1、GB/T28072-2011田间取样方法：在果实生长期，仔细检查果园中果树，采集有典型梨黑斑病症状的果实、叶片和嫩梢。6.1.2症状观察6.1.2.1果实症状幼果发病初期，果面出现黑色小斑点，逐渐扩大呈圆形，病斑稍凹陷：成熟果实受害时，初期症状与幼果相似，但发病快，病斑大，不规则，黑褐色。数个病斑可融合成大块病斑，果面变黑褐色。6.1.2.2叶片症状嫩叶容易受害。叶片病斑初期为圆形或不规则形，后扩大呈同心环纹状，暗褐色，有时数个病斑融合成不规则形大块病斑，并出现谈紫色环纹。湿度高时，病斑上产生黑色霉层。6.1.2.3新梢症状产生黑色小斑点，发展成长椭圆形，暗褐色，凹陷，病健交接处产生裂缝。湿度
2、高时，病斑表面有霉状物。6.2实验室检测与鉴定6.2.1分离培养采用马铃薯-胡萝卜培养基(PCA)(马铃薯20g、胡萝卜20g、琼脂15g、蒸馏水1000mL),用于病原菌的分离、鉴定和菌种保存。果实：在病斑周围的病健交界处用70%酒精擦洗消毒，用解剖刀去除表皮，取少许果肉腐烂部分放在PCA培养基上，置于25培养箱中，12h光照，12h黑暗条件下培养3d5d。叶片和新梢：取病健交界部位边长约0.5cm组织，用0.5%NaCIO表面消毒3min,用无菌水冲洗3遍，置于PCA平板（直径9cm)培养基上，每皿放置3片4片，于25培养箱内培养，黑暗和光照各12h交替。3d5d后用显微镜检查，6.2.2
3、形态鉴定6.2.2.1产孢表型观察将出现链格孢菌的培养皿置于实体显微镜下，在50下观察，用极细解剖针(00号)挑取具有典型A.gaisen产孢结构的单根孢子链上的孢子转接于PCA培养基平板上。将该培养基平板置于2025的平台上，两支40W冷白光(4200k)灯管，8h照射和16h黑暗交替进行培养，灯管距离培养物约40cm,培养物面向上，培养7d后将培养皿置于实体显微镜下（培养物面向上）观察产孢表型。6.2.2.2分生孢子形态测量从菌落中挑取少量培养物，以水作浮载剂，制成玻片，在显微镜下观察。详细记录并测量分生孢子大小，包括长、宽、喙长、横隔膜数、纵（斜）隔膜数，孢子颜色，孢子表面有无突起等。每个菌株测量30个孢子。6.2.3致病性测定将已初步鉴定的菌株进行叶片接种试验，取沙梨(Pyrus pyrif6lia)的嫩叶，每个菌株接种5片叶，在叶片的正反两面用针刺造成伤口，将配好的孢子悬浮液(600000个孢子/L)均匀涂在叶片的正反两2
