1、2023 年 4 月国际神经病学神经外科学杂志Vol.50 No.2第 50 卷 第 2 期Journal of International Neurology and NeurosurgeryApr.2023分子病理与组织病理对胶质母细胞瘤诊断的一致性分析徐义强，于如同，高文昌，阴鲁鑫徐州医科大学附属医院神经外科，江苏 徐州 221000摘要：目的通过比较胶质母细胞瘤患者组织病理和分子病理结果的差异，分析组织病理在诊断胶质母细胞瘤方面的局限性。方法回顾性分析2020年1月2022年7月在徐州医科大学附属医院神经外科经手术治疗的胶质母细胞瘤患者病理资料共83例。以分子病理为金标准，将组织病理在
2、胶质母细胞瘤的诊断上与分子病理不一致的患者的记为A组（26例），一致的患者的记为B组（57例），通过对比两组的具体差异，分析组织病理在诊断胶质母细胞瘤方面的局限性。结果组织病理在胶质母细胞瘤的诊断上与分子病理的一致率仅为68.67，检测异柠檬酸脱氢酶1(IDH-1)突变、O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶（MGMT）启动子甲基化和-地中海贫血/精神发育迟滞综合征 X 染色体相关基因（ATRX）突变与分子病理的一致率分别为 85.54、60.24和87.95。两组患者组织病理在检测IDH-1的正确率上存在差异（65.38vs 94.73，P0.01），细胞增殖相关核抗原（Ki-67）指数也存在差异
3、（P0.01）。结论组织病理检测胶质母细胞瘤中MGMT甲基化的正确率低。组织病理在胶质母细胞瘤的诊断上发生错误的原因主要是IDH-1的诊断错误。对临床上症状进展快的患者，即使组织病理Ki-67指数低，分级为低级别，也应行分子病理检测，明确其是否为胶质母细胞瘤。国际神经病学神经外科学杂志,2023,50(2):29-33关键词：胶质母细胞瘤；分子病理；组织病理中图分类号：R739.41 DOI:10.16636/ki.jinn.1673-2642.2023.02.006Consistency between molecular pathology and histopathology in di
4、agnosis of glioblastomaXU Yiqiang，YU Rutong，GAO Wenchang，YIN Luxin.Department of Neurosurgery，Affiliated Hospital of Xuzhou Medical University，Xuzhou，Jiangsu 221000，ChinaCorresponding author：YIN Luxin.Email：Abstract：ObjectiveTo investigate the limitations of histopathology in the diagnosis of gliobl
5、astoma by comparing the results of histopathology versus molecular pathology in patients with glioblastoma.MethodsA retrospective analysis was performed for the pathological data of 83 patients with glioblastoma who underwent surgical treatment in Department of Neurosurgery，The Affiliated Hospital o
6、f Xuzhou Medical University，from January 2020 to July 2022.With molecular pathology as the gold standard，26 patients with inconsistent diagnosis of glioblastoma between histopathology and molecular pathology were classified as group A，and 57 patients with consistent diagnosis were classified as grou
7、p B.The two groups were compared in detail to analyze the limitations of histopathology in the diagnosis of glioblastoma.ResultsThe consistency rate between histopathology and molecular pathology was 68.67%in the diagnosis of glioblastoma.In the detection of isocitrate dehydrogenase 1（IDH-1）mutation
8、，O6-methylguanine-DNA methyltransferase（MGMT）promoter methylation，and alpha-thalassemia/mental retardation syndrome X-linked mutation，the consistency rate between histopathology and molec 论著 基金项目：中国博士后科学基金（2015M571821）。收稿日期：2022-05-08；修回日期：2023-01-10作者简介：徐义强（1998），男，硕士研究生在读，规培医师，就读于徐州医科大学神经外科专业，目前规培
9、于徐州医科大学附属医院，主要从事脑胶质瘤发生发展的研究，Email：。通信作者：阴鲁鑫（1985），男，副主任医师，硕士研究生导师，博士学位，主要从事脑血管病、脑肿瘤以及脑外伤的研究，Email：。电子、语音版29http:/2023，50（2）徐义强，等：分子病理与组织病理对胶质母细胞瘤诊断的一致性分析ular pathology was 85.54%，60.24%，and 87.95%，respectively.There was a significant difference in the correct rate of IDH-1 detection by histopatholog
10、y between the two groups（65.38%vs 94.73%，P 0.01），and there was also a significant difference in the expression index of the cell proliferation-associated nuclear antigen Ki-67 between the two groups（P 0.05）。见表1。1.2检测方法1.2.1组织病理检测在我院手术切除的脑胶质瘤标本送我院病理科，用10中性甲醛溶液固定后，常规进行脱水，再用石蜡进行包埋后切成4 m薄片，行HE染色后在 显 微 镜
11、 下 观 察 胶 质 瘤 组 织 形 态，免 疫 组 化 采 用EnVision法进行染色。显微镜下观察病理切片染色结果，异柠檬酸脱氢酶1（isocitrate dehydrogenase 1，IDH-1）为胞质阳性。随机观察光镜下数个高倍镜的视野，记录高倍镜视野中阳性细胞的百分率，染色判定标准（阳性肿瘤细胞数5），即判定为 IDH-1 突变，反之则判定为IDH-1野生型。O6-甲基鸟嘌呤 DNA 甲基转移酶（6-methylguanine DNA methyltransferase，MGMT）阳性染色位在细胞核和细胞质中，呈现粉红色。染色判定标准（因MGMT甲基化存在时，MGMT蛋白不表达或
12、者低表达，即MGMT甲基化与MGMT蛋白的表达呈负相关）：MGMT蛋白表达量30为蛋白高表达，而MGMT蛋白表达10为阳性，10为阴性。对细胞增殖相关核抗原Ki-67进行免疫标记，Ki-67以细胞核染成棕色或黄棕色为阳性结果。高倍镜下计数肿瘤表1两组胶质母细胞瘤患者的人口学特征组别性别/例 男 女年龄/（岁，-x s）A组（n=26）1214656.3B组（n=57）3522647.9t/2值1.6910.394P值0.1940.696302023，50（2）徐义强，等：分子病理与组织病理对胶质母细胞瘤诊断的一致性分析http:/细胞，染色判定标准7：以阳性肿瘤细胞数2550为（+），50为（
13、+）。所有染色步骤均按照试剂盒说明书严格进行，DAB显色，苏木精复染，返蓝后乙醇脱水，二甲苯透明后用中性树胶封。PBS代替一抗作为空白对照。1.2.2分子病理的检测肿瘤基因组DNA从肿瘤组织中提取纯化后，经过质检和初步定量，利用二代测序技术对与胶质瘤相关的某些基因进行深度测序。通过探针对和脑胶质瘤相关基因的全部外显子及部分基因的内含子区域进行全面的捕获，经过标准化的建库后，用二代测序仪进行精准测序。检测突变的类型包括：点突变、插入突变、缺失突变、融合变异、拷贝数变异和单核苷酸多态性等。两种检测结果均由2名有经验的临床病理医生取得一致意见得出。1.3研究方法将所有接受过组织病理与分子病理检测的患
14、者分为两组，组织病理与分子病理不一致的胶质母细胞瘤患者为A组，与分子病理一致的患者为B组。对比两组患者组织病理在检测IDH-1突变、MGMT甲基化和ATRX突变上正确率的差异，以及两组患者Ki-67指数的差异。1.4统计学方法采用 SPSS 25.0统计软件进行数据分析。计量资料采用均数标准差（-x s）表示，比较采用t检验；计数资料采用例表示，比较采用2检验；等级资料的比较采用秩和检验；以P0.05为差异有统计学意义。2结果2.1组织病理与分子病理的一致率以分子病理对胶质母细胞瘤的诊断为金标准，组织病理在胶质母细胞瘤诊断上与分子病理的一致率为68.67。其中组织病理将WHO 4级的脑胶质母细
15、胞瘤错判为WHO 2级11例，错判为WHO 3级15例。2.2两组患者组织病理在检测胶质母细胞瘤IDH-1基因状态、MGMT启动子甲基化、ATRX基因状态上正确率比较两组IDH-1基因状态的总体正确率为85.54，A组正确率为65.38，B组正确率为94.73，两组比较，差异有统计学意义（P0.05）。两组ATRX基因状态的总体正确率为87.95，A组正确率为80.76，B组正确率为91.22，两组间比较，差异无统计学意义（P0.05）。见表2。2.3两组患者组织病理Ki-67指数的差异情况两组Ki-67指数方面的比较，A、B两组秩平均值分别为 27.75、48.50，两组 Ki-67 指数差
16、异有统计学意义（U=370.50，P=0.000）。见表3。2.4部分诊断错误患者影像学及病理资料患者1：左侧额叶占位，术后组织病理免疫组化结果IDH-1（+），MGMT（+），ATRX（+），倾向于WHO 2级胶质细胞瘤，术后分子病理结果提示为IDH野生型胶质母细胞瘤，WHO 4级。见图1、2。患者2：右侧颞叶，侧脑室后角占位，术后免疫组化结果IDH-1（+），MGMT（-），ATRX（-），倾向于WHO 3级间变胶质细胞瘤，术后分子病理结果提示为IDH野生型胶质母细胞瘤，WHO 4级。见图3、4。表2两组患者组织病理在判定IDH、MGMT、ATRX基因状态正确率方面的比较项目组织病理测定IDH-1状态的差异 预测IDH-1状态正确 预测IDH-1状态错误 组织病理测定MGMT状态的差异 预测MGMT状态正确 预测MGMT状态错误组织病理测定ATRX状态的差异 预测ATRX状态正确 预测ATRX状态错误A组（n=26）1791610215B组（n=57）54334235252值10.1780.0271.843P值0.0010.8700.175表3两组患者组织病理Ki-67指数组别 A