1、医院消毒灭菌效果监测广西区疾病(jbng)预防控制中心 消毒与媒介防制科电话：,第一页，共三十七页。,医院(yyun)消毒效果监测的意义,医院消毒灭菌是预防医院内感染(gnrn)的重要措施之一，消毒效果的监测是评价其消毒设备运转是否正常、消毒药剂是否有效、消毒方法是否合理、消毒效果是否达标的唯一手段，因而在医院消毒、灭菌工作中必不可少。,第二页，共三十七页。,一、医院消毒效果监测(jin c)的原则,监测人员需经过专业培训，掌握一定的消毒知识，熟悉消毒设备和药剂性能，具备熟练(shlin)的检验技能；选择合理的采样时间和顺序 遵循严格的无菌操作,第三页，共三十七页。,二、医院消毒效果(xiog
2、u)监测范围,日常监测重点科室（手术室、层流洁净病房、ICU、产房、新生儿科、母婴同室病房、透析室、血液病房、烧伤病房、供应室、内镜室、治疗室、换药室 发生医院内感染(gnrn)时应在发生感染(gnrn)的科室及相关科室采样监测,第四页，共三十七页。,三、医院消毒效果监测(jin c)分类,消毒灭菌效果监测：使用中消毒液或无菌器械(qxi)保存液 灭菌设备（压力蒸汽灭菌器、环氧乙烷灭菌器）紫外线灯 灭菌物品 环境卫生学监测：空气 物表 医务人员手,第五页，共三十七页。,四、空气(kngq)消毒效果监测,1、采样时间(shjin)：消毒处理后、操作前进行采样。2、布点及采样方法：（1）类环境布点
3、、采样方法：依据医院洁净手术部建筑技术规范、手术区：需要特别保护的手术台及其周围区域。级手术室的手术区是指手术台两侧边至少各外推0.9m、两端至少各外推0.4m后（包括手术台）的区域；级手术室的手术区是指手术台两侧边至少各外推0.6m、两端至少各外推0.4m后(包括手术台)的区域；级手术室的手术区是指手术台四边至少各外推0.4m后（包括手术台）的区域。级手术室不分手术区和周边区。周边区：洁净手术室内除去手术区以外的其他区域。,第六页，共三十七页。,（1）类环境级手术室布点(b din)方法,级手术室布点方法：13个点。其中(qzhng)：手术区5个点（双对角线布点），周边区8个点（每边内2点）
4、。,第七页，共三十七页。,（1）类环境级手术室布点(b din)方法,级手术室布点(b din)方法：9个点。其中：手术区3个点（单对角线布点），周边区6个点（长边内2点，短边内1点）。,第八页，共三十七页。,（1）类环境级手术室布点(b din)方法,类环境级手术室共布7个点。其中：手术(shush)区3个点（单对角线布点），周边区4个点（每边内1点）。,第九页，共三十七页。,类环境(hunjng)采样方法,将普通营养琼脂平皿（直径为9cm）放在室内(sh ni)手术区和周边区各采样点处，采样高度离地面0.8米，采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露30 分钟，盖好，于37培养24小时，分别
5、计数手术区和周边区的平均菌落数。,第十页，共三十七页。,（2）、类环境布点、采样(ci yn)方法,依据消毒技术规范(卫生部2002年版。室内面积30M2，设内、中、外对角线3点，内、外点布点部位距墙壁1M处；室内面积30 M2，设4角及中央5点（双对角线），4角的布点部位距墙壁1M处。将普通营养琼脂平皿(直径为9cm)放在室内各采样点处，采样高度距地面1.5米（GB15982-1995：0.81.5米），采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露5分钟，盖好立即送检，于37培养48小时，计数平板菌落数，并计算出空气(kngq)细菌菌落总数。,第十一页，共三十七页。,3、空气样品(yngpn)检测
6、方法,依据消毒技术规范要求进行。平板暴露法结果计算公式：细菌(xjn)总数(cfu/m3)=50000N/(AT)式中A为平板面积（cm2）；T 为平板暴露时间（min）；N 为平均菌落数（cfu）；,第十二页，共三十七页。,4、结果(ji gu)判定,类区域结果(ji gu)判定：,第十三页，共三十七页。,4、结果(ji gu)判定,类区域结果判定(pndng)：细菌总数200 cfu/m3，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格。类区域结果判定：细菌总数500 cfu/m3，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格。,第十四页，共三十七页。,空气(kngq)采样时的注意事项,1、
7、（消毒前）前提将放置平皿的采样台准备好。2、开门方式：自动门,推拉式弹簧门,有把手的门。3、行走路线（尽可能少 在室内走动）动作要 轻。先布皿 后开盖。4、动态环境 5、同一(tngy)房间空气、物表 采样，先采空气，后 采物表；最好由同一 人操作。,第十五页，共三十七页。,五、物体表面(biomin)消毒效果监测,1、采样时间：消毒处理后进行采样。2、采样方法：用5cm5cm的标准灭菌规格板，放在被检物体(wt)表面，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转棉拭子，连续采样4个，剪去手接触部位后，投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，进行细
8、菌菌落总数和致病菌检测。门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样,第十六页，共三十七页。,五、物体表面(biomin)消毒效果监测,3、检测方法：（1）细菌总数检测：检测方法按消毒(xio d)技术规范3.17.6.3（1）执行。小型物体表面的结果计算，用cfu/件。（2）致病菌检测：检测方法按消毒技术规范原则执行。4、结果判定、类区域：细菌总数5cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。类区域：细菌总数10cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。类区域：细菌总数15cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。,第十七页，共三十七页。,采样(ci yn)注意事项,1、空气、物表采样由同一人操
9、作。2、物表采样应由近及远，兼顾上下中左右 3、母婴同室、血透室属类环境 4、样品标识一定要清楚，能朔源、追踪，以便整 改。5、致病菌包括金黄色葡萄球菌(p to qi jn)、铜绿假单胞菌、溶血性链球菌（产房、新生儿科、母婴同室加 测沙门氏菌）6、采样棉签在现场要做空白对照。,第十八页，共三十七页。,六、手消毒效果(xiogu)监测,1、采样时间：消毒后立即采样。2、采样方法：被检人五指并拢，用浸有含相应(xingyng)中和剂的无菌洗脱液的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦2次(一只手涂擦面积约30cm2)，并随之转动采样的棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入10ml含相应中和剂
10、的无菌洗脱液试管内，进行细菌菌落总数和致病菌检测。,第十九页，共三十七页。,3、手消毒(xio d)效果监测检测方法,（1）细菌总数检测：将采样管在混匀器上振荡20秒或用力振打80次，用无菌吸管吸取1.0ml待检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种2个平皿，内加入(jir)已溶化的4548的营养琼脂15ml18 ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置361温箱培养48h，计数菌落数。采样结果计算方法：细菌总数（cfu/cm2）=（2）致病菌检测：按消毒技术规范原则执行。,第二十页，共三十七页。,4、结果(ji gu)判定,、类区域工作人员：细菌总数5cfu/cm2，并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜
11、绿假单胞菌为消毒合格。类区域：细菌总数10cfu/cm2，并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。类区域：细菌总数15cfu/cm2，并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。母婴同室、婴儿室、新生儿科及儿科病房的工作人员手上，不得(bu de)检出沙门氏菌、大肠杆菌、溶血性链球菌、黄色葡萄球菌。,第二十一页，共三十七页。,注意事项,1、分清普通卫生洗手和外科洗手卫生手消毒。外科洗手标准值?类环境：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌(d chn n jn)、铜绿假单胞菌(产房、母婴同室、新生儿科加测沙门氏菌、溶血性链球菌)类环境：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌,第二十二页，共三十七页。,七、使用中消毒液
12、或无菌器械保存(bocn)液监测,1、使用中消毒液有效成分的测定 2、使用中消毒液或无菌器械保存液染菌量的测定（1）涂抹法：（2）倾注法：用无菌吸管吸取消毒液1.0 ml，加入到9ml含相应中和剂的无菌生理盐水采样管中混匀，分别取0.5ml放入2只灭菌平皿内，加入已溶化的4548的营养琼脂15ml18 ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，一平板置20培养7天，观察霉菌生长情况；另一个平板置361温箱培养72h，计数菌落数。同时(tngsh)按检测致病菌。使用中消毒液或无菌器械保存液染菌量（cfu/ml）=每个平板上的菌落数20 结果判定：消毒液染菌量100cfu/ml，并未检出致病菌为合格。,第二
13、十三页，共三十七页。,注意事项：,1、必须是使用中消毒液或无菌器械保存液。2、要求采样后1h内检测，实际工作中由于各种原因做不到，采5ml样品放在灭菌试管中（试管中不放中和剂）带回实验室。3、样品名称一定要标识清楚，不仅要注明采样地点，而且要注明消毒液的名称、有效浓度等，例：劲康消毒剂、0.1%健之素消毒液、80%漂白粉溶液、0.5%洗必泰等标识都是不正确的。4、消毒液细菌菌落总数标准值100cfu/ml，无菌器械保存液细菌菌落总数标准值是不得(bu de)检出。5、致病菌检测包括金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、沙门氏菌、溶血性链球菌。,第二十四页，共三十七页。,八、灭菌物品消毒效果(xiogu
14、)监测,1、采样时间：在灭菌处理后，存放有效期内采样。2、采样方法：按消毒技术规范原则执行 3、结果判定：阳性对照在24小时内应有菌生长，阴性对照在培养期间应无菌生长,如需-厌氧菌及霉菌培养管内均为澄清或虽显浑浊但经证明并非有菌生长，判为灭菌合格(hg)；如需-厌氧菌及霉菌培养管中任何1管显浑浊并证实有菌生长，应重新取样，分别同法复试2次，除阳性对照外，其他各管均不得有菌生长，否则判为灭菌不合格。,第二十五页，共三十七页。,4、灭菌(mi jn)物品消毒效果监测注意事项,1、无菌检验应在洁净度为100级单向流空气区域内进行，最好把灭菌包带回在百级实验室打开。应严格遵守无菌操作，避免微生物污染。
15、2、应采有效期内的样品（高压(goy)灭菌：一般是两周；还氧乙烷：两年）,第二十六页，共三十七页。,九、灭菌器灭菌效果(xiogu)监测,1、监测方法：工艺监测 化学监测（化学指示卡、指示胶带）生物监测2、常用灭菌器种类 压力蒸汽(zhn q)灭菌器 环氧乙烷灭菌器 3、生物指示物 嗜热脂肪杆菌芽胞（ATCC7953）,压力蒸汽灭菌器 枯草杆菌黑色变种芽胞（ATCC9372）环氧乙烷灭菌器,第二十七页，共三十七页。,4、压力蒸汽灭菌器灭菌效果监测检测(jin c)方法,生物指示菌片布放方法（消毒技术规范）（1）将两个嗜热脂肪杆菌芽胞菌片分别装入灭菌(mi jn)小纸袋内，置于标准试验包中心部位
16、。（2）下排气压力蒸汽灭菌器灭菌柜室内，排气口上方放置一个标准试验包 预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌器灭菌柜室内，排气口上方放置一个标准试验包 手提压力蒸汽灭菌器：通用贮物盒代替标准试验包，贮物盒内盛满中试管，指示菌片放于中心部位的两支灭菌试管内，贮物盒放于手提压力蒸汽灭菌器底部。,第二十八页，共三十七页。,4、生物指示菌片布点(b din)方法,生物指示菌片布放方法（现代医院消毒）（1）将两个嗜热脂肪杆菌芽胞菌片分别装入灭菌小纸袋内，置于标准(biozhn)试验包中心部位。（2）0.5 M3以上的大灭菌柜在上层和中层中央部位，下层前、中、后等五个部位各放一个试验包。小型灭菌柜（两层）在上层中央部位和下层前、后等三个部位各放一个试验包；小型灭菌柜（三层）在上、中、下层中央各放一个试验包 手提式或台式灭菌器在下层（底部）放一个试验包。,第二十九页，共三十七页。,经一个灭菌周期后，在无菌的条件下取出标准试验(shyn)包或贮物盒中的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中，经培养7天（自含式生物指示物按说明书执行），观察培养基颜色变化。检验时设阴性对照和阳性对照。结果判定：每个指示菌片接