1、 一、消毒与灭菌一、消毒与灭菌 二、细菌的分类二、细菌的分类 教学要求教学要求【掌握掌握】消毒、灭菌等基本概念消毒、灭菌等基本概念 常用消毒灭菌方法及适用范围常用消毒灭菌方法及适用范围 细菌种、属、菌株、标准菌株的概念，细菌细菌种、属、菌株、标准菌株的概念，细菌的命名原则和书写规则的命名原则和书写规则 【熟悉熟悉】消毒灭菌的应用消毒灭菌的应用 【了解了解】影响消毒灭菌效果的因素影响消毒灭菌效果的因素 消毒灭菌技术发展历史消毒灭菌技术发展历史 18471847年年 匈牙利人塞麦尔维斯：匈牙利人塞麦尔维斯：漂白粉洗手降低院内产褥热死亡率漂白粉洗手降低院内产褥热死亡率 18671867年年 英国人李
2、斯特：英国人李斯特：发明石碳酸消毒法，发明石碳酸消毒法，“腐烂是微生物引起的腐烂是微生物引起的”18861886年年 德国人伯格曼：蒸汽灭菌法德国人伯格曼：蒸汽灭菌法 18901890年年 美国人哈斯特：戴橡胶手套美国人哈斯特：戴橡胶手套 李斯特 19981998年年4 4月，深圳市妇女儿童医院共计手术月，深圳市妇女儿童医院共计手术292292例，发生感染例，发生感染166166例。致病菌为龟型分枝例。致病菌为龟型分枝杆菌杆菌。感染原因是浸泡刀片和剪刀的感染原因是浸泡刀片和剪刀的戊二醛戊二醛配制错误配制错误，错把，错把2%2%戊二醛稀释戊二醛稀释200200倍。倍。20052005年年1212
3、月，上海第九医院专家到安徽宿州月，上海第九医院专家到安徽宿州市立医院为市立医院为1010例白内障患者实施手术，结果例白内障患者实施手术，结果均感染绿脓杆菌，其中均感染绿脓杆菌，其中9 9名患者单侧眼球被名患者单侧眼球被摘除。感染原因是手术器械不能做到摘除。感染原因是手术器械不能做到一人一一人一用一灭菌用一灭菌，全用，全用75%75%的乙醇浸泡手术器械，的乙醇浸泡手术器械，达不到灭菌要求。达不到灭菌要求。20092009年年1010月广东潮阳区谷饶中心卫生院月广东潮阳区谷饶中心卫生院1818例例剖腹产产妇发生切口感染。原因手术器械等剖腹产产妇发生切口感染。原因手术器械等清洗不彻底，手术用刀片、剪
4、刀、缝合线等清洗不彻底，手术用刀片、剪刀、缝合线等用戊二醛浸泡，不能达到灭菌效果。用戊二醛浸泡，不能达到灭菌效果。院内感染个案院内感染个案 消毒灭菌是消毒灭菌是 减少院内感染减少院内感染 发生的关键发生的关键 概念概念 灭菌灭菌 消毒消毒 防腐防腐 清洁清洁 无菌及无菌操作无菌及无菌操作 概念概念 视频视频:供应室消毒灭菌供应室消毒灭菌 概念概念 灭菌灭菌(sterilization)杀灭物体上杀灭物体上所有微生物所有微生物的的方法，包括方法，包括芽胞芽胞在内的全部在内的全部病原微生物和非病原微生物。病原微生物和非病原微生物。消毒消毒(disinfection)杀死物体上杀死物体上病原微生物病
5、原微生物，不一定能杀死芽胞或非病原不一定能杀死芽胞或非病原微生物的方法。微生物的方法。微生物，包微生物，包括有哪些？括有哪些？概念概念 防腐防腐(antisepsis)防止或抑制细菌生长繁殖的方法。防止或抑制细菌生长繁殖的方法。细菌一般不死亡。细菌一般不死亡。清洁清洁（cleaning）通过除尘埃和一切污秽以减少微通过除尘埃和一切污秽以减少微生物数量的过程。生物数量的过程。彻底清洗彻底清洗是保证消毒是保证消毒 或灭菌成功的关键或灭菌成功的关键 概念概念“无菌物品无菌物品”进入人体内部手术器械、注射器、导管；进入人体内部手术器械、注射器、导管；实验室所用培养基、试剂、器材等。实验室所用培养基、试
6、剂、器材等。概念概念 无菌无菌(asepsis)：不含活菌的意思。不含活菌的意思。无菌操作无菌操作（aseptic technique)：防止微生物进入机体或物品的操作技术。防止微生物进入机体或物品的操作技术。进行微生物实验、外科手术及医疗技术操作等进行微生物实验、外科手术及医疗技术操作等过程，均需进行严格的无菌操作。过程，均需进行严格的无菌操作。擦拭法擦拭法 高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法 常用消毒灭菌方法常用消毒灭菌方法 物理法物理法 化学法化学法 浸泡法浸泡法 熏蒸法熏蒸法 喷雾法喷雾法 热力法热力法 生生 物物 净净 化化 法法 辐射法辐射法 燃烧法燃烧法 烤箱法烤箱法 煮沸法煮沸法 干
7、热法干热法 湿热法湿热法 日光曝晒法日光曝晒法 紫外线灯照射法紫外线灯照射法 电离辐射法电离辐射法 消毒灭菌的方法消毒灭菌的方法 物理消毒灭菌法物理消毒灭菌法 热力灭菌法热力灭菌法 辐射杀菌法辐射杀菌法 滤过除菌法滤过除菌法 干燥与低温抑菌法干燥与低温抑菌法 化学消毒灭菌法化学消毒灭菌法 原理及分类原理及分类 消毒灭菌的方法消毒灭菌的方法 热力灭菌法热力灭菌法 （1 1）干热灭菌干热灭菌 a.a.焚烧焚烧 b.b.烧灼烧灼 c.c.干烤干烤 （2 2）湿热灭菌湿热灭菌 a.a.煮沸法煮沸法 b.b.巴氏消毒法巴氏消毒法 c.c.间歇灭菌法间歇灭菌法 d.d.高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法 利用热
8、力破坏微生利用热力破坏微生 物的蛋白质、核酸、物的蛋白质、核酸、细胞壁和细胞膜，细胞壁和细胞膜，从而导致其死亡。从而导致其死亡。干热灭菌干热灭菌 a.a.焚烧：焚烧：b.b.烧灼：烧灼：红外电热灭菌器红外电热灭菌器 方法：对废弃物可直接在焚烧炉内焚方法：对废弃物可直接在焚烧炉内焚毁；培养用的试管或烧瓶，当开启或毁；培养用的试管或烧瓶，当开启或关闭塞子时，将试管（瓶）口或塞子，关闭塞子时，将试管（瓶）口或塞子，在火焰上来回旋转在火焰上来回旋转2 2-3 3次，实验室接种次，实验室接种环烧灼。环烧灼。适用范围：污染的废弃物、病理标本、适用范围：污染的废弃物、病理标本、带脓性分泌物的敷料和纸张等的处
9、理，带脓性分泌物的敷料和纸张等的处理，实验室接种环的消毒灭菌；某些金属实验室接种环的消毒灭菌；某些金属器械、搪瓷类物品急用时。器械、搪瓷类物品急用时。视频：灭菌操作视频：灭菌操作 干热灭菌干热灭菌 c.c.干烤干烤：160160170 2170 2小时。小时。适用于高温下不变质、适用于高温下不变质、不蒸发的物品，如玻璃不蒸发的物品，如玻璃器皿、瓷器等。器皿、瓷器等。d.d.红外线红外线 适用于医疗器械、食具适用于医疗器械、食具 烤箱烤箱 湿热灭菌比干热灭菌效力大湿热灭菌比干热灭菌效力大（1 1）菌体蛋白较易凝固；）菌体蛋白较易凝固；（2 2）穿透力穿透力大；大；（3 3）潜热。蒸气变为液态的潜
10、热）潜热。蒸气变为液态的潜热 透过布层的温度（）灭菌方式 温度（）时间（h）20层 40层 100层 灭菌效果 干热 130140 4 86 72 70以下 不完全 湿热 105.3 3 101 101 101 完全 穿透力和灭菌效果比较穿透力和灭菌效果比较 湿热灭菌湿热灭菌 a.a.巴氏消毒法巴氏消毒法pasteurization：用较低温度杀灭液体中的病原用较低温度杀灭液体中的病原菌、同时又不影响消毒物品的营菌、同时又不影响消毒物品的营养成分及香味的消毒养成分及香味的消毒 方法方法:71.715:71.715-30s30s，常用于常用于牛奶牛奶和酒类等的消毒。和酒类等的消毒。湿热灭菌湿热灭
11、菌 b.b.煮沸法：煮沸法：1005min1005min杀死繁殖体；杀死繁殖体；10011001-2h 2h 杀死芽胞杀死芽胞 水中加2%碳酸氢钠，可提高沸点到105 c.c.流动蒸汽灭菌法流动蒸汽灭菌法:是一种简单、是一种简单、经济、应用经济、应用最早的消毒最早的消毒方法之一。方法之一。适用于耐湿、适用于耐湿、耐高温的物耐高温的物品。品。湿热灭菌湿热灭菌 d.d.间歇蒸汽灭菌法：间歇蒸汽灭菌法：杀死细菌所有繁殖体和芽胞的灭菌法。杀死细菌所有繁殖体和芽胞的灭菌法。适用不耐高热含糖、牛奶的培养基。适用不耐高热含糖、牛奶的培养基。100 30min37 100 30min37 培养培养181824
12、h 24h 100 30min37 100 30min37 培养培养181824h 24h 100 30min100 30min 湿热灭菌湿热灭菌 e.e.高压蒸汽灭菌法：高压蒸汽灭菌法：103.4kPa,121,15103.4kPa,121,1530min30min，杀死芽胞在内的所有微生物。杀死芽胞在内的所有微生物。灭菌效果最好、目前应用最广灭菌效果最好、目前应用最广 用于耐高温和不怕潮湿物品的用于耐高温和不怕潮湿物品的灭菌。灭菌。不能灭活朊粒不能灭活朊粒 临床上最常临床上最常用的一种灭用的一种灭菌法，利用菌法，利用高压及饱和高压及饱和蒸气的高热蒸气的高热所释放的潜所释放的潜热灭菌。热灭菌
13、。手提式高压蒸汽灭菌器手提式高压蒸汽灭菌器 小型全自动高压灭菌器小型全自动高压灭菌器 不向外排放蒸汽和热力不向外排放蒸汽和热力 大型全自动高压灭菌器大型全自动高压灭菌器 下排气式压下排气式压 力蒸汽灭菌器力蒸汽灭菌器 预真空压力预真空压力 蒸汽灭菌器蒸汽灭菌器 手提高压手提高压 蒸汽灭菌器蒸汽灭菌器 灭菌效果监测灭菌效果监测 灭菌效果监测灭菌效果监测 高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法:嗜热脂肪芽胞杆菌嗜热脂肪芽胞杆菌 环氧乙烷法：环氧乙烷法：枯草芽胞杆菌枯草芽胞杆菌 辐射杀菌法辐射杀菌法 a.a.紫外线紫外线:波长波长240240280nm280nm，260nm260nm最强最强 穿透力差穿透力差
14、，适用于实验室、无菌室、培养箱等的空适用于实验室、无菌室、培养箱等的空气消毒及物品表面消毒。气消毒及物品表面消毒。注意防护：注意防护：紫外线对眼睛和皮肤有刺激作用紫外线对眼睛和皮肤有刺激作用 改变改变DNA分子构型，分子构型，干扰细菌干扰细菌DNA复制复制转录转录 紫外线消毒紫外线消毒 实验室实验室 杀菌效率与强度和时间的乘积成正比。杀菌效率与强度和时间的乘积成正比。空气消毒：每空气消毒：每10m10m3 3空间用空间用30W30W紫外灯照紫外灯照30min30min 物体表面消毒：紫外灯与物体的距离物体表面消毒：紫外灯与物体的距离1.2m1.2m。应将物品。应将物品 摊开或挂起，使其表面直接
15、受到照射摊开或挂起，使其表面直接受到照射 生物安全柜生物安全柜 辐射杀菌法辐射杀菌法 b.b.日光，微波日光，微波 c.c.电离辐射电离辐射:射线、射线、射线（如射线（如6060CoCo）等，用于一次性医用塑料制等，用于一次性医用塑料制品，食品保存。品，食品保存。穿透力强，可在包装后灭菌穿透力强，可在包装后灭菌 辐照食品。辐照食品。滤过除菌法滤过除菌法 滤菌器滤菌器filter 薄膜滤菌器薄膜滤菌器：孔径孔径 0.10.1m m-0.450.45m m 硝基纤维素膜。硝基纤维素膜。常用常用0.220.22m m 深层滤器深层滤器:石绵、玻璃滤菌器石绵、玻璃滤菌器 用途：不耐高温灭菌的血清、细菌
16、毒用途：不耐高温灭菌的血清、细菌毒素、抗生素，以及空气等的除菌素、抗生素，以及空气等的除菌 。不能除去支原体和病毒不能除去支原体和病毒。高效空气过滤器高效空气过滤器HEPAHEPA应用于无菌手术应用于无菌手术室、生物安全柜。室、生物安全柜。高效空气过滤器：应用于无菌手术室、高效空气过滤器：应用于无菌手术室、生物安全柜等生物安全柜等 干燥与低温抑菌法干燥与低温抑菌法 低温法低温法:贮藏菌种贮藏菌种 冷冻真空干燥法冷冻真空干燥法-最好的菌种保存方法最好的菌种保存方法 加入冷冻保护剂加入冷冻保护剂 -20-70 冻干菌种冻干菌种 低温冰箱低温冰箱 消毒剂杀菌机制消毒剂杀菌机制 消毒剂的分类消毒剂的分类 消毒剂使用原则消毒剂使用原则 消毒剂使用方法消毒剂使用方法 常用化学消毒剂常用化学消毒剂 化学消毒灭菌法化学消毒灭菌法 如皮肤、粘如皮肤、粘膜、排泄物膜、排泄物及周围环境、及周围环境、光学仪器、光学仪器、金属锐气和金属锐气和某些塑料制某些塑料制品的消毒。品的消毒。用化学药品进行消毒灭菌的方用化学药品进行消毒灭菌的方法，凡不适用于热力消毒灭菌和法，凡不适用于热力消毒灭菌和不怕湿的物品均可选用此法