1、农业部2630号公告一15一2017转基因植物及其产品成分检测耐除草剂大豆SHZD32-1及其衍生品种定性PCR方法1范围本标准规定了转基因耐除草剂大豆SHZD32-1转化体特异性普通PCR和实时荧光PCR两种检测方法。本标准适用于转基因耐除草剂大豆SHZD32-1及其衍生品种,以及制品中SHZD32-1转化体成分的定性PCR检测。下列文件对子本文的A尺L)2规范性引用文件)P的版本用于本文下可少的件。凡是不注期的引用文其最版本(包括所有的修改GB/T6682分析实验室用水规和试验方法农业部14852010因植物及其产品议分检测NA取和纯化农业部2031号2013因植彩分检测大基因定性PCR方
2、法农业部203号特1920传基因植形及其品我分检测NY/T67基因植物及其产讯检测用要求3术语和定义农业部2031号公三2013界定的以及下列术语和定义适用手本文3.1SHZD3转孔体特异性序列event-speeific sequce of SHZD32-SHZD32插人片段5端与豆基因组的连接区序列,包大部分序列与转化载体T-DNA部分序4原理根据转基因丽除俞大司亿D321化体特异性序列设开特泉生物及探针,对试样进行PCR扩增。依据是否扩增获得预期的DNA片段或典型扩增曲线,判断样品中是否含有SHZD32-1转化体成分。5试剂和材料除非另有说明,仅使用分析纯试剂和重蒸馏水或符合GB/T6682规定的二级水。5.1琼脂糖。5.210g/L溴化乙锭(EB)溶液:称取1.0g溴化乙锭,溶解于100mL水中,避光保存。警告一溴化乙锭有致癌作用,配制和使用时应戴一次性手套操作并妥善处理废弃物。注:根据需要可选择其他效果相当的核酸染料代替溴化乙锭作为核酸电泳的染色剂。5.310mol/L氢氧化钠(NaOH)溶液:在160mL水中加入80.0g氢氧化钠,溶解后,冷却至室温,再加水定容到200mL.5.4500mmol/L乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2)溶液(pH8.0):称取18.6g乙二胺四乙酸二钠,加