1、SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4537.3-2016商品化试剂盒检测方法氯霉素方法三Commercial kit method-Chloroamphenicol-Test method 2016-06-28发布2017-02-01实施3720中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布刮涂层查真伪SN/T4537.3-2016前言本部分为SN/T4537商品化试剂盒检测方法氯霉素的第3部分。本部分按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分主要起草单位：中华人民共和国江苏出入境检验检疫局、深圳市易瑞生物技术有限公司、中国检验
2、检疫科学技术研究院、中华人民共和国上海出入境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院、合肥工业大学、北京三元食品股份有限公司。本部分主要起草人：薛峰、袁芳、张文国、曾德新、林季敏、蒋原、杨捷琳、蔡宝亮、陈立俊、陈伟、钱志娟、薛强。SN/T4537.3-2016商品化试剂盒检测方法氯霉素方法三1范围SN/T4537的本部分规定了纯牛奶中氯霉素残留量的胶体金免疫层析检测方法。本部分适用于采用胶体金免疫层析试纸条对纯牛奶中氯霉素残留进行筛选检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适
3、用于本文件。SN/T2775商品化食品检测试剂盒评价方法3原理应用胶体金竞争抑制免疫层析法的原理，样品中残留的氯霉素与检测线上的氯霉素抗原共同竞争胶体金标记的特异性抗体，通过检测线与控制线颜色深浅比较，对样品中氯霉素的含量定性判读。4试剂与材料4.1氯霉素检测试剂盒本试剂盒参考SN/T2775由国家认监委商品化食品检测试剂盒评价专家委员会进行了评价，评价结果参见附录A。商品化试纸条、反应杯及反应试剂在28、干燥、避光条件下保存，产品有效期不得少于12个月。试剂盒组成如下：a)氯霉素检测试纸条；b)微孔试剂（主要成分为胶体金标记的氯霉素抗体）。4.2试剂氯霉素对照品。5仪器设备5.1温育器：40
4、2。5.2便携式读数仪：测量波长：525nm,带宽士8nm,波长准确度士3nm。计算方式：峰面积分析，并可计算检测线峰面积/控制线峰面积比值。5.3移液器：200L。lSN/T4537.3-20166样品制备检测前样品需充分混匀。7分析步骤7.1将温育器温度设定为40；吸取200L样品于微孔中，510次抽吸，迅速混合均匀并置于温育器中温育15min。7.2温育结束后，将试纸条插人到微孔中温育8min。7.3温育结束，停止计时，从微孔中取出测试条，去掉测试条下端的吸水海绵并进行结果判定。7.4检验完毕，余下的测试条放回铝箔袋中并密封好，放到试剂盒中，28保存。8结果判定通过对比控制带和检测带的颜
5、色深浅来进行结果判定。由于长时间放置会引起检测带颜色的变化，需在5min内进行结果判定a)目视结果判定依据（如图1所示）：1)无效：控制线(C线)不显色；2)阴性：检测线(T线)颜色比控制线(C线)颜色深或者强；3)弱阳性：检测线(T线)颜色与控制线(C线)颜色相当；4)阳性：检测线(T线)不显色，或检测线(T线)颜色与控制线(C线)颜色浅或者弱。吸水纸控制线NC膜氯霉素检测线海绵端试纸条示意图空白试纸无效阴性弱阳性阳性图1目视判定示意图b)通过便携式读数仪对试纸条读值，并依据下列方式进行判定：1)阴性：读数数值1.1，则判为阴性；2)弱阳性：0.9读数数值1.1，则判为弱阳性；需要重新检测，若结果依然为弱阳性，则判定为阳性；若结果为阴性，则判定为阴性；3)阳性：读数数值0.9，则判为阳性。2SN/T4537.3-20169方法性能指标9.1检出限0.2 g/kg。9.2特异性当浓度100mg/kg时，磺胺类、喹诺酮类、3-内酰胺类、四环素类四大类药物均无交叉反应。