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GBT 19495.6-2004 转基因产品检测 基因芯片检测方法.pdf

1、GB/T19495.6-2004中通过摻入法或引物修饰等方法进行标记。利用核酸碱基配对的性质,将标记的测试样本变性后与点在芯片上的寡核苷酸探针特异性杂交,这样芯片上与标记测试样本特异性结合的点就会显示信号,通过基因芯片扫描仪检测发出的信号及其强度,根据信号值判断测试样本中是否存在特定的基因。7试剂除另有规定外,所有试剂的等级和要求应符合GB/T19495.2一2004中的规定。如未明确规定的,试剂应是分子生物学级的。所有试剂的储存和使用应符合供应商和实验室的要求。7.1cy5-dCTP。7.2点样液(0.2mol/L碳酸钠)。7.3基因芯片洗脱液(0.2%SDS)。7.4基因芯片杂交液(1%S

2、DS,10SSPE).7.5阴性标准物质。7.6阳性标准物质。7.7琥珀酸酐溶液(0.5%琥珀酸酐,溶剂为吡咯烷酮,pH8.0)。7.8硼氢化钠溶液(0.2%NaBH,溶剂为PBS)。7.9Cy标记的定位探针的互补链。8主要仪器设备8.1基因芯片点样仪。8.2紫外交联仪。8.3基因扩增仪。8.4基因芯片扫描仪:要配备具有分析信噪比的软件。8.5杂交仪。8.6清洗槽。8.7暗室。9检测9.1一般性要求附录A至附录C规定了转基因产品筛选检测、物种结构特异性检测和品系鉴定检测的基因芯片检测方法以及各自的适用范围。测试样品中DNA的提取,应按照GB/T19495.3一2004中的规定执行。每个测试样品提取时应做两个提取重复。每批测试实验需设置对照。对照的设置应符合GB/T19495.2一2004中的规定。所有对照的结果中若有一项不符合者,测试结果应放弃并重做。9.2基因芯片检测的种类根据测试样品的类型和(或)分析检测的要求,转基因产品的基因芯片检测分为:筛选检测、物种结构特异性基因检测和品系特异性基因检测等。10结果表述未检出转基因成分,检测低限为%检出转基因成分,检测低限为%。如果进行了品系检测,则进一步报告该检测样品是转基因品系。

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