1、3.2体外受精和早期(zoq)胚胎培养,一、教学目标：1.简述哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。2.简述哺乳动物胚胎的早期培养方法。3.认同体外受精在家畜(jich)快速繁殖中的重要意义。二、教学重点：1.体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。2.哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。三、教学难点：1.卵母细胞的采集和培养。2.精子的采集和获能。,第一页，共三十二页。,1978年7月25日世界(shji)首例试管婴儿,第二页，共三十二页。,1988年3月10日我国首例试管婴儿(sh un yn r),第三页，共三十二页。,1992年我国首例三胞胎试管婴儿(sh un yn r),第四页，共三十二
2、页。,根据资料回答下列问题：1.资料上用到了什么生物技术？试管婴儿技术（包括体外受精、胚胎体外培养）和胚胎移植技术。2.试管婴儿和母亲正常怀孕(hui yn)，生产的过程有何异同？相同之处：都通过有性生殖产生，在母体子宫内发育形成胎儿。不同之处：受精作用在体外，并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植。,第五页，共三十二页。,试管动物技术：通过 使卵子和精子在 下成熟和受精，并通过培养(piyng)发育成 后，再经移植产生后代的技术。,体外条件(tiojin),人工(rngng)操作,早期胚胎,第六页，共三十二页。,国产奶牛：年均产奶量3000公斤左右国际良种奶牛：年均产奶量10000公斤左右引进一
3、头良种成年奶牛需要3万5万元；牛的生育率低，一头牛一胎只生一只，一生(yshng)只能生育四五次。牛的生育率虽然很低，但是牛的卵母细胞却相当的多，其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多1000倍左右；公牛产生的精子数目就更多了。,一、从试管(shgun)牛说起,第七页，共三十二页。,试管动物技术(jsh)过程：,第一步：体外受精(t wi shu jn),第二步：胚胎的早期(zoq)培养,第三步：胚胎移植,第八页，共三十二页。,胚胎(piti)移植,采集(cij)良种母牛的卵母细胞,卵母细胞的体外培养(piyng),采集良种公牛精子,精子体外获能,体外受精,良种牛体外受精胚胎,受体牛,良种犊牛
4、,成熟期牛,屠宰加工厂,市场,采集卵巢中的卵母细胞,“试管牛”工厂化生产的技术流程图,第九页，共三十二页。,1982年世界(shji)首例试管牛犊问世,实现良种牛快速大量繁殖(fnzh)首先要做的是 和 的培养。,体外受精(t wi shu jn),早期胚胎,第十页，共三十二页。,主要包括、和 等几个(j)主要步骤。,概念：采取(ciq)雌性动物的 和雄性动物的，使其在 中受精。,二、体外受精(t wi shu jn),卵母细胞,精子,试管,卵母细胞的采集,精子的获取,受精,第十一页，共三十二页。,1.卵母细胞的采集(cij)和培养,对不同动物,采集卵母细胞的方法不同。实验动物如小鼠、兔，以及
5、家畜猪、羊等卵细胞的采集：最常用的方法是卵巢(luncho)经过 处理，具体做法是给供体注射，使一头母畜一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子，之后从 中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。,超数排卵,促性腺激素,输卵管,第十二页，共三十二页。,大家畜或大型(dxng)动物，如牛，卵细胞的采集：从屠宰场已屠宰母畜的 中采集卵母细胞，也可以借助、或 等工具确定卵泡位置，直接从活体动物中吸取泡卵液（连同卵母细胞）取出，在体外进行人工培养，使其成熟。,卵巢(luncho),超声波(B超)探测仪,内窥镜,腹腔镜,第十三页，共三十二页。,牛卵巢(luncho),第十四页，共三十二页。,B超活采仪,第
6、十五页，共三十二页。,第十六页，共三十二页。,B超引导法：借助超声波探头和屏幕的引导，从活母畜卵巢采集卵母细胞。操作员先将带有超声波探头和采卵针的采卵器通过阴道插入子宫(zgng)，同时通过将卵巢贴在探头上。根据B超屏幕所显示的卵泡位置，利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸卵母细胞。,第十七页，共三十二页。,第十八页，共三十二页。,第十九页，共三十二页。,活体(hu t)采集的牛卵母细胞,第二十页，共三十二页。,第二十一页，共三十二页。,卵母细胞的成熟(chngsh)培养：CO2培养箱,第二十二页，共三十二页。,培养箱,第二十三页，共三十二页。,培养箱,第二十四页，共三十二页。,2.精子(jngz)的
7、收集和获能,假阴道(yndo)法,手握法,电刺激法,第二十五页，共三十二页。,在体外受精前，要对精子进行(jnxng)获能处理。通常采用的体外获能方法有 和 两种。对于、和 的精子，一般采用培养法；对于、等家畜的精子常用化学法。培养法：精子在获能液中获能。化学诱导法：精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中，用化学药物诱导获能。,培养(piyng)法,化学(huxu)诱导法,啮齿动物,家兔,猪,牛,羊,第二十六页，共三十二页。,3.受精(shu jng),获能的精子和培养成熟的卵子，一般情况下在 或中完成受精(shu jng)过程。,获能溶液(rngy),专用受精溶液,第二十七页，
8、共三十二页。,三、胚胎的早期(zoq)培养,概念：是应用人工(rngng)创造条件，对获取的 进行体外培养。培养液成分：水、无机盐、糖类、维生素、氨基酸、激素、核苷酸、血清等,早期(zoq)胚胎,第二十八页，共三十二页。,不同动物胚胎移植时间不同牛、羊：桑椹胚或囊胚阶段小鼠、家兔：卵裂(lun li)期或囊胚阶段试管婴儿：8个或16个细胞阶段,胚胎(piti)培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。,第二十九页，共三十二页。,第三十页，共三十二页。,试管动物 与 克隆动物相比生殖方式：技术手段：遗传(ychun)规律：,有性生殖(yuxng shngzh)无性生殖,核移植技术(jsh)、胚胎移植,遵循 无,体外受精胚胎移植,第三十一页，共三十二页。,内容(nirng)总结,3.2体外受精和早期胚胎培养。1.卵母细胞的采集和培养。2.精子的采集和获能。试管婴儿技术（包括体外受精、胚胎体外培养）和胚胎移植技术。胚胎移植。对不同动物,采集卵母细胞的方法不同。等工具确定卵泡位置，直接从活体动物中吸取泡卵液（连同卵母细胞）取出，在体外进行人工(rngng)培养，使其成熟。操作员先将带有超声波探头和采卵针的采卵器通过阴道插入子宫，同时通过将卵巢贴在探头上。培养法：精子在获能液中获能,第三十二页，共三十二页。,