1、中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 5326.22020进出口食品化妆品专业分析方法验证指南第 2 部分：化学方法Guideline on validation of test methods for food and cosmeticsof import and exportPart 2：Chemical method2020-12-30 发布2021-07-01 实施ICS 67.050CCS X 04中华人民共和国海关总署发 布SN/T 5326.22020I前 言进出口食品化妆品专业分析方法验证指南系列标准由以下 6 个部分组成：第 1 部分：通用指南；第 2 部分：化学方法
2、；第 3 部分：传统微生物学方法；第 4 部分：分子生物学方法；第 5 部分：免疫学方法；第 6 部分：放射性分析方法。本部分为系列标准的第 2 部分。本部分按照 GB/T 1.12009 给出的规则编写。请注意本部分的某些内容可能涉及专利，本部分的发布机构部承担识别这些专利的责任。本部分由中华人民共和国海关总署提出并归口。本部分起草单位：深圳市检验检疫科学研究院、中华人民共和国深圳海关、中华人民共和国上海海关、中华人民共和国南京海关、中华人民共和国天津海关、中华人民共和国福州海关、中华人民共和国杭州海关、中华人民共和国合肥海关。本部分主要起草人：岳振峰、肖陈贵、肖锋、朱坚、丁涛、郑文杰、杨方
3、、蒋沁婷、韩芳。1SN/T 5326.22020进出口食品化妆品专业分析方法验证指南 第 2 部分：化学方法1 范围本部分规定了化学分析方法标准的验证指南，是对本标准第 1 部分在化学分析方法标准验证方面的具体要求和补充。本部分适用于化学分析方法标准建立过程中方法的验证，无论该标准是新制定标准、修订标准，还是等同采用或修改采用国际标准。此外，实验室采用非标准方法及自主研究开发新方法时,也可参照本程序用以验证这些方法的适用性。2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包
4、括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6379.12014 测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第 1 部分：总则与定义GB/T 274172017 合格评定化学分析方法确认和验证指南GB/T 324672015 化学分析方法验证确认和内部质量控制术语及定义SN/T 00012016 出口食品化妆品理化测定方法标准的基本规定CNASGL03 能力验证样品均匀性和稳定性评价指南3 术语和定义GB/T 6379.12004、GB/T 324672015、GB/T 274172017、SN/T 00012016 界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3.1 定性方法 qualitative m
5、ethod根据物质的化学、生物或物理性质对其进行鉴定的分析方法。GB/T 274172017，定义 3.53.2 定量方法 quantitative method测定被分析物的质量或质量分数的分析方法，可用适当单位的数值表示。GB/T 274172017，定义 3.63.3 筛选方法 screening method2SN/T 5326.22020具有高效处理大量样品的能力，用于检测一种物质或一组物质在所关注的浓度水平上是否存在的方法。GB/T 274172017，定义 3.83.4 确证方法 confirmaory method能提供目标物全部或部分信息，依据这些信息可以明确定性，必要时可在
6、关注的浓度水平上进行定量的方法。GB/T 274172017，定义 3.73.5 特异性/选择性 specificity/selectivity方法能够区分目标分析物和样品中其他化合物（如其他待测物、基质成分、其他可能的干扰物）的能力。3.6 检出限 limit of detection（LOD）分析物能被检测的最小浓度，即在一定的置信度内，用某一方法可定性检测到样品中分析物的最小浓度。SN/T 00012016，定义 3.13.7 定量限 limit of quantification（LOQ）样品中被测组分能被定量测定的最低浓度或最低量，此时的分析结果应能确保一定的正确度和精密度。GB/T
7、 274172017，定义 3.143.8 容许限 permitted limit（PL）对某一定量特性规定和要求的物质限值（如：最大残留限量、最高允许浓度或其他最大容许量等）。GB/T 274172017，定义 3.93.9 关注浓度水平 level of interest对判断样品中物质或分析物是否符合法规规定和要求的有决定意义的浓度（如：容许限浓度）。GB/T 274172017，定义 3.103.10 测定范围 determination range3SN/T 5326.22020在一定的正确度和精密度的条件下，方法可以定量测定样品中被分析物高低限浓度或量的区间。3.11 正确度 tr
8、ueness由大量测试结果得到的平均数与接受参照值之间的一致程度。GB/T 6379.12004，定义 3.73.12 精密度 precision在规定条件下，独立测试结果间的一致程度。GB/T 6379.12004，定义 3.123.13 重复性 repeatability在重复性条件下的精密度。GB/T 6379.12004，定义 3.133.14 重复性条件 repeatability conditions在同一实验室，由同一操作员使用相同的设备，按相同的测试方法，在短时间内对同一被测对象相互独立进行的测试条件。GB/T 6379.12004，定义 3.143.15 再现性 reprod
9、ucibility在再现性条件下的精密度。GB/T 6379.12004，定义 3.173.16 再现性条件 reproducibility conditions在不同的实验室，由不同的操作员使用不同设备，按相同的测试方法，对同一被测对象相互独立进行的测试条件。GB/T 6379.12004，定义 3.183.17 耐用性/稳健性 ruggedness/robustness分析方法对实验室一般不刻意控制或不能保持完全一致的条件微小变化的敏感性。GB/T 324672015，定义 9.154SN/T 5326.220203.18 有证标准物质 certified reference materi
10、als（CRMs）附有证书的标准物质，其一种或多种特性值用建立了溯源性的程序确定，使之可溯源到准确复现的用于表示该特性值的计量单位，而且每个标准值都附有给定置信水平的不确定度。3.19 基质 matrix不包括分析物的、用于分析研究的材料或组分。SN/T 00012016，定义 3.104 分析方法的性能参数规定4.1 验证参数的选择4.1.1 方法起草方应根据所制定方法的预期用途选择合适的验证参数，并形成实验室内验证方案。典型的验证参数包括方法的特异性、检出限、定量限、测定范围、灵敏度、稳健性、正确度、精密度（重复性和再现性）。对于不同类型的化学检测方法，验证参数的选择见表 1。表 1 验证
11、参数的选择方法类型检出限定量限正确度重复性再现性特异性稳健性测定范围定性方法S-C-定量方法S-C-注：“S”=筛选方法（Screening methods）；“C”=确证方法（Confirmatory methods）；“”=必选参数。4.1.2 对于定性方法，实验室内验证和独立实验室验证参数至少应包括方法的特异性、检出限、稳健性等技术参数；实验室间验证参数至少应包括方法的检出限和特异性。4.1.3 对于定量方法，实验室内验证和独立实验室验证参数至少应包括方法的特异性、检出限、定量限、测定范围、正确度、重复性、稳健性等技术参数；实验室间验证参数至少应包括方法的定量限、测定范围、正确度和再现性
12、。4.2 化学分析方法性能参数的具体规定化学分析方法性能参数的具体规定可参考 SN/T 00012016。5 化学分析方法性能参数的验证5.1 验证样品的准备5.1.1 对于适用的样品基质和待测化合物可以满足能力验证技术要求的检测（如方法适用的样品基质和待测化合物种类均较少，且待测化合物的稳定性满足长途冷链运输要求），可按照下述方法准备5SN/T 5326.22020验证样品：a）方法起草方应进行验证用样品的准备，对样品进行匀质化，并对其均匀性和稳定性进行测试，均匀性与稳定性评价参照 CNAS-GL03进行。测试完成后，将评价结果提交到秘书处，由秘书处组织专家审核。b）样品水平：对于一种样品基
13、质，一般要求使用 5 种不同水平的样品。此外，实验室间验证中样品的类型和数目还取决于获取、加工及分发样品过程的难度和费用，取决于进行测试所需要的时间和费用等。样品的选择既应确保其能代表测量方法在正常使用中的那些样品，又应满足方法的预期用途。一个实验室间验证试验应最少选择3 种样品代表不同的测试水平，并包含方法测定范围的最低浓度水平（定量限）、关注浓度水平和最高浓度水平。c）样品数量：在决定试验所需的样品数量时，应考虑到在获得某些测试结果时会出现偶然的操作过失，从而需用到额外的样品。需准备的样品数量应当足以满足测试之用，并且允许适当的冗余。但是，也不能提供过多的样品，以防止有实验室出于某种原因，
14、过多地进行试验，并且从中“挑选”报告某些检测结果，从而人为地提高了该实验室的精密度。一般以所需试验样品量的 2 倍5 倍为宜。d）正确度验证过程中所用样品的接受参照值可作为约定真值。标准样品可以是：1）有证的标准样品；2）按已知特性试验目的生产的样品；3）其特性根据另一测量方法测量，已知偏倚可以忽略不计的样品。评估一个标准检测方法的偏倚，应尽可能采用有证标准样品（CRM）来进行。在无法获得有证标准样品或控制样品或有证标准样品的制备特别昂贵的情况下，允许采用在空白样品基质中添加已知浓度标准物质的办法。5.1.2 对于适用的样品基质和待测化合物不能满足能力验证技术要求的检测方法（需要验证的样品基质
15、种类多的方法、待测化合物种类多的方法、待测化合物的稳定性较差的方法等），允许协同验证实验室按照作业指导书规定浓度水平自行制备标准添加样品，但标准添加样品至少应于测试开始 24 h前制备完毕，保证标准溶液与样品之间充分吸附，以尽可能模仿真实样品的状态。对于一种样品基质，应至少添加 3 个浓度水平，并包含方法测定范围的最低浓度水平（定量限）、关注浓度水平和最高浓度水平。5.2 方法性能参数的验证5.2.1 特异性5.2.1.1 验证要求残留分析类、成分鉴别类、杂质检测类、主成分含量测定类等方法建立过程中均应考察其特异性。宜用各种样品来研究方法的特异性，所用的样品种类从单纯的目标分析物到具有复杂基体
16、的混合物。在每种情况下，都应当确定被研究的分析物的分离情况，并充分说明可疑干扰的影响。如采用的方法特异性不能满足检测要求，应采用多个方法予以补充，方法特异性的任何限制都应在方法中有文件化的规定。5.2.1.2 验证方法5.2.1.2.1 残留分析类方法的特异性对于残留分析方法，区分目标分析物与相似物质（异构体、代谢物、降解产物、内源性物质、基质成分等）的能力至关重要。一般应联合使用下述两种方法检查干扰：a）分析一定数量的代表性空白样品，检查在目标分析物出现的区域是否有干扰（信号、6SN/T 5326.22020峰等）；b）在代表性空白样品中添加一定浓度的有可能干扰分析物的定性和/或定量的物质。5.2.1.2.2 成分鉴别类方法的特异性鉴别方法应能区分可能存在的结构相近的化合物。区分过程可通过测试含有分析物的样品获得阳性结果、测试不含分析物的样品获得阴性结果来确证（如与已知标准物质相比对）。此外，鉴别试验用于测试与被分析物结构相似或相近物质不应获得阳性结果。选择潜在干扰物应基于考虑到可能存在的干扰物质的合理科学判断。5.2.1.2.3 含量测定和杂质测定方法的特异性作为纯度、杂质含量检查