1、GB/T 1 4 5 5 1-2 0 0 3前言 本标准是对 G B/T 1 4 5 5 1-1 9 9 3 生物质量六六六和滴滴涕的测定气相色谱法 进行下述内容的修订:原标准中2.3制备色谱柱时使用的试剂、材料和3.6 色谱柱及 5.2.3校准数据表示的内容全 部删去;在第 5章色谱测定操作步骤中增加了测定条件 B、毛细管色谱柱及图谱;把 6.2.2精密度、6.2.3 准确度和6.2.4检测限的数据表格全部放到附录A中，原精密度用标 准偏差表示改为采用相对标准偏差表示 本标准的附录A为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准的起草单位:农业部环境保护科研监测所。本标准的主要
2、起草人:黄士忠、刘潇威、黄永春、王继军、买光熙、徐应明、李志祥、张克强。GB/T 1 4 5 51-2 0 0 3动、植物 中六六六和滴滴涕测定的 气相色谱法1范围 本标准规定了动物(禽、畜、鱼、E酬)、植物(粮食、水果、蔬菜、茶、藕)中六六六、滴滴涕残留量的测定方法。本标准适用于动物性样品(禽、畜、鱼、蛆蝴)、植物性样品(粮食、水果、蔬菜、茶、藕)中有机抓农药残留量的分析。2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准。然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版
3、本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。G B/T 1 7 3 3 2-1 9 9 8 食品中有机氯和拟除虫菊醋类农药多残留的测定 NY/T 3 9 7 农、畜、水产品污染监测技术规范3原理 动、植物样品中的六六六和滴滴涕农药残留量分析采用有机溶剂提取，经液一 液分配及浓硫酸净化或柱层析净化除去干扰物质，用电子捕获检测器(E C D)检测，根据色谱峰的保留时间定性，外标法定量。4 试荆与材料4.1 载气:氮气(NO，纯度)9 9.9 9%.4.2 标准样品及样品分析时使用的试剂和材料。所使用的试剂除另有规定外均系分析纯，水为蒸馏水。4.2.1 农药标准品:a-B H C 丰-B H
4、 C,Y-B H C,8-B H C,P.P-D D E,O.P -D D T,P.P -D D D,P.P -D D T，纯度为9 8.0%-9 9.0%.4.2.1.1 农药标准溶液的制备:准确称取农药标准样品每种 1 0 0 m g(准确到士。.0 0 0 1 g),溶于异辛烷(汗 B H C 先用少量苯溶解)，在1 0 0 m L容量瓶中定容至刻度，在冰箱中 贮存。4.2.1.2 农药标准中间溶液的配制:分别准确量取八种农药标准溶液，移至 1 0 0 mL容量瓶中，用异辛烷稀释至刻度，八种农药标准溶液的体积比为:Vo-B H C:V P B H C I V t B H C V&B H
5、C I V P.，一。、，V O.P 二，VP.P-D M，V P.P-D D T=1，1，3.5，1，3.5，5，3，8,(适用于填充柱)4.2.1.3 农药标准工作液的配制:根据检测器的灵敏度及线性要求，用石油醚或正己烷稀释农药标准中间溶液，配制成几种浓度的标准工作液，在 4 下贮存。4.2.2 正己烷(C 6 H14):沸程6 7 C-6 9 0C，重蒸。4.2.3 石油醚:沸程 6 0 C-9 0 C，重蒸。4.2.4 异辛烷(C 8 H,.).4.2.5 丙酮(C H,C O C H,)，重蒸。4.2.6苯(C G HG):优级纯GB/T 1 4 5 51-2 0 0 34.2.7
6、浓硫酸(H 2 S O,):优级纯。4.2.8 发烟硫酸(H 2 S O,X S O,)e4.2.9 高氯酸(H C I O,):优级纯。4.2.1 0 冰乙酸(C H,C O O H):优级纯。4.2.1 1 无水硫酸钠(N a g S O,):在 3 0 0 烘箱中烘烤4h，存放于干燥器中备用。4.2.1 2 硫酸钠溶液:2 0 g/L,4.2.1 3 硅藻土:试剂级。4.2.1 4助滤剂 c C e l i t e 5 4 5.4-2.1 5 消解液:将 6 0%高氯酸及冰乙酸等体积混合。5仪器5.1 样品瓶，适宜的玻璃磨 口瓶。5.2 旋转蒸发器。5.3 索氏提取器。5.4 水浴锅。5
7、.5 振荡器。5.6 万能粉碎机。5.7 组织捣碎机5.8 真空泵。5.9离心机。5.1 0 玻璃器皿:2 5 0 mL,5 0 0 mL分液漏斗，1 0 0,2 5 0,3 0 0 mL具塞锥形瓶，5 0 0 mL抽滤瓶，直径5 c m-9 c m 布氏漏斗，直径0.6 c m-1.0 c m，长2 0 c m玻璃层析柱，5 0 m L,1 0 0 mL量筒，2 5 0 mL平底烧瓶，1 0 m1 _ 2 0 mL刻度试管(经标定)，研钵。5-1 1 微量注射器。5.1 2气相 色谱 仪 带 电子捕获检测器(Ni 放射源)6样品6.1 样品性状6.1.1 样品种类:动物性样品(禽、畜、鸟、兽
8、、鱼、蛆蝴);植物性样品(粮食、水果、蔬菜、茶、藕)。6.1.2 样品的状态:固体。6 _ 1.3 样品的稳定性，在各种样品中的六六六、滴滴涕化学性质稳定。6.2 样品的采集与制备 按照 NY/T 3 9 7规定采集。6.2.1 禽畜(包括鸟兽):家禽取 1 只3只杀好的，从脊背切开，取其整体一半，去骨骼，然后捣碎，混合，备用。家畜，根据测试目的，取其有代表性的样品。.5 k g-1.0 k g，捣碎，混匀，备用。6.2.2 鱼:去鳞、鳍、内脏，沿背脊纵剖后取其二分之一或数分之一 5 0 g以下者取整体)，剔刺，用滤纸吸干表面水，切碎，混匀，备用。6.2.3 贩闯:从田间采集贩闯 2 0条一5
9、 0条，在玻璃器皿中自然排泥2天(皿底垫滤纸加水湿润，然后洗净，用滤纸吸干表面水，取 2 0条切碎，混匀，备用。6.2.4 粮食:采取 5 0 0 g具代表性的(小麦、稻米、玉米等)样品，粉碎，过 4 0目筛混匀，装人样品瓶备用。6.2.5 果蔬、藕:取其代表性的果蔬、藕的可食部分 1.0 k g，切碎，取 2 0 0.0 g测水分含量，其余供实验用。GB/T 1 4 5 51-2 0 0 36.2.6 茶叶:鲜样同6.2.5，干样同6.2.4,6.3 样品的保存生物样品，采集后应尽快分析，如暂不分析可保存在一1 8 冷冻箱中。7分析步骤7.1 提取7.1.1 粮食7.1.1.1 A法:准确称
10、取1 0.0 g 样品 置于2 5 0 m L具塞三角瓶中，加人6 0 m L 石油醚浸泡过夜，将上清液转人2 5 0 mL分液漏斗中，再用 4 0 mL石油醚分两次洗涤三角瓶及样品，合并洗涤液于分液漏斗中，待净化。7.1.1.2 B 法:准确称取1 0.0 g 样品置于2 5 0 m L 具塞 三角瓶中，加人 1 0 0 m L石油醚，于电动振荡器上振荡 l h，提取液转移人 2 5 0 mL离心杯中(每次用 2 0 mL石油醚洗涤三角瓶后，倒人离心杯中离心1 0 m in)，上清液合并于2 5 0 m L分液漏斗中，待净化。7.1.2 果蔬、水生植物样(藕)7.1.2.1 A法:准确称取
11、2 0 0.0 g样品置于组织捣碎机缸内，快速捣碎 1 m i n 2 mi n，称取匀浆5 0.0 g，置于2 5 0 mL三角瓶中，加丙酮 1 0 0 mL，振摇 1 mi n,浸泡 l h后过滤人 5 0 0 mL分液漏斗中，残渣用3 0 mL 丙酮分三次洗涤，洗涤液合并于分液漏斗中，然后加人 5 0 mL石油醚，振摇 1 min，静置分层后，将下层丙酮水溶液移人另一 5 0 0 mL分液漏斗中，用 5 0 mL石油醚再提取一次，用 2 0 m L石油醚洗涤分液漏斗，并加人提取液中，然后加 2 0 0 mL硫酸钠溶液，振摇 1 mi n，静置分层，弃去下层丙酮水溶液、石油醚提取液，待净化
12、。7.1.2.2 B 法:准确称取 鲜样5 0.0 g，加2 5 g 无水硫酸钠于 组织 捣碎机缸中，加人丙酮8 0 m L，石油醚2 0 mI，快速捣碎 2 m i n，浆液经装有助滤剂 5 4 5的布氏漏斗抽滤，然后用丙酮 1 0 X3 m l 一 冲洗残渣直至滤液近无色时止。滤液移人 5 0 0 mL分液漏斗中，加 1 0 0 mL硫酸钠溶液振摇 1 mi n，静置分层后，弃去水层，待净化。7.1.3 茶叶样品 准确称取 5.0 g 茶叶样，放人 1 0 0 mL具塞三角瓶中，加人 2 2 mI正己烷，3 mL丙酮，振摇。.5 h后浸泡过夜，而后用装有玻璃纤维的漏斗过滤，下接 2 5 m
13、L容量瓶，用正己烷定容，然后取 5 mL(相当于1 g 茶叶 样)，待净化。7.1.4 动物性样品7.1.4.1 A法(消解法):准确称取样品2.0 g 5.0 g,置于1 5 0 m L 具塞三角瓶中，加人消解液 6 0H C I O;一 冰乙酸(I，1,V/V 4 0 mL，盖好玻璃塞，在室温下静置 1 2 h以上。然后在 8 5 0C-9 0 水浴中热消解 3h;待冷却后加人石油醚 1 0 mL，振摇 2 mi n,静置分层后用细嘴滴管将石油醚层移人 2 5 0 ml,分液漏斗中。再以2 0 m L石油醚分两次重复提取(最后一次在三角瓶中缓缓加人蒸馏水至瓶颈)。吸尽石油醚浮层，合并三次提
14、取液于分液漏斗中，待净化。7.1.4.2 B法(索氏提取法):准确称取均样 2.0 g-5.0 g，加人 1 0 g-2 5 g 无水硫酸钠研成粉状，装人滤纸筒内，放人索氏提取器中，用 8 0 mL石油醚浸泡过夜后，抽提 4h-5h，每小时回流 4次6 次，冷却后将提取液转人 1 0 0 m工容量瓶中，在室温下用石油醚定容至刻度。7.2 净化7.2.1 A法(浓硫酸净化法):适用于土壤、粮食、果蔬、水生植物及动物肉类样品。在盛有石油醚提取液的分液漏斗中，按提取液体积的十分之一数量加人浓硫酸，振摇 1 m i n，静置分层后，弃去硫酸层(注意:用浓硫酸净化过程中，要防止发热爆炸，加浓硫酸后，开始
15、要慢慢振摇，不断放气，然后较快振摇)，按上述步骤重复数次，直至加人的石油醚提取液二相界面清晰时止，然后向石油醚提取液中加人其体积量一半左右的硫酸钠溶液，振摇十余次，将其静置分层后弃去水层，如此重复至提取液呈中性时止(一般GB/T 1 4 5 5 1-2 0 0 32 次一4次)。石油醚提取液再经过装有 2g-3g 无水硫酸钠的筒型漏斗脱水，滤人 2 5 0 m L平底烧瓶中，用旋转蒸发器浓缩至5 mL，定容 1 0 m L，供气相色谱测定。7.2.2 B法(酸性硅藻土柱层析法):适用于茶叶、蛆蝴等小动物及动物内脏样品。取内径 0.8 c m-1.0 c m，长 1 8 c m-2 0 c m干
16、燥的层析柱，柱底端塞上玻璃棉。加约 2 c m厚的无水硫酸钠，再装人3 g-4g 新调制的酸性硅藻土(1 0 g 硅藻土加 3 mL发烟硫酸，拌匀后，再加 3 ml-浓硫酸拌匀，即可)，上面再装 2 c m厚无水硫酸钠，用橡皮锤子轻轻敲打柱子，使其松紧适度。取待净化的提取液于旋转蒸发器中浓缩到 1 m L-2 mL，倾人装好的层析柱中，承接适当规格的容量瓶收集淋洗液。待层析往中提取液液面刚进人无水硫酸钠层后，用与提取液相同的溶剂1 0 m L(石油醚或正己烷)反复淋洗层析柱，直到容量瓶收集到定容 1 0 m L，供气相色谱测定。7.2.3 C法净化:遵照 G B/T 1 7 3 3 2-1 9 9 8中6.2的步骤进行，适用于粮食、水果、蔬菜样品，最后提取液需浓缩至1 0 M L,7.3 气相色谱测定7.3.1 测定条件 A7.3.1.1 柱 a)玻璃桂:2.0 m X2 m m(i.d)，填装涂有1.5%O V一1 7+1.9 5 0 o Q F-1 的C h r o m o s o r b W A W-DMC S,8 0目一1 0 0目的担体。b)玻璃柱:2.0 mX2 mm(i.