常范围为：27-51%CD8+T细胞正常范围为：15-44%CD19+B细胞正常范围为：5-18%与血细胞计数仪联用，得出各淋巴细胞百分比后乘以淋巴细胞数量，得出各淋巴细胞的绝对浓度。,CD4T淋巴细胞的计数(j sh)方法二（推算）,不精确(jngqu)、繁琐,省钱,举例如下,第九页，共三十页。,患者血常规中淋巴细胞计数为0.63 109/L,淋巴细胞比例测定(cdng)结果CD3 为64.9%,CD4为32.5%,CD8为31.1%,CD3
5、细胞(xbo)计数为0.63109/L64.9%0.41 109/LCD4细胞计数为0.63109/L32.5%0.20 109/LCD8细胞计数为0.63109/L31.1%0.19 109/L,推,算,第十页，共三十页。,第十一页，共三十页。,单核细胞人类(rnli)白细胞抗原DR（CD14/HLA-DR）,CD14为LPS复合物受体,主要分布在单核细胞，HLA-DR为活化标志。CD14/HLA-DR可反映人体细胞免疫功能，30%提示免疫麻痹。也有人认为(rnwi)HLA-DR浓度如果连续两天低于8000AB/C可认为存在免疫麻痹。广泛应用于临床。,第十二页，共三十页。,T淋巴细胞亚群研究
6、(ynji),研究逐年(zhnin)增多,第十三页，共三十页。,淋巴细胞亚群变化(binhu)的常见临床意义,CD4淋巴细胞减少：见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷(quxin)病、艾滋病、应用免疫抑制剂的患者CD8淋巴细胞增多：见于自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮（SLE）、艾滋病初期、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等CD4CD8比值异常：比值降低：一般被称为“免疫抑制”状态，常见于免疫缺陷病、恶性肿瘤、再生障碍性贫血、白血病、某些病毒感染等 比值增高：表明细胞免疫功能处于“过度活跃”状态，容易出现自体免疫反应。此外还可用于监测器官移植的排斥反应，若移植后CD4/CD8较移植前明显增加，则可能发生
7、排异反应,第十四页，共三十页。,15,The shift from a pro-in-flammatory to an anti-inflammatory immune response predominant at the systemic level likely occurs before 24 h after diagnosis of shock.,脓毒症休克(xik)期存在免疫麻痹,第十五页，共三十页。,存在免疫(miny)麻痹的Septic患者死亡率大大增加,100名septic患者(hunzh),28天死亡(swng),无免疫麻痹,免疫麻痹,第十六页，共三十页。,脓毒症休克患者(
8、hunzh)T淋巴细胞凋亡、存在免疫紊乱,第十七页，共三十页。,存活(cn hu)与死亡Septic中T淋巴细胞亚群的变化,一项对院内感染的老年(lonin)脓毒症患者的前瞻性对照研究,第十八页，共三十页。,Injury,Int.J.Care Injured(2007)38,13461357,严重多发伤患者免疫细胞的变化(binhu)特点,CD4/CD8降低(jingd),MHLA-DR降低(jingd),T细胞及单核细胞凋亡增加,第十九页，共三十页。,烧伤患者早期外周血淋巴细胞亚群的变化(binhu)特点,烧伤患者白细胞低于正常组早期CD3、CD4、CD8细胞计数 均明显下降(xijing)
9、。HLA-DR表达降低。CD4/CD8比值下降。,第二十页，共三十页。,CD4T细胞(xbo)亚群新分类：Th1、Th2、Treg、Th17,我们(w men)的研究,第二十一页，共三十页。,抗炎细胞(xbo)Treg及其分泌的抗炎介质IL-10；促炎细胞Th17及分泌的促炎介质IL-17、IL-6在人体的炎性免疫稳态中发挥重要作用。,第二十二页，共三十页。,23,中国呼吸与危重监护(jinh)杂志,2010,09(04):416-418.,结论一：脓毒症患者中Treg明显升高(shn o)，表明抗炎反应的增强,第二十三页，共三十页。,24,结论二：在脓毒症患者中Th17表达明显(mngxin
10、)升高,吴铁军(ti jn),亢翠翠,中华急诊医学杂志,2012,21(04):378-380.,脓毒症组,对照组,脓毒症患者中Th17表达(biod)明显升高，提示促炎反应的增强。,第二十四页，共三十页。,25,重症脓毒症患者淋巴细胞增殖(zngzh)能力低下、凋亡,淋巴细胞Ag-NoR在健康(jinkng)组中的表达,淋巴细胞Ag-NoR在Sepsis组中的表达(biod),吴铁军，张丽娜 中国呼吸与危重监护杂志,2010,09(04):416-418.,脓毒症组,对照组,第二十五页，共三十页。,重症脓毒症患者存在免疫(miny)麻痹,中国(zhn u)急救医学杂志,2011,31(9):
11、836-838.,CD14+单核细胞人类白细胞抗原-DR(HLA-DR)表达(biod)情况,对照组,脓毒症组,第二十六页，共三十页。,27,第二十七页，共三十页。,T淋巴细胞亚群的研究越来越多某种T细胞亚群过高或过低，都提示存在免疫功能紊乱，主要用于了解恶性肿瘤、免疫缺陷、重症病毒感染、自身免疫病等患者机体的免疫功能是处于什么(shn me)状态。T细胞亚群的表达受多种因素影响 常“变幻莫测”，因此T细胞亚群的解读应细胞比例结合计数和功能状态，连续动态监测更有意义。严重脓毒症存在免疫紊乱，T淋巴细胞的凋亡，与预后有一定关系。创伤等应激状态同样导致免疫紊乱。,总结(zngji),第二十八页，共三十页。,谢 谢！,第二十九页，共三十页。,内容(nirng)总结,T细胞亚群结果的解读。淋巴细胞亚群(T+B+NK)的比例和计数。淋巴细胞比例测定结果CD3 为64.9%,CD4为32.5%,CD8为31.1%。单核细胞人类白细胞抗原DR（CD14/HLA-DR）。CD14为LPS复合物受体,主要分布在单核细胞，HLA-DR为活化标志。CD14/HLA-DR可反映人体细胞免疫功能，30%提示免疫麻痹。比值增高：表明(biomng)细胞免疫功能处于“过度活跃”状态，容易出现自体免疫反应,第三十页，共三十页。,