1、ICS点击此处添加 ICS 号点击此处添加中国标准文献分类号中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准GBGB 23200.932016代替SN/T 01232010食品安全国家标准食品中有机磷农药残留量的测定气相色谱质谱法National food safety standardsDetermination of organophosphorus multi pesticides residue in foodsGas chromatography-mass spectrometry2016-12-18 发布2017-06-18 实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会中华人民共和国农业部
2、发布国家食品药品监督管理总局GB 23200.932016I前前言言本标准代替SN/T 0123-2010 进出口动物源食品中有机磷农药残留量检测方法气相色谱-质谱法。本标准与SN/T 0123-2010相比，主要变化如下：标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式；标准名称和范围中“出口食品”改为“食品”；标准范围中增加“其它食品可参照执行”。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：SN/T 0123-2010。GB 23200.9320161食品安全国家标准食品安全国家标准食品中有机磷农药残留量的测定食品中有机磷农药残留量的测定 气相色谱质谱法气相色谱质谱法1 1范围范围本标准规定了进出口动
3、物源食品中 10 种有机磷农药残留量（敌敌畏、二嗪磷、皮蝇磷、杀螟硫磷、马拉硫磷、毒死蜱、倍硫磷、对硫磷、乙硫磷、蝇毒磷）的气相色谱-质谱检测方法。本标准适用于清蒸猪肉罐头、猪肉、鸡肉、牛肉、鱼肉中有机磷农药残留量的测定和确证，其它食品可参照执行。2 2 规范性引用文件规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 2763 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3 3原理原理试样用水-丙酮溶液均质提取，二氯甲烷液-
4、液分配，凝胶色谱柱净化，再经石墨化炭黑固相萃取柱净化，气相色谱-质谱检测，外标法定量。4 4试剂和材料试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为 GB/T6682-1992 规定的一级水。4.14.1试剂试剂4.1.1丙酮（C3H6O）：残留级。4.1.2二氯甲烷（CH2Cl2）：残留级。4.1.3环己烷（C6H12）：残留级。4.1.4乙酸乙酯（C4H8O2)：残留级。4.1.5正己烷（C6H14）：残留级。4.1.6氯化钠（NaCl）。4.24.2溶液配制溶液配制4.2.1无水硫酸钠：650灼烧 4 h，贮于密封容器中备用。4.2.2氯化钠水溶液（5%）：称取 5.0g 氯化钠，用水
5、溶解，并定容至 100 mL。4.2.3乙酸乙酯-正己烷（1+1，V/V）：量取 100 mL 乙酸乙酯和 100 mL 正己烷，混匀。4.2.4环己烷-乙酸乙酯（1+1，V/V）：量取 100 mL 环己烷和 100 mL 正己烷，混匀。4.34.3标准品标准品4.3.110 种有机磷农药标准品：纯度均95。4.44.4标准溶液配制标准溶液配制4.4.1标准储备溶液：分别准确称取适量的每种农药标准品（见附录 A），用丙酮分别配制成浓度为100-1000 g/mL 的标准储备溶液。4.4.2混合标准工作溶液：根据需要再用丙酮逐级稀释成适用浓度的系列混合标准工作溶液。保存于4冰箱内。4.54.5
6、材料材料4.5.1氟罗里硅土固相萃取柱：Florisil，500 mg，6 mL，或相当者。4.5.2石墨化炭黑固相萃取柱：ENVI-Carb，250 mg，6 mL，或相当者，使用前用 6 mL 乙酸乙酯-正己预淋洗。4.5.3有机相微孔滤膜：0.45 m。4.5.4石墨化炭黑：60-80 目。GB 23200.93201625 5仪器和设备仪器和设备5.1气相色谱-质谱仪：配有电子轰击源（EI）。5.2电子天平：感量 0.01 g 和 0.0001 g。5.3凝胶色谱仪：配有单元泵、馏份收集器。5.4均质器。5.5旋转蒸发器。5.6具塞锥型瓶：250 mL。5.7分液漏斗：250 mL。5
7、.8浓缩瓶：250 mL。5.9离心机：4000r/min 以上。6 6 试样制备与保存试样制备与保存6.16.1试样制备试样制备取代表性样品约 1 kg 样品取样部位按 GB 2763 附录 A 执行，经捣碎机充分捣碎均匀，装入洁净容器，密封，标明标记。6.26.2试样保存试样保存试样于-18保存。在抽样及制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。7 7分析步骤分析步骤7.17.1提取提取称取解冻后的试样 20g(精确到 0.01g）于 250 mL 具塞锥形瓶中，加入 20 mL 水和 100 mL 丙酮，均质提取 3min。将提取液过滤，残渣再用 50mL 丙酮重复提取
8、一次，合并滤液于 250mL 浓缩瓶中，于40水浴中浓缩至约 20 mL。将浓缩提取液转移至 250 mL 分液漏斗中，加入 150 mL 氯化钠水溶液和 50 mL 二氯甲烷，振摇 3min，静置分层，收集二氯甲烷相。水相再用 50 mL 二氯甲烷重复提取两次，合并二氯甲烷相。经无水硫酸钠脱水，收集于 250 mL 浓缩瓶中，于 40水浴中浓缩至近干。加入 10 mL 环己烷-乙酸乙酯溶解残渣，用 0.45 m 滤膜过滤，待凝胶色谱（GPC）净化。7.27.2净化净化7.2.17.2.1凝胶色谱（凝胶色谱（GPCGPC）净化）净化7.2.1.17.2.1.1凝胶色谱条件凝胶色谱条件a)凝胶净
9、化柱：Bio Beads S-X3，700 mm25 mm（i.d.），或相当者；b)流动相：乙酸乙酯-环己烷（1+1,V/V）；c)流速：4.7 mL/min；d)样品定量环：10 mL；e)预淋洗时间：10 min；f)凝胶色谱平衡时间：5 min；g)收集时间：23 31 min。7.2.1.27.2.1.2凝胶色谱净化步骤凝胶色谱净化步骤将 10mL 待净化液按 6.2.1.1 规定的条件进行净化，收集 23 31 min 区间的组分，于 40下浓缩至近干，并用 2mL 乙酸乙酯-正己烷溶解残渣，待固相萃取净化。7.2.27.2.2固相萃取（固相萃取（SPESPE）净化）净化将石墨化炭
10、黑固相萃取柱（对于色素较深试样，在石墨化炭黑固相萃取柱上加 1.5cm 高的石墨化炭黑）用 6mL 乙酸乙酯-正己烷预淋洗，弃去淋洗液；将 2mL 待净化液倾入上述连接柱中，并用 3mL乙酸乙酯-正己烷分 3 次洗涤浓缩瓶，将洗涤液倾入石墨化炭黑固相萃取柱中，再用 12 mL 乙酸乙酯-正己烷洗脱，收集上述洗脱液至浓缩瓶中，于 40水浴中旋转蒸发至近干，用乙酸乙酯溶解并定容至1.0mL，供气相色谱-质谱测定和确证。7.37.3测定测定GB 23200.93201637.3.17.3.1气相色谱气相色谱-质谱参考条件质谱参考条件a)色谱柱：30 m0.25 mm（i.d.），膜厚 0.25 m，
11、DB-5 MS 石英毛细管柱，或相当者；b)色谱柱温度：50（2 min）30/min180（10 min）30/min270（10 min）；c)进样口温度：280；d)色谱-质谱接口温度：270；e)载气：氦气，纯度99.999%，流速 1.2 mL/min；f)进样量：1 L；g)进样方式：无分流进样，1.5 min 后开阀；h)电离方式：EI；i)电离能量：70 eV；j)测定方式：选择离子监测方式；k)选择监测离子(m/z)：参见表 1 和附录 B；l)溶剂延迟：5 min；m)离子源温度：150；n)四级杆温度：200。表 1选择离子监测方式的质谱参数表通道时间（tR/min）选择
12、离子（amu）15.00109,125,137,145,179,185,199,220,270,285,304217.00109,127,158,169,214,235,245,247,258,260,261,263,285,286,314319.00153,125,384,226,210,3347.3.27.3.2气相色谱气相色谱-质谱测定与确证质谱测定与确证根据样液中被测物含量情况，选定浓度相近的标准工作溶液，对标准工作溶液与样液等体积参插进样测定，标准工作溶液和待测样液中每种有机磷农药的响应值均应在仪器检测的线性范围内。如果样液与标准工作溶液的选择离子色谱图中，在相同保留时间有色谱峰出现
13、，则根据附录 B 中每种有机磷农药选择离子的种类及其丰度比进行确证。在上述气相色谱-质谱条件下，10 种有机磷农药标准物的参考保留时间和气相色谱-质谱选择离子色谱图见附录 B 和附录 C 中图 C.1。8 8结果计算和表述结果计算和表述试样中每种有机磷农药残留量按下式计算：AiciVXi Aism式中：Xi 试样中每种有机磷农药残留量，mg/kg；Ai 样液中每种有机磷农药的峰面积（或峰高）；Ais 标准工作液中每种有机磷农药的峰面积（或峰高）；ci 标准工作液中每种有机磷农药的浓度，g/mL；V 样液最终定容体积，mL；m 最终样液代表的试样质量，g。注：计算结果须扣除空白值，测定结果用平行
14、测定的算术平均值表示，保留两位有效数字。9 9精密度精密度9.1 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录D的要求。GB 23200.93201649.2 在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录E的要求。1010定量限和回收率定量限和回收率10.110.1定量限定量限本方法对食品中 10 种有机磷农药残留量的定量限见附录 B。10.210.2回收率回收率10.2.1清蒸猪肉罐头中 10 种有机磷农药在 0.02-1.00 mg/kg 时，回收率为 70.0-94.9%。10.2.2猪肉中 10 种
15、有机磷农药在 0.02-1.00 mg/kg 时，回收率为 71.2-97.1%。10.2.3鸡肉中 10 种有机磷农药在 0.02-1.00mg/kg 时，回收率为 74.3-94.8%。10.2.4牛肉中 10 种有机磷农药在 0.02-1.00mg/kg 时，回收率为 70.6-96.9%。10.2.5鱼肉中10种有机磷农药在0.02-1.00mg/kg时，回收率为76.3-93.3%。GB 23200.9320165附附录录A A（资料性附录）（资料性附录）表表 A.1A.110 种有机磷农药种类表种有机磷农药种类表序号农药名称英文名称CAS.No化学分子式1敌敌畏Dichlorvos
16、000062-73-7C4H7Cl2O4P2二嗪磷Diazinon000333-41-5C12H21N2O3PS3皮蝇磷Fenchlorphos000299-84-3C8H8Cl3O3PS4杀螟硫磷Fenitrothion000122-14-5C9H12NO5PS5马拉硫磷Malathion000121-75-5C10H19O6PS26毒死蜱Chlorpyrifos002921-88-2C9H11Cl3NO3PS7倍硫磷Fenthion000055-38-9C10H15O3PS28对硫磷Parathion000056-38-2C10H14NO5PS9乙硫磷Ethion000563-12-2C9H22O4P2S410蝇毒磷Coumaphos000056-72-4C14H16ClO5PSGB 23200.9320161附附录录 B B（资料性附录）（资料性附录）10 种有机磷农药的保留时间、定量和定性选择离子及定量限表种有机磷农药的保留时间、定量和定性选择离子及定量限表序号农药名称保留时间（min）特征碎片离子（amu）定量限（g/g）定量定性丰度比1敌敌畏6.57109185,145,2