1、书 书 书犐 犆犛 犅 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准犌犅犜 代替 猪常温精液生产与保存技术规范犜 犲 犮 犺 狀 犻 犮 犪 犾狊 狆 犲 犮 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀犳 狅 狉狆 狉 狅 犱 狌 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱狆 狉 犲 狊 犲 狉 狏 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犳 狉 犲 狊 犺犫 狅 犪 狉狊 犲犿犲 狀 发布 实施国 家 市 场 监 督 管 理 总 局国 家 标 准 化 管 理 委 员 会发 布书 书 书前言本标准按照 给出的规则起草。本标准代替 猪常温精液生产与保存技术规范，与 相比主要变化如下：增加了“”和“”（见第章）；增加了“宜用设备采精法，
2、按使用说明书操作”（见 ）；将精子畸形率由“”修改为“”（见 ，年版的）；删除了“细菌菌落数”（见，年版的）；精子活力证实方法增加了“使用自动分析仪器应按其检测方法操作”（见 ）；将稀释液值“”修改为“”（见 ，年版的 ）；将稀释后精液“每头份剂量”“总精子数”修改为“剂量、每剂量中直线前进运动精子数应符合 的规定。”（见 ，年版的 ）；将“精液产品质量（见表）”修改为“常温精液产品质量和标志应符合 的规定。”（见 ，年版的）。本标准由中华人民共和国农业农村部提出。本标准由全国畜牧业标准化技术委员会（）归口。本标准起草单位：青岛市畜牧兽医研究所、华南农业大学、北京养猪育种中心、黄岛区家畜改良站
3、。本标准主要起草人：戈新、张守全、王建华、周海深、张宝繤、李培培、刘玉华、程明、孟庆利。犌犅犜 猪常温精液生产与保存技术规范范围本标准规定了猪常温精液生产与保存的基本要求和技术要求，描述了对应的试验方法，给出了保存和运输的内容。本标准适用于猪的常温精液生产与保存。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。分析实验室用水规格和试验方法 种猪常温精液术语和定义下列术语和定义适用于本文件。原精液狉 犪狑狊 犲犿犲 狀采集后未经稀释的精液。常温精液犳 狉 犲 狊 犺狊 犲犿犲
4、 狀经稀释后在 下保存，仍具有受精能力的精液。注：改写 ，定义。精子活力狊 狆 犲 狉犿犿狅 狋 犻 犾 犻 狋 狔在 下呈直线前进运动的精子占总精子数的百分率。精子密度狊 狆 犲 狉犿犮 狅 狀 犮 犲 狀 狋 狉 犪 狋 犻 狅 狀单位体积精液中的精子数。精子畸形率犪 犫 狀 狅 狉犿犪 犾狊 狆 犲 狉犿狆 犲 狉 犮 犲 狀 狋 犪 犵 犲畸形精子占总精子数的百分率。基本要求 种公猪应健康且达到种用要求。成年公猪宜每周采精二次至三次，青年公猪宜每周一次至二次。犌犅犜 采精员应经过专业培训，工作时应着洁净工作衣、帽，穿长胶鞋，戴无毒塑料手套。采精室应设置采精区和安全区。采精区设置假台猪，
5、地面防滑，并保持清洁、安静和避光。精液处理室应设置精液检查、稀释和分装区，温度宜控制在 ，避免太阳光直射或紫外灯照射。配备仪器和用品参见附录。稀释液 配制用水应符合 中二级水或三级水的要求。商品稀释剂按说明书使用。不得使用过期或变质稀释剂。自配稀释液所用试剂应为分析纯，稀释液配方参见附录。稀释液值应为 。使用前配制，配制后应及时贴上标签，标明品名、配制日期和时间、经手人。稀释液应密封后置于冰箱中冷藏，保存时间不应超过。技术要求 精液采集 采精前准备 集精杯或保温杯（内置无毒塑料袋并覆盖四层纱布或一层精液过滤纸）、载玻片、盖玻片、精液处理器皿应预热至。显微镜载物台恒温板应预热至。精子密度仪使用前
6、应预热。采精 应剪去公猪包皮部长毛，清洁体表，擦干水渍。应挤净包皮积液，先用 高锰酸钾溶液清洗腹部和包皮，再用温水清洗后擦干。宜用设备采精法，按使用说明书操作。手握法采精时，应一只手戴双层无毒聚乙烯手套，按摩公猪包皮部，待公猪爬跨假台猪并伸出阴茎，脱去外层手套，握紧龟头，使其不能旋转，顺势将阴茎的“”状弯曲延直。另一只手持集精杯或保温杯，弃去最初射出的少量精液，收集精液至射精完毕。采精完毕后，应标记公猪耳号，送至精液处理室。精液检验 检验项目外观、气味、采精量、精子活力、精子密度和精子畸形率。原精液质量应符合表的规定，其中任何一项不符合要求的则废弃。犌犅犜 表原精液质量编号项目指标证实方法外观
7、呈乳白色，均匀一致目测气味略带腥味，无异味鼻嗅采精量 见 精子活力 见 精子密度（个）见 精子畸形率 见 证实方法 采精量采用称量法计算采精量，相当于。精子活力取中层精液 ，在 倍 倍显微镜下检查。每份精液取样二次，每个样观察三个视野，计算平均值。使用自动分析仪器应按其检测方法操作。精子密度采用精子密度仪测定。应定期用血细胞计数板法校正。精子畸形率采用伊红或姬姆萨染色法检查时，在 倍 倍显微镜下观察左、中、右三个视野中不少于 个精子。也可采用相差显微镜直接观察。每二个月抽检一次。精液稀释 精液采集后应尽快稀释，放置时间不宜超过 。采用等温稀释。精液与稀释液温差不得超过，根据精液温度调节稀释液温
8、度，不得反向操作。将稀释液沿杯壁缓慢加入精液中，轻轻摇动或沿一个方向搅拌，混合均匀。高倍稀释时，先低倍稀释（）（），后再加入余下的稀释液。稀释液总量以体积犞计，数值以毫升（）表示，按式（）计算：犞狏犮狊狏狏（）式中：狏 采精量，单位为毫升（）；犮 精子密度，单位为 个每毫升（个）；狊 每剂量中直线前进运动精子数，单位为 个；狏 剂量，单位为毫升（）。精液稀释后应静置，按 检测精子活力，活力不得低于。犌犅犜 精液分装 剂量、每剂量中直线前进运动精子数应符合 的规定。可采用袋装或瓶装，应使用对精子无毒害作用且灭菌的一次性塑料或硅胶制品。分装完毕，应排出空气后密封。记录应及时将精液检验、精液稀释、精
9、液分装的处理和结果填入精液质量检测登记表，登记表见附录。精液保存和运输 精液应置于 下后，平放入 恒温箱内避光保存；也可用 层 层纱布（或干毛巾）包严直接放入恒温箱内。保存的精液每隔摇动一次并记录，摇动时应轻缓均匀。每批精液应留样备查。同批号的精液在有效期内应抽样检查并记录，常温精液保存登记表见附录。常温精液产品质量和标志应符合 的规定。精液应置于 的恒温箱内避光运输，运输过程中避免强烈震动和碰撞。犌犅犜 附录犃（资料性附录）精液处理室配备仪器和用品精液处理室配备仪器和用品见表。表犃 精液处理室配备仪器和用品名称规格（技术参数）用途电子秤 ，称量精液、稀释液显微镜 观测精子数、活力和畸形率显微
10、镜恒温板室温（可调），工作面温差 载玻片、盖玻片恒温预热精子密度仪 测定精子密度计测量范围 ，精度 测定精液、稀释液的恒温箱 保存精液干燥箱室温 ，波动度预热器皿和消毒用品冰箱冷藏室保存试剂和剩余稀释液电子天平 称量化学试剂（选用）恒温水浴锅双孔或四孔等温精液与稀释液恒温磁力搅拌器，容量 稀释液搅拌、加热血球计数板 测定精子密度计数器 精子计数微量移液器 精液取样或稀释微量移液器 精液取样或稀释量筒 量取液体三角瓶 配制稀释液储水瓶盛放配制用水烧杯 、精液稀释热封口机袋装精液封口分装架分装精液载玻片精子活力的测定盖玻片精子活力的测定擦镜纸擦拭显微镜镜头移液枪吸嘴 精液取样或稀释稀释剂配制精液稀
11、释液犌犅犜 表犃（续）名称规格（技术参数）用途精液袋、瓶分装及保存精液温度计 测量精液、稀释液等温度玻璃棒稀释液配制或精液稀释标签纸精液、稀释液标签犌犅犜 附录犅（资料性附录）常见常温精液稀释液配方常见常温精液稀释液配方见表。表犅 常见常温精液稀释液配方成分配方一配方二配方三配方四保存时间 葡萄糖 柠檬酸三钠 钠盐 碳酸氢钠 氯化钾 青霉素钠 硫酸链霉素 聚乙烯醇（，）三羧甲基氨基甲烷（）柠檬酸 半胱氨酸 海藻糖 林肯霉素 注：单位为克每升。犌犅犜 书 书 书附录犆（规范性附录）精液质量检测登记表精液质量检测登记表见表。表犆 精液质量检测登记表采精日期采精时间品种耳号采精员外观气味采精量精子活力精子密度 个精子畸形率稀释液品名总量稀释后精子活力头份数质检员备注犌犅犜 书 书 书附录犇（规范性附录）常温精液保存登记表常温精液保存登记表见表。表犇 常温精液保存登记表产品名称生产单位生产日期及时间批号 品种 耳号头份数每头份总精子数 个精子畸形率剂量有效期保存第保存第保存第精子活力摇动时间精子活力摇动时间精子活力摇动时间出厂前精子活力质检员 备注犌犅犜