1、第4 5卷 第3期2 0 2 3年 6月海 洋 湖 沼 通 报T r a n s a c t i o n s o f O c e a n o l o g y a n d L i m n o l o g yV o l.4 5 3J u n.,2 0 2 3丁香油对黄姑鱼幼鱼麻醉效果的研究王晓龙1,2,李 莉1,3,菅玉霞1,2,高凤祥1,2,王 雪1,4,郭 文1,4,胡发文1,2,4*(1.山东省海洋科学研究院,山东 青岛 2 6 6 1 0 4;2.山东省海水健康养殖工程技术研究中心,山东 青岛 2 6 6 1 0 4;3.山东省海水养殖病害防治重点实验室,山东 青岛 2 6 6 1 0 4
2、;4.青岛市浅海底栖渔业增殖重点实验室,山东 青岛 2 6 6 1 0 4)摘 要:合理使用麻醉剂,能够降低长途运输、人为操作等对鱼体的伤害,提高存活率。为研究丁香油对黄姑鱼(N i b e a a l b i f l o r a)的麻醉效果,在(1 60.5)水温下,对体质量(1 3.9 13.3 6)g的黄姑鱼幼鱼进行了麻醉和复苏实验。根据黄姑鱼幼鱼在麻醉和复苏过程的行为特征变化,将麻醉过程分为6个时期,复苏过程分为4个时期。研究结果显示:丁香油浓度3 0 m g/L时,黄姑鱼幼鱼能够进入麻醉4期(麻醉期),入麻时间随丁香油浓度升高而逐渐缩短,浓度 5 0 m g/L时可在3 m i n内
3、入麻;所有浓度下复苏时间均0.0 5);反之,则有显著差异(P5 m i n;浓度范围在5 08 0 m g/L时,入麻时间为34 m i n;浓度为1 1 0、1 2 0 m g/L时,入麻时间2 m i n。随丁香油浓度升高,黄姑鱼幼鱼在自然海水中的复苏时间延长。其中,浓度为3 0、4 0 m g/L时,复苏时间0.0 5);当丁香油浓度为7 0、8 0 m g/L时,幼鱼在4期仅停留1 m i n左右,随后进入5期(深度麻醉期),呼吸频率降低至(1 8.44.1)和(2 1.45.1)次/m i n;当丁香油浓度9 0 m g/L时,呼吸频率继续降低至1 5 次/m i n以下,并维持较
4、短时间后出现休克,呼吸停止。2.3 空气暴露时间对黄姑鱼复苏效果的影响空气暴露时间对黄姑鱼幼鱼复苏时间和复苏率的影响如图3所示。黄姑鱼幼鱼的复苏时间随空气暴露时间增加呈先下降后升高的趋势。空气暴露时间由3 m i n升高至6 m i n,复苏时间由(3.9 70.4 4)m i n缓慢降低至(2.8 00.5 2)m i n;而当空气暴露时间7 m i n时,复苏时间呈现显著性增加(P0.0 5),且同处理组内个体复苏时间差异增大,部分无法复苏,出现死亡个体。空气暴露时间为36 m i n时,复苏率保持在1 0 0%,当7 m i n时,随空气暴露时间增加,复苏率持续下降,在1 0 m i n
5、时复苏率降低至5 3.3 3%。图2 不同丁香油浓度对黄姑鱼幼鱼呼吸频率的影响F i g.2 R e s p i r a t o r y r a t e o f j u v e n i l e N i b e a a l b i f l o r a a t d i f f e r e n t c l o v e o i l c o n c e n t r a t i o n s图3 空气暴露时间对黄姑鱼幼鱼复苏效果的影响F i g.3 E f f e c t o f a i r e x p o s u r e t i m e o n r e c o v e r y t i m e a n d
6、r e c o v e r y r a t e o f j u v e n i l e N i b e a a l b i f l o r a 3 讨论3.1 丁香油的麻醉作用机制及其有效浓度丁香油作为鱼用麻醉剂,其作用机制为丁香酚由鳃丝或体表进入体内后,首先抑制大脑皮层的活动,导致视觉、触觉减弱直至丧失;随后作用于基底神经节和小脑,呈现无意识运动增多和身体平衡能力下降;再作用于脊髓,鱼类呈现全身麻醉状态,失去反应能力;如果剂量过大或者作用时间过长,则会麻痹呼吸和循环中枢神经,鱼类呼吸停止,无法恢复,死亡1 2-1 3。本研究表明,随麻醉程度加深,黄姑鱼幼鱼先后呈现出视觉、触觉、平衡能力和肌肉
7、张力的缺失,呼吸频率逐渐降低直至停止,这符合麻醉剂对神经系统作用的先后顺序。M a r k i n g等1 4认为,理想的麻醉浓度应当是在满足合理暴露时间前提下,能够使鱼类在3 m i n内进入麻醉4期(麻醉期),并在5 m i n内复苏。许多国内外学者7-1 1,1 5-1 8在定义最佳麻醉浓度时均参考此标准。本研究结果显示,5 01 2 0 m g/L的浓度范围内的丁香油处理组黄姑鱼幼鱼均可在3 m i n内入麻,并5 m i n内复苏。但是实际生产中不建议使用较高浓度的丁香油进行麻醉,因为实验条件下幼鱼入麻后能够被及时转至自然海水中复苏,即使是高浓度的处理组丁香酚仍未在体内充分富集,转入
8、自然海水后亦3期丁香油对黄姑鱼幼鱼麻醉效果的研究3 5 能很快排出体外,而实际生产中麻醉群体数量通常较大,个体间的差异使入麻时间不同步,高浓度麻醉剂很难控制麻醉时间,稍有不慎会使部分个体麻醉时间过长,从而健康受损甚至死亡,因此持续麻醉时间需要足够的安全边界1 9。本研究结果显示,当丁香油浓度7 0 m g/L时,黄姑鱼幼鱼在麻醉4期停留时间较短,很快发展至麻醉5期甚至麻醉6期,持续麻醉时间的安全边界收缩。综上,从安全和有效两方面考虑,认为本研究中黄姑鱼幼鱼丁香油麻醉的适宜浓度为5 06 0 m g/L。丁香油对不同鱼类种类的麻醉效果存在较大的差异,本研究得出的黄姑鱼幼鱼适宜麻醉浓度处于中等水平
9、,与大西洋鲑(S a l m o s a l a r)2 0接近,高于斑马鱼(D a n i o r e r i o)2 1、黄斑篮子鱼(S i g a n u s o r a m i n)2 2,低于暗纹东方鲀(T a k i f u g u o b-s c u r u s)1 8和俄罗斯鲟(A c i p e n s e r g u e l d e n s t a e d t i)2 3。另外,丁香油的麻醉效果受环境和鱼类自身因素影响4,上述浓度范围是在(1 60.5)条件下,对体质量(1 3.9 13.3 6)g黄姑鱼幼鱼的实验得出的,不同温度、鱼体规格下丁香油的麻醉效果需要在以后的实验
10、中进一步深入研究。3.2 丁香油对黄姑鱼幼鱼呼吸频率的影响鱼类在经麻醉处理时呼吸频率的大小能够反映其麻醉程度的高低。一般情况下麻醉程度越高,呼吸频率越低。许多学者认为鱼类的呼吸频率在整个麻醉期间是持续下降的,例如丁香油麻醉许氏平鲉(S e-b a s t e s s c h l e g e l i)1 5、大泷六线鱼(H e x a g r a mm o s o t a k i i)1 7、黑鲈(M i c r o p t e r u s s a l m o i d e s)2 4、黄腊鲹(T r a c h i n o t u s b l o c h i i)2 5、M S-2 2 2麻醉美
11、洲鲥(A l o s a s a p i d i s s i m a)2 6等。本研究表明,随丁香油浓度的升高,黄姑鱼幼鱼的呼吸频率总体呈下降的趋势。低浓度(1 02 0 m g/L)时,黄姑鱼幼鱼缓慢麻醉至2期(深度镇定期)和3期(轻度麻醉期)后麻醉程度不再加深,呼吸频率较正常状态略有下降后保持相对稳定,原因可能是鱼体对丁香酚的摄入速率与其代谢、排出的速率达到了相对平衡的状态,这与曹晓聪等2 2对黄斑篮子鱼的研究结果一致。随浓度升高,鱼体自身的代谢能力不足以将血液中麻醉剂维持在低浓度水平,导致麻醉程度加深,呼吸频率下降,最终呈现46期的麻醉状态。当浓度为3 06 0 m g/L时,幼鱼均能够
12、保持1 m i n以上4期麻醉状态,由于处于相同麻醉时期,呼吸频率随麻醉剂浓度升高而下降的趋势不明显。本研究结果显示6 0 m g/L的幼鱼呼吸频率出现小幅上升,原因可能是在中等浓度的麻醉剂作用下幼鱼呼吸频率存在较大的个体差异1 5,也可能是测定时间段后期幼鱼开始向5期麻醉过渡,出现了不规律呼吸,从而造成短时间内统计的呼吸次数偏高。当浓度7 0 m g/L时,幼鱼血液中丁香酚含量迅速上升,入麻后呼吸很快变得断断续续且更加缓慢,持续一段时间后发生休克,呼吸停止。3.3 空气中暴露时间对黄姑鱼幼鱼复苏的影响为方便测量、活体取样、人工催产、标记放流等人工操作,生产实践中需要将鱼麻醉后取出短时间暴露在
13、空气中,因此研究空气暴露时间对鱼类复苏的影响很有必要2 7。本研究表明1 2 0 m g/L丁香油深度麻醉剂后,当空气暴露时间6 m i n时,黄姑鱼幼鱼的复苏时间随空气暴露时间的增加而逐渐减小,而且复苏率全部保持1 0 0%;当空气暴露时间7 m i n时,幼鱼复苏时间显著增加,而且同处理组内个体复苏时间差异增大,出现部分个体死亡,无法复苏,其复苏率随空气暴露时间增加逐渐降低。原因可能是:黄姑鱼幼鱼离水后,环境中的麻醉剂不再向体内富集,而已作用于神经系统的麻醉剂则随血液循环逐渐扩散至全身,一部分被代谢分解,另一部分经皮肤排出体外,实际上的复苏过程在空气暴露期间时已经开始了2 2,因此一定范围
14、内,空气暴露时间越长,在清洁海水中复苏时间越短;随着空气中暴露时间的继续延长,鱼体的呼吸作用逐渐恢复,耗氧率增加,长时间干露胁迫使其无法摄入充足氧气,从而产生窒息或者昏迷2 8,导致复苏时间延长,甚至部分个体死亡。鱼的种类不同,丁香油麻醉后能够忍受的空气暴露时长也存在差异。本研究表明,为保证复苏效果,黄姑鱼幼鱼空气暴露时间不宜超过6 m i n,这与黄斑篮子鱼2 2上的研究结果一致,而相比之下,大泷六线鱼能够忍受的空气暴露时间更长1 7,刀鲚(C o i l i a n a s u s)忍受的空气暴露时间则更短2 9。3 6 海 洋 湖 沼 通 报2 0 2 3 年4 结论本研究表明,丁香油对
15、黄姑鱼幼鱼具有良好的麻醉效果,具有入麻时间短,复苏快,复苏率高等优点;在对相似规格黄姑鱼幼鱼人工操作时建议丁香油麻醉浓度为5 06 0 m g/L,且建议麻醉后离水人工操作时间不宜超过6 m i n。参考文献1 薛宝贵,楼宝,徐冬冬,等.密度胁迫对黄姑鱼幼鱼生长、代谢及非特异性免疫的影响J.渔业科学进展,2 0 1 3,3 4(2):4 5-5 1.2 徐冬冬,詹炜,楼宝,等.网箱养殖黄姑鱼生长特性初步研究J.渔业现代化,2 0 1 0,3 7(5):3 4-3 7.3 D A I T,Z HAO E,L U G,e t a l.S p e r m c r y o p r e s e r v
16、a t i o n o f y e l l o w d r u m N i b e a a l b i f l o r a:A s p e c i a l e m p h a s i s o n p o s t-t h a w s p e r m q u a l i t yJ.N e t h e r l a n d s:A q u a c u l t u r e,2 0 1 2,3 6 8:8 2-8 8.4 刘春花,赵长臣,巩华,等.丁香油麻醉剂在水产养殖上的应用研究进展J.广东饲料,2 0 1 6,2 5(1 1):3 3-3 6.5 E N D O T,O G I S H I MA K,T ANAKA H,e t a l.A n e s t h e t i c e f f e c t o f e u g e n o l i n s o m e f r e s h w a t e r f i s h e s J.N i p p o n S u i s a n G a k k a i-s h i,1 9 7 2,3 8(7):7 6 1-7 6 7.6 HO S KON E N P,