1、收稿日期 2022-03-05摇 修回日期 2022-09-30作者单位 南京中医药大学附属南京医院,南京市第二医院 分子与基因诊断实验室,江苏 南京 210003作者简介 徐露露(1989-),女,技师.通信作者 孙摇 梅,硕士,副研究员.E鄄mail:文章编号 1000鄄2200(2023)05鄄0637鄄04检验医学HPV 感染型别及多重感染与女性宫颈病变的关联性分析徐露露,张摇 琴,孙摇 梅摘要目的:分析人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染型别及多重感染与女性宫颈病变的关联性。方法:选取行HPV 分型检查以及液基薄层细胞学检查(TCT)的 6 000
2、份检测样品进行回顾性分析。首先通过 TCT 检查对样本进行筛查,然后分析样本的 HPV 感染型别及多重感染情况。采用宫颈组织病理活检方法确定病人的宫颈病变情况,分析不同 HPV 感染型别病人的宫颈病变情况,观察单一感染和多重感染女性的宫颈病变情况,分析 HPV 感染型别及多重感染与女性宫颈病变的相关性。结果:6 000 份 HPV 检测样本中,1 034 份为 HPV 阳性,阳性率为17.23%;HPV 感染病人中检测出21 个基因亚型,其中高危型感染的前三位是 HPV16、HPV52 和 HPV56,低危型感染最多的是 HPV6。HPV 阳性病人中慢性炎症疾病 634 份(61.32%),宫
3、颈上皮内瘤变(CIN)玉级 208 份(20.12%),CIN域 芋级 128 份(12.38%),宫颈癌 64 份(6.18%)。logistic 回归分析显示,HPV16 和 HPV18 感染与宫颈癌发生具有密切关联(P 0.01 和 P 0.05)。HPV 阳性病人中单一感染 761 份(73.60%),多重感染 273 份(26.40%);不同宫颈病变分级病人中大部分为单一感染,且随着病变严重程度的增加,单一感染占比明显上升,多重感染占比降低(P 0.01)。结论:HPV 感染型别中,HPV16 和 HPV18 是影响女性宫颈病变发展速度的高风险因素,是否为多重感染与女性宫颈病变具有明
4、显关联性,宫颈病变病人以 HPV 单一感染为主。关键词 人乳头瘤病毒;基因型;多重感染;宫颈病变中图法分类号 R 711摇 摇 摇 文献标志码 A摇 摇 摇 DOI:10.13898/ki.issn.1000鄄2200.2023.05.020Analysis of the relationship between type of HPV infectionand multiple infection and female cervical lesionXU Lu鄄lu,ZHANG Qin,SUN Mei(Laboratory of Molecular and Genetic Diagnosis
5、,Nanjing Hospital Affiliatedto Nanjing University of Traditional Chinese Medicine,Nanjing Second Hospital,Nanjing Jiangsu 210003,China)Abstract Objective:To analyze the relationship between type of human papilloma virus(HPV)infection and multiple infection andfemale cervical lesion.Methods:A total o
6、f 6 000 samples for HPV typing and thin鄄prep cytology test(TCT)were selected forretrospective analysis.First,the samples were screened by TCT,and then the type of HPV infection and multiple infection of the sampleswere analyzed.The cervical pathological biopsy method was used to determine the cervic
7、al lesions of patients,the cervical lesions ofpatients with different types of HPV infection were analyzed,the cervical lesions of women with single infection and multiple infectionwere observed,and the relationship between type of HPV infection and multiple infection and female cervical lesion.Resu
8、lts:Among the6 000 HPV test samples,1 034 were HPV鄄positive,with a positive rate of 17.23%.Among the patients with HPV infection,21 genesubtypes were detected,in which the top three high鄄risk types were HPV16,HPV52 and HPV56,and the most type of low鄄risk infectionwas HPV6.Among HPV鄄positive patients
9、,634 cases(61.32%)were with chronic inflammatory diseases,208 cases(20.12%)withcervical intraepithelial neoplasia(CIN)grade 玉,128 cases(12.38%)with CIN grade 域-芋,and 64 cases(6.18%)with cervicalcancer.Logistic regression analysis showed that HPV16 and HPV18 infection were closely associated with cer
10、vical cancer(P 0.01 andP 0.05).Among HPV鄄positive patients,761 cases(73.60%)were single infection and 273 cases(26.40%)were multiple infection.Most of the patients with different grades of cervical lesions were single infection,and with the increase of the severity of the lesions,theproportion of si
11、ngle infection increased significantly,while the proportion of multiple infection decreased(P 0.01).Conclusions:Among the type of HPV infection,HPV16 and HPV18 are the high鄄risk factors affecting the development rate of female cervical lesions.Multiple infection or not is significantly associated wi
12、th female cervical lesion.Patients with cervical lesion mainly have HPV singleinfection.Key words human papilloma virus;genotype;multiple infection;cervical lesion摇 摇 妇女宫颈癌的发病率在全球范围内仅次于乳腺癌,属于妇科最常见的生殖系统恶性肿瘤,严重威胁女性的健康和生命1-3。据统计,全球每年新增宫颈癌病例约 50 万例,死亡 28 万例,我国的新增宫颈736蚌埠医学院学报 2023 年 5 月第 48 卷第 5 期癌病例 13.
13、5 万例,死亡 8 万余例4。宫颈癌的预防和治疗至关重要,是当今世界特别是发展中国家的研究热点5-6。不同宫颈病变中存在多种人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染是不争的事实,且 HPV 感染的发生比例较高。然而,宫颈癌的预防和治疗中,明确多发感染在宫颈癌病变、宫颈癌发展和预后中的作用是必要的,不仅需要确认多发性感染在宫颈病变中是否起着相同的作用,还要以更多病例及区域,从不同的方向进行研究分析7。掌握多重感染对宫颈病变发展和预后的影响,可以为宫颈癌的预防和治疗提供更多理论依据,制定更加完善的癌症预防计划,还可以为宫颈病变的预测以及预后评估提供可靠依据,为临床治疗
14、方案的选择提供参考8-10。基于此,本研究选取接受 HPV分型检查以及液 基 薄 层 细 胞 学 检 查(thin鄄prepcytology test,TCT)的检测样品进行回顾性分析,观察 HPV 感染型别及多重感染情况,分析不同 HPV感染型别病人的宫颈病变情况,明确 HPV 感染型别及多重感染与女性宫颈病变的相关性。现作报道。1摇 资料与方法1.1摇 研究对象摇 选取2018-2020 年我院进行 HPV分型检查以及 TCT 的 6 000 份检测样本为研究对象。病人年龄 22 68 岁。入组标准:(1)对此次研究知情并签署研究同意书;(2)有性生活史;(3)非妊娠期或哺乳期。排除标准:
15、(1)有妇科恶性肿瘤病史;(2)有子宫全切术、宫颈环形电切术史;(3)样本质量问题最终剔除。1.2摇 方法摇1.2.1摇 标本采集摇 由临床医生使用凯普 HPV 采样刷采集宫颈脱落细胞标本,将毛刷放入加有专用细胞保存液的收集管中,4 8 益冰箱保存,3 d 内完成检测。取材时要求月经干净期,48 h 内无性生活史,白带清洁度检查正常,检查前 3 d 不得使用阴道内药物或阴道冲洗。1.2.2摇 TCT摇由妇科医生使用窥器打开阴道暴露宫颈,并用宫颈刷在宫颈鳞柱交界部顺时针转动5 10 圈,获得宫颈脱落细胞,再将细胞样本送检,使用TCT 细胞学检测仪检查。根据国际癌症协会推荐的TBS 分类,分为:正
16、常和炎症(WNL)、意义不明不典型鳞状上皮细胞(ASCUS)、腺原位癌(AIS)、未见上皮内病变或恶性细胞(NILM)、低度鳞状上皮内病变(LSIL)、高度鳞状上皮内病变(HSIL)、鳞状细胞癌(SCC)、反应性细胞改变,以上示 TCT 结果为阳性。1.2.3摇 HPV鄄DNA 分型摇仪器与试剂:HPV 基因分型检测试剂盒,由潮州凯普生物化学有限公司生产,对 HPV 基因型进行分型检测,包括 13 种高危型HPV(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68)和 8 种低危型 HPV(6、11、42、43、44、66、81),共 21种。凯普全自动核酸提取仪,Applied BiosystemsPCR 仪(型号 Veriti DX96well),凯普医用核酸分子杂交仪。实验步骤和结果判读:(1)样本处理,使用凯普全自动核酸提取仪对样本核酸提取及 HPV 阳性和阴性质控品的处理。(2)试剂配制,用 PCR 反应液1 和 PCR 反应液 2 配制测试反应体系。(3)上样,在各对应的反应管中加入 1 滋L 的 HPV 阴性质控品、HPV 阳性质控品、样本处理上